close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

...Ð±Ð¾Ð»Ñ Ð½Ñ Ñ Ñ Ñ Ð¾Ð½Ð¸Ñ ÐµÑ ÐºÐ¸Ð¼ Ñ Ð¸Ð½Ð¾Ñ Ð¸Ð½Ñ Ñ Ð¸Ñ Ð¾Ð¼ до и Ð¿Ð¾Ñ Ð»Ðµ Ð»ÐµÑ ÐµÐ½Ð¸Ñ

код для вставкиСкачать
№ 2 – 2010
УДК 616.216.1-002-036.12:616.03]:576.8097.3
Пост. 26.02.2010
С.З. Пискунов*, П.В. Калуцкий**, А.А. Калинкин*, А.В. Беседин**, А.М. Лисицина**
АНАЛИЗ ПОКАЗАТЕЛЕЙ МЕСТНОГО ИММУНИТЕТА
БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ РИНОСИНУСИТОМ
ДО И ПОСЛЕ ЛЕЧЕНИЯ СИНУФОРТЕ
КУРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ,
КАФЕДРА ОТОРИНОЛАРИНГОЛОГИИ*,
КАФЕДРА МИКРОБИОЛОГИИ, ВИРУСОЛОГИИ, ИММУНОЛОГИИ**
Ключевые слова: иммуноглобулины, функциональная активность нейтрофилов, фагоцитарное
число, хронический риносинусит.
В состав секрета желёз слизистой оболочки полости
носа (ПН) и околоносовых пазух (ОПН) входят антибактериальные неспецифические защитные факторы: лизоцим, лактоферрин, дефенсины, миелопероксидаза,
низкомолекулярные катионные пептиды, компоненты
комплемента и др. В состав слизи входят также и иммуноглобулины классов IgA, IgM и IgG, которые относятся
к факторам адаптивного иммунитета [7]. Местный иммунитет основан на взаимодействии адаптивного и врождённого иммунитета, которое отражается в лимфоэпителиальном симбиозе. Его морфологическим субстратом
являются лимфоциты глоточной миндалины, лимфоциты
собственного слоя слизистой оболочки и эпителиальные
клетки слизистой оболочки носа, глоточной миндалины,
криптальный эпителий нёбных миндалин, во взаимодействии определяемые как мукозассоциированная лимфоидная ткань [3, 10].
Результатом такого взаимодействия является формирование мукозального иммунитета, который определяется взаимодействием Т-, В-лимфоцитов с эпителиальными клетками и представляет первую линию местной
специфической защиты слизистых оболочек от бактериальных и вирусных агентов [4]. Препарат Синуфорте,
успешно используемый для лечения риносинуситов [2,
5], вызывает усиленную рефлекторную секрецию желёз
слизистой оболочки полости носа и его пазух [6]. В экспериментальных исследованиях получены доказательства
влияния препарата Синуфорте на состояние местного
специфического и неспецифического иммунитета интактных ПН и ОПН [8]. В связи с этим, актуально и практически значимо клиническое исследование местного иммунного статуса у больных хроническими риносинуситами.
Этиологические факторы ХРС разнообразны: слизистая оболочка является биотопом, где персистирует
большое количество микрофлоры; воздействие респираторных вирусов может быть как экзогенного, так и эндогенного происхождения (доказано персистирование
в эпителиальных клетках слизистой оболочки носа риновируса, аденовируса) [1]. Механизмы, обуславливающие персистирование микробной флоры и вирусов,
достаточно сложны. Лидирующими факторами их активации является ослабление мукоцилиарного клиренса,
снижение неспецифических гуморальных факторов (секреторных и клеточных пептидов, лейкоцитарного интерферона и др.), нарушение неспецифической клеточной защиты в виде полиморфноядерного и моноцитарТаблица 1
Сравнительные иммунологические показатели смывов полости носа в группе с применением стандартной схемы лечения
Этапы исследования
Показатели
иммунитета
Контрольные
данные
m
До лечения
m
После лечения
m
IgE, кЕ/л
0
±0
0,97
± 0,0388
0,95
± 0,0380
SIgA, г/л
0,014
± 0,006
0,158
± 0,00632
0,163
± 0,00652
IgM, г/л
0,025
± 0,017
0,12
± 0,0048
0,09
± 0,0036
IgG, г/л
0,042
± 0,017
0,087
± 0,00348
0,098
± 0,00392
ФА, %
75
± 5,7
74,11111
± 2,96444
73,55557
± 2,94221
ФЧ
9,1
± 2,4
4,28333
± 0,17133
4,66668
± 0,18666
ИАФ
6,8
± 1,1
3,03756
± 0,12150
3,14123
± 0,12565
Таблица 2
Сравнительные иммунологические показатели смывов полости носа в группе с применением Синуфорте
Этапы исследования
Показатели
иммунитета
Контрольные
данные
m
До лечения
m
После лечения
m
IgE, кЕ/л
0
±0
0,97
± 0,0388
0,54
± 0,0216
SIgA, г/л
0,014
± 0,006
0,158
± 0,00632
0,194
± 0,00776
IgM, г/л
0,025
± 0,017
0,12
± 0,0048
0,06
± 0,0024
IgG, г/л
0,042
± 0,017
0,087
± 0,00348
0,101
± 0,00404
ФА, %
75
± 5,7
74,11111
± 2,96444
71,66667
± 2,86667
ФЧ
9,1
± 2,4
4,28333
± 0,17133
5,97778
± 0,23911
ИАФ
6,8
± 1,1
3,03756
± 0,12150
4,36122
± 0,17445
4
№ 2 – 2010
ного фагоцитоза, нарушение специфических факторов
общего иммунитета и др.
Метод иммуноферментного анализа (ИФА) нашёл
широкое применение в области иммуногистохимии, иммунологии и медицины. Методами ИФА возможно определение иммуноглобулинов (видовая принадлежность,
субклассы, специфичность), а также идентификация
лимфоцитов (субпопуляций). Он характеризуются высочайшей специфичностью и чувствительностью, достигающей 97–99%. Метод твёрдотельного иммуноферментного анализа — тИФА используется для определения
широкого класса веществ: гормонов, онкомаркеров, лекарственных препаратов в крови больного (так называемый, мониторинг лекарственных препаратов), наркотиков, бактерий, вирусов и антител против них.
Цель и задачи исследования
Целью настоящей работы явилось изучение показателей местного адаптивного и врождённого иммунитета
больных хроническими гнойными риносинуситами до и
после лечения препаратом Синуфорте. Для реализации
поставленной цели были определены и последовательно
решены следующие задачи:
• определить содержание иммуноглобулинов, функциональную активность нейтрофилов и оценить полноценность фагоцитарного акта;
• оценить взаимосвязь показателей местного иммунитета с особенностями этиологии и патогенеза ХРС.
Материалы и методы исследования
В исследовании участвовала контрольная группа клинически здоровых добровольцев (14 человек, мужского
пола в возрасте от 19 до 25 лет) и 2 исследуемые группы — 20 больных ХРС в возрасте от 19 до 40 лет. 10 пациентов первой исследуемой группы получали лечение
по стандарту: пункция и дренирование пазух пластиковыми дренажами, через которые проводилось ежедневное
промывание пазух антисептическими растворами 2 раза
в сутки, аэрация пазухи («продувание» её примерно
20 мл воздуха), общая антибиотикотерапия (обычно цефалоспорины в/м в стандартной дозировке) и физиотерапия — лазеромагнит на область ППН. При такой
технологии лечения больной находится в стационаре в
среднем 10–12 дней. Смыв отделяемого из ПН производился в день выписки.
В схему лечения пациентов второй группы был
включён препарат Синуфорте. Поступавшие больные
с установленными дренажами не получали антибиотик
парентерально, мы проводил промывание через дренаж физиологическим раствором 1–2 раза в сутки, после аэрации пазухи и аспирации из ПН электроотсосом
производилось эндоназальное распыление Синуфорте.
При комбинировании пункционного метода и Синуфорте
ППН очищались от гнойного отделяемого на 4–5 сутки и
дренажи удалялись. На 8 сутки производилась контрольная компьютерная томография ППН, смыв для нашего
исследования и выписка из стационара.
Критериями отбора исследуемых было отсутствие значимых изменений структур остиомеатального комплекса,
отсутствие аллергичеких реакций, бронхиальной астмы и
общих соматических заболеваний. В группе присутствовали больные с разной распространённостью процесса,
включая пансинусит.
С помощью специального распылителя и стерильного
одноразового шприца производился смыв физиологическим раствором объёмом 2 мл отделяемого из полости
носа пациента до применения и на 8 сутки после применения Синуфорте. Смыв объёмом 2 мл производился
в стерильный лоток, далее помещался в одноразовый
шприц. Далее производился его тИФА в лаборатории
магнитобиологии Курского государственного медицинского университета.
Исследовались следующие показатели: уровень IgE,
SIgA, IgM, IgG, а также функциональная активность нейтрофилов, фагоцитарное число и индекс активности фагоцитов. Функциональная активность нейтрофилов (ФА)
оценивалась по активности фагоцитоза — проценту активных фагоцитов из числа сосчитанных нейтрофилов,
фагоцитарному числу (ФЧ) — среднему числу частиц латекса, поглощённых одним фагоцитом из числа сосчитанных полиморфноядерных лейкоцитов; о полноценности
фагоцитарного акта судили по завершённости фагоцитоза и индексу активности фагоцитов. Индекс активности
фагоцитов (ИАФ) — число фагоцитированных частиц латекса, умноженное на процент фагоцитирующих клеток и
разделённое на число подсчитанных клеток [9].
Исследование уровней IgE, SIgA, IgM, IgG проводилось с помощью наборов реагентов «ВЕКТОР-БЕСТ»
Диаграмма 1. Динамика изменения концентрации иммуноглобулинов IgE, sIgA, IgM, IgG в смывах
полости носа: а — с применением стандартной схемы лечения; б — с применением Синуфорте
5
№ 2 – 2010
(ООО «ВЕКТОР-БЕСТ», г. Новосибирск) методом твёрдофазного иммуноферментного анализа.
Результаты исследования
При исследовании первичного материала (до лечения) получены следующие результаты. Зарегистрирован
высокий уровень активности фагоцитов слизистой оболочки на фоне сниженного уровня их переваривающей
активности (ФЧ) и интегрального показателя их функционального состояния (ИАФ). У всех пациентов обнаружен
высокий уровень IgE, который отсутствует в составе секрета слизистой оболочки здоровых доноров. В смывах
отмечается повышение, по сравнению с контрольной
группой, значений SIgA и IgM. В смывах концентрация
IgG находится на верхней границе региональной нормы,
это признак декомпенсации иммунных систем защиты
слизистой оболочки носа у больных ХРС. При корреляционном анализе, в паре IgE — ФА до лечения выявлена высокая степень корреляции, что может указывать
на способность фагоцитов компенсировать недостаточную эффективность системы трёхклеточной кооперации
(В-лимфоцит←макрофаг→Т-лимфоцит).
До лечения у больных ХРС в слизистой оболочке ПН и
ОНП протекал длительный выраженный воспалительный
процесс. Высокий уровень говорит об участии аллергического компонента в патогенезе процесса. Имеет место
нарушение локальных механизмов иммунной защиты с
развитием локальной аллергической реакции тканей, что
обуславливает хронизацию и утяжеление воспалительного процесса в слизистой оболочке. Подробные значения
иммунологических показателей в группе до лечения представлены в таблицах 1 и 2. Динамику изменения показателей иммунитета демонстрируют диаграммы 1, 2 и 3.
В первой исследуемой группе, получавшей стандартную терапию не произошло практически никаких изменений в состоянии фагоцитов слизистой оболочки. Уровень
IgE снизился лишь на 1%. Содержание SIgA возросло на
3%, что иллюстрирует таблица 1 и диаграммы 1а, 2а, 3а.
После лечения препаратом Синуфорте произошло изменение 2 из 3 показателей состояния фагоцитов слизистой, характеризующееся коррегированием ИАФ и ФЧ, концентрация IgG в смывах достоверно выросла и превысила
показатели больных до лечения. Уровень же IgM в смывах
слизистой носа практически полностью нормализовался
через 8 дней после проведённой терапии. Уровень SIgA
превысил исходные показатели в группе больных почти на
20%, превышая контрольные показатели. Значение же IgE
в смывах после терапии достоверно снизилось практически вдвое, но так и не достигло нормальных значений. Это
указывает на наличие сформированной популяции аллергических плазматических клеток и позволяет предположить наличие аллергена в изучаемой области.
Таким образом, после применения препарата Синуфорте были получены признаки коррегирования исследованных иммунологиче ских показателей, снижение выраженности хронического аллергического процесса, что является
ещё одним важным элементом патогенетического лечения
и объясняет механизм действия Синуфорте. Так же такие
изменения указывают на способность препарата регулировать обменные процессы в иммунокомпетентных клетках,
что иллюстрирует таблица 2 и диаграммы 1б, 2б и 3б.
Выводы
1. В патогенезе ХРС важное значение имеет аллергический компонент обуславливающий высокую концентрацию IgE и декомпенсация факторов местной специфической и врождённой иммунной защиты слизистой оболочки ПН и ОНП.
2. Высокий уровень активности фагоцитов слизистой
оболочки ПН и ОНП больных ХРС на фоне сниженного
уровня их переваривающей активности свидетельствует
о нарушении клеточного метаболизма фагоцитов.
3. Фагоциты в смывах больных высокоактивны, но
обладают низкой переваривающей способностью, что
указывает на их участие в компенсации недостаточной
эффективности системы трёхклеточной кооперации на
местном уровне, с чем, вероятно, связано длительное
скрытое течение ХРС до явного клинического проявления процесса.
4. Применение Синуфорте способно корригировать содержание иммуноглобулинов в секрете слизистой оболочки больных ХРС, и что самое важное, увеличивать в
слизистой оболочке активность клеток продуцирующих
SIgA и IgG.
5. Снижение содержания IgE вследствие применения
препарата свидетельствует о возможности его антиал-
Диаграмма 2. Динамика изменения функционального состояния фагоцитов: а — фагоцитарное число и индекс
фагоцитарной активности с применением стандартной схемы лечения; б — с применением Синуфорте
6
№ 2 – 2010
Диаграмма 3. Динамика изменения функциональной активности нейтрофилов:
а — с применением стандартной схемы лечения; б — с применением Синуфорте
лергического действия в отношении патогенетического
компонента ХРС.
6. Препарат Синуфорте улучшает внутриклеточный метаболизм местных фагоцитов и, вероятно, стимулирует
за счёт улучшения кровоснабжения миграцию в слизистую функционально полноценных фагоцитов из микроциркуляторного русла.
7. Синуфорте обладает эффективным многокомпонентным механизмом лечебного действия: стимулирует секрецию, активирует местное кровообращение, улучшает
мукоцилиарный транспорт, корригирует показатели специфического и врождённого параметров иммунитета ПН
и ОНП, снижает аллергизацию процесса.
Список литературы
1. Арефьева Н.А. Иммунология, иммунопатология и проблемы иммунотерапии в ринологии. Уфа: БГМУ, 1997. —120 с.
2. Безшапочный С.Б. Результаты применения препарата
Синуфорте в лечении больных с острым гнойным риносинуситом // Ринология (Киев). — 2004. — № 3. — С. 63–67.
3. Быкова В.П. Лимфоэпителиальные органы в системе
местного иммунитета слизистых оболочек // Архив патологии. —
1995. — № 6. — С. 16−22.
4. Волков А.Г., Трофименко С.Л. Клинические проявления
вторичного иммунодефицита при заболеваниях ЛОР органов. —
Ростов-на-Дону, 2008. — 208 с.
5. Гедеванишвили М.Д. Синуфорте — новое слово в лечении
синуситов // Ринология (Киев). — 2002. — № 2. — С. 67−69.
6. Гедеванишвили М.Д., Готидзе Н.М., Сихарулидзе И.С. Рефлекторные механизмы назопараназальной секреции в условиях применения препарата Синуфорте // Вестник оториноларингологии. — 2007. — № 3. — С. 54−56.
7. Иммунология / А. Ройт [и др.]. — М.: Мир, 2000. — 592с.
8. Пискунов С.З., Должиков А.А., Калинкин А.А. Экспериментально-морфологическое исследование влияния Синуфорте
на слизистую оболочку полости носа и верхнечелюстной пазухи
// Российская ринология. — 2009. — №4. — С. 7–13.
9. Теплова С.Н. Оценка факторов неспецифической защиты
организма от инфекции в клинической практике: методические
рекомендации. — Челябинск, 1978. — 57 с.
10. Brandtzaeg P. Immune functions of human nasal mucosa and
tonsils in health and disease. In: Bienenstock J., editor. Immunology
of the lung and upper respiratory tract. — New York, N.Y: McGrawHill Book Co.; 1984. — Р. 28–95.
[email protected]
Resume
S.Z. Piskunov, P.V. Kalutsky,
A.A. Kalinkin, A.V. Besedin,
A.M. Lisitzyna
LOCAL IMMUNITY
PARAMETERS
IN PATIENTS WITH CHRONIC
RHINOSINUSITIS BEFORE
AND AFTER TREATMENT
WITH SYNOFORTE
Key words: immunoglobulins, neutrophil functional
activity, phagocytic index, chronic rhinosinusitis.
Purpose: to evaluate immunoglobulins level, neutrophil
functional activity and phagocytic index credibility. To estimate interconnection of the local immunity parameters and
aetiology of the chronic rhinosinusitis.
Materials and Methods: the clinical study enclosed a
control group of 14 healthy volunteers and a group of 10 patients with chronic rhinosinusitis to whom Sinuforte was prescribed in a scheme of treatment. The following data were
registered by the solid-phase immunoferment analysis: serum levels of IgE, sIgA, IgM, IgG, neutrophil functional activity and phagocytic index. All data were archived in MS Excel
with subsequent statistical analysis (SRSS).
Results: Sinuforte course demonstrated an obvious correction of phagocytic index. The serum level of IgA surpassed
the initial data almost in 20%. IgM in nasal lavage fluids was
matched to be at a normal level on the 8th day o treatment,
whilst the IgE level decreased in two times.
Conclusion: the data obtained revealed a reliable correction of checked immunological factors, decrease of the intensity of the chronic allergic reaction. All these data demonstrate Sinuforte activity in regulation of the metabolic process
in immunocompetent cells.
7
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа