close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

код для вставкиСкачать
ГЕНЫ НА ЛАДОНИ: ВАША СУЩНОСТЬ У ВАС В РУКАХ
ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА ПО ВЫДЕЛЕНИЮ И ОСАЖДЕНИЮ СОБСТВЕННОЙ МОЛЕКУЛЫ ДНК
Цель работы: изучить процесс выделения молекулы ДНК из клетки и применить его на
практике для выделения собственной молекулы ДНК.
Оборудование для работы (1 рабочее место на 4 человека):
1. 4 промаркированные пробирки по 15 мл (с синей крышкой)
2. Штатив
3. 4 одноразовых стаканчика
4. 1 микропробирка с раствором протеазы (подписана П)
5. 1 пробирка с лизирующим буфером (подписана Л)
6. 4 пластиковые пипетки
7. 4 маленькие стеклянные пробирки с резиновыми пробками
Ход работы:
Шаги 1 и 2: сбор и лизис клеток
1. Возьмите с вашего стола 15 мл пробирку, содержащую 3 мл воды. Запомните ее
номер
2. Осторожно пожуйте внутренние поверхности ваших щек в
течение 30 секунд. НЕ НАДО кусать щеки до крови!
3. Наберите воду из 15-мл пробирки в рот и тщательно полощите
его в течение 30 секунд. Не глотайте воду!
4. Аккуратно выплюньте воду обратно в пробирку. Можно использовать сплатиковый
стаканчик: сначала выплюнуть в него, потом перелить в
пробирку.
5. Найдите на вашем столе 15-мл пробирку с надписью
«Л». Используя чистую одноразовую пластиковую
пипетку, добавьте 2 мл буфера для лизиса в вашу
пробирку.
6. Закрутите пробирку крышкой и аккуратно переверните
пробирку 5 раз (не трясите её!). Посмотрите на пробирку.
Вы заметили какие-то изменения? Если да, запишите их в
протокол практической работы.
Шаг 3: удаление белков
1. Возьмите с вашего стола маленькую пробирку с протеазой
(«П»). Добавьте 5 капель протеазы (250 мкл) к вашему
образцу.
2. Закройте пробирку и несколько раз переверните ее, чтобы
перемешать содержимое
3. Поместите вашу пробирку в на водяную баню (на
демонстрационном столе), нагретую до 50°С на 10 минут. По
истечении этого времени выньте пробирки. За временем
следите САМИ!
Шаги 4 и 5: сделайте вашу ДНК видимой
1. На демонстрационном столе: возьмите у преподавателя
пробирку с холодным спиртом. Наполните одноразовую
пластиковую пипетку холодным спиртом.
2. Держа пробирку с вашим образцом под углом 45º, добавьте туда
10 мл спирта, так чтобы он медленно стекал по стенке пробирки.
Завинтите крышку на пробирке.
3. Поставьте пробирку прямо в штатив, и оставьте ее на 5 минут, не
трогая. За временем следите сами.
4. Через 5 минут, снова посмотрите на пробирку. Обратите внимание на
границу слоев воды и спирта. Вы видите что-нибудь? Запишите свои
наблюдения. Сравните ваш образец с образцами ваших
одноклассников.
5. Медленно переверните пробирку 5 раз, чтобы ускорить осаждение
ДНК. Обратите внимание на плавающие в пробирке нити, белые или
прозрачные. Это ваша ДНК!
6. Чтобы сохранить свою ДНК, с помощью пипетки перенесите ее вместе с раствором
в стеклянную маленькую пробирку с резиновой пробкой. Пробирка должна быть
заполнена раствором. Полотно закупорьте пробку. Теперь вы можете
продемонстрировать всем окружающим свою ДНК!
СОЗДАНИЕ ДНК-КУЛОНА
Дополнительный этап
1. С помощью ножниц срежьте края у
пластиковой пробки, как показано на
рисунке. Это позволит надеть серебряную
крышку на пробку, а пробка будет попрежнему плотно держаться в горлышке
сосуда.
2. С помощью пластиковой пипетки, перенесите порцию вашей
ДНК в спирте в сосуд, оставляя место для пробки (не менее 5
мм). Не заполняйте сосуд спиртом полностью! (Ваши ученики
могут пользоваться несколькими пипетками, передавая их
друг другу).
3. Плотно закройте сосуд пластиковой пробкой
4. Капните одну каплю суперклея внутрь серебряной крышечки и
небольшое количество клея по ободку пробки/сосуда. Не
наносите слишком много клея, это может препятствовать
высыханию.
5. Наденьте на сосуд серебряную крышечку и аккуратно
6. но плотно прижмите на 30 секунд. Кольцо клея должно
видно вокруг нижнего ободка крышки. Дайте клею
высохнуть 10-15 минут и проверьте сосуд на
герметичность. Чтобы кулон висел на шее плоской
стороной, проверьте, чтобы отверстия для шнурка в
крышке шли вдоль плоской стороны кулона.
быть
7. После того, как клей высохнет, пропустите сквозь отверстия в крышке
вощеный шнурок и завяжите его.
ПОЗДРАВЛЯЕМ, ВЫ СОЗДАЛИ ВАШ СОБСТВЕННЫЙ ДНК-КУЛОН!
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа