close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

- Московская государственная академия ветеринарной

код для вставкиСкачать
1
ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ…………………………………………………………………………4
ГЛАВА I. СОВРЕМЕННЫЕ ВОПРОСЫ ЭТИОЛОГИИ, ПАТОГЕНЕЗА,
КЛИНИЧЕСКОЙ КАРТИНЫ И ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ГЕНЕРАЛИЗОВАННОЙ
ПРОГРЕССИРУЮЩЕЙ АТРОФИИ СЕТЧАТКИ У СОБАК…………………………..10
1.1.
Строение сетчатки……………………………………………..….....10
1.2.
Глазное дно собаки………………………………………................19
1.3.
Этиология
и
патогенез
генерализованной
прогрессирующей
атрофии сетчатки ……………………………………………………22
1.4.
Клиническая картина генерализованной прогрессирующей атрофии
сетчатки……………………………………………………………….28
1.5.
Диагностика
генерализованной
прогрессирующей
атрофии
сетчатки………………………………………………………………29
1.6.
Лечение генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки..30
ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ………………………...31
ГЛАВА
III.
ФАКТОРЫ
ГЕНЕРАЛИЗОВАННОЙ
РИСКА
ВОЗНИКНОВЕНИЯ
ПРОГРЕССИРУЮЩЕЙ
АТРОФИИ
И
РАЗВИТИЯ
СЕТЧАТКИ
У
СОБАК…………………………………………………………………………...37
ГЛАВА IV. ОСОБЕННОСТИ КЛИНИЧЕСКОЙ
ГЛАВА V. ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ
КАРТИНЫ У СОБАК С
ГПАС....46
ИССЛЕДОВАНИЯ ПРИ ГПАС……………..61
5.1. Морфологический состав крови при генерализованной прогрессирующей
атрофии сетчатки у собак…………………………………………………….. 61
5.2. Биохимический состав крови при генерализованной прогрессирующей
атрофии сетчатки у собак ……………………………………………………..63
5.3. Результаты исследования по изучению содержания трийодтиронина и
тироксина в крови собак с диагнозом генерализованная прогрессирующая
атрофия сетчатки………………………………………………………………..65
2
ГЛАВА VI. ЗНАЧЕНИЕ
ОБЪЕКТИВНЫХ
И
СУБЪЕКТИВНЫХ
МЕТОДОВ
ИССЛЕДОВАНИЯ В ДИАГНОСТИКЕ ГПАС…………………………………….68
6.1 Субъективные методы оценки зрительной способности на разных
стадиях ГПАС…………………………………………………………………..68
6.2. Результаты электроретинографических исследований собак с
генерализованной прогрессирующей атрофией сетчатки…………………..72
ГЛАВА VII. РЕЗУЛЬТАТЫ
ГЕНЕТИЧЕСКИХ ТЕСТОВ СОБАК С ДИАГНОЗОМ
ГЕНЕРАЛИЗОВАННАЯ ПРОГРЕССИРУЮЩАЯ АТРОФИЯ СЕТЧАТКИ…………..87
ГЛАВА VIII. РЕЗУЛЬТАТЫ ГИСТОЛОГИЧЕСКОГО
ИССЛЕДОВАНИЯ…………93
ГЛАВА IX. ЛЕЧЕНИЕ ГЕНЕРАЛИЗОВАННОЙ ПРОГРЕССИРУЮЩЕЙ АТРОФИИ
СЕТЧАТКИ У СОБАК.…………………………………………………………….101
БЛИЖАЙШИЕ И ОТДАЛЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ЛЕЧЕНИЯ……………………….107
ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ………………………………......112
ВЫВОДЫ…………………………………………………………………………125
РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ…………….….127
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК…………………………………………….…128
3
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность работы
Раскрытие
механизмов
этиопатогенеза
и
разработка
комплекса
эффективной диагностики и терапии заболеваний органа зрения у мелких
домашних
животных
представляет
одну
из
актуальных
проблем
ветеринарной медицины. Одним из часто встречающихся заболеваний у
собак является генерализованная прогрессирующая атрофия сетчатки
(ГПАС),
сопровождающаяся
развитием
дегенеративных
процессов
в
сенсорной оболочке (палочково-колбочковая дегенерация) с последующем
вовлечением
нейрональной
сетчатки,
что
приводит
к
ее
полной
деафферентации. (Aguirre G., 1984; Acland G., Aguirre G., 1987; Barnett K.S.,
2003; Larska М., 2003; Martin Charles L., 2005; Maggs D.J., Miller P.E., Ofri R.,
2009).
Несмотря на имеющиеся исследования в данном направлении,
малоизученными остаются вопросы клинической картины, факторов риска
возникновения и развития генерализованной прогрессирующей атрофии
сетчатки. В ветеринарной практике до настоящего времени отсутствуют
эффективные методики комплексного лечения, с учетом наследственного
генеза этой офтальмопатии (Aguirre G., Rubin L., 1971; Barnett К., 1965;
Heywood R., 1970; Millichamp N., 1988; O'Toole D., 1984; Wilcock В., 1983;
Dziezyc J., 2007). Задача диагностики ее многочисленных клинических
проявлений
не
может
быть
решена
без
анализа
структурного
и
функционального состояния сетчатки на разных этапах патологического
процесса. В этой связи чрезвычайно важным
и высокоинформативным
является разработка алгоритма генетических исследований, позволяющего
выявить тип наследования данной патологии.
В настоящие время
классификация дегенерации сетчатки, в
зависимости от породы и типа наследования, приведена без учета времени
проявления
офтальмических
признаков,
4
и
результатов
электроретинографических исследований. В тоже время,
генов,
ответственных
за
развитие
данной
идентификация
патологии,
обеспечит
прогнозирование заболевания и наметит правильный подход к селекционной
работе (Kijas J.W., Cideciyan A.V., 2002; Hamel C., 2006; Zangerl B., 2006;
Acland G., 1987; Petersen-Jones S., 2005; Pitts R., 2003; Dekomien G., Epplen
J.T., 2002; Maubaret C., 2005; Zangerl B., 2006).
Быстрота развития осложнений (никталопия, гемералопия, катаракта,
слепота),
отсутствие параллелей между клиническим течением ГПАС,
данными исследований морфологического и функционального состояния
структур, вовлеченных в патологический процесс, и характеризующих
изменения в ткани сетчатки, результатов генетических исследований
свидетельствует о необходимости комплексного изучения клинической
картины заболевания в сочетании с данными показателями.
Цель работы:
на основании комплексного обследования сетчатки
глазного яблока разработать научно-обоснованный подход к диагностике,
клинико-морфологической, электроретинографической характеристике и
лечению ГПАС.
Задачи исследования:
1.
Изучить
факторы
риска
возникновения
и
развития
генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки у собак.
2.
Выявить
клинические,
дифференциально-диагностические
критерии генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки у собак и
изучить
их
прогностическую
значимость,
в
связи
с
показателями
электроретинографии и ретинофотографии.
3.
Определить морфологические и биохимические показатели крови
у собак с генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки на разных
стадиях заболевания.
5
4.
Определить
концентрацию
тироксина,
трийодтиронина
в
сыворотке крови собак с генерализованной прогрессирующей атрофии
сетчатки.
5.
Изучить
наследственные
факторы
генерализованной
прогрессирующей атрофии сетчатки у собак с помощью генетических тестов.
6.
Изучить морфологические изменения тканей органа зрения,
вовлеченных
в
патологический
процесс
при
генерализованной
прогрессирующей атрофии сетчатки у собак.
7.
Определить систему мониторинга структурно-функционального
состояния сетчатки и критерии оценки терапевтической эффективности
медикаментозного лечения животных с ГПАС.
Научная новизна
На основании использования комплексного методического подхода к
оценке морфофункционального состояния сетчатки у собак, включающего
субъективные (тест с лабиринтом, тест с шариком ваты, мигательный
рефлекс)
и
объективные
методы
оценки
(электроретинографию, ретинофотографию,
также
зрительной
ДНК – маркерные тесты) а
гистологическое исследование, изучена
дегенерация
ГПАС.
предрасполагающих
Установлена
к
возникновению
функции
палочково-колбочковая
совокупность
и
развитью
факторов,
генерализованной
прогрессирующей атрофии сетчатки у собак (пол, возраст, порода, тип
наследования).
На основании изучения факторов риска развития заболевания,
генетических
комплексная
тестов
и
клиническая
особенностей
оценка
и
клинического
установлены
течения,
дана
дифференциально-
диагностические критерии ГПАС. Показана высокая информативность
использования
методов
ретинофотографии
и
электроретинографии,
позволяющая достоверно оценить характер и масштабы структурнофункциональных изменений в пигментном эпителии, фоторецепторах,
6
нейроретине,
а также диске зрительного нерва. На основании анализа
состояния сетчатки, определяемого использованными нами методами,
представлено детализированное описание клинической картины на каждой
стадии заболевания животных с данной офтальмопатией. Представлена
динамика изменения электроретинограммы и ее зависимость от тяжести
клинических признаков.
Впервые с использованием внутримитохондриального антиоксиданта,
улучшающего
трофику
тканей
и
обладающего
ретинопротективным
действием, установлена возможность сохранения зрения у всех опытных
животных в ближайшем (6 месяцев) и отдаленном (2-3 года) периоде
наблюдения, что подтверждено данными
электроретинографических и
ретинофотографических исследований.
Теоретическая и практическая значимость
Дано научное обоснование оценки состояния сетчатой оболочки глаза,
основанное на анализе выявленных структурных и функциональных
изменений
в
фоторецепторном
фоторецепторы,
так
и
аппарате,
остальные
части
которые
сетчатки.
затрагивают
как
Показано
что,
деструктивный процесс на начальной стадии характеризуется деформацией
палочек и колбочек, распадом клеток и в конечном итоге уменьшением их
количества.
На
средней
стадии
гибель
нейронов,
компенсируемая
гипертрофией клеток Мюллера, что затрудняет доступ сетчатки к хориоидее.
Это приводит к
нарушению процессов метаболизма в сетчатке и ее
глиальному перерождению.
Разработан алгоритм клинического исследования органа
зрения,
включающий офтальмоскопию, ретинофотографию, электроретинографию,
субъективные
методы
исследования,
который
является
высокоинформативным в диагностике генерализованной прогрессирующей
атрофии
сетчатки.
Показана
целесообразность
7
использования
электроретинографии
и
установлены
нормативные
параметры
электроретинограммы, определяющие функциональное состояние сетчатки у
здоровых и больных собак. Выявленные морфофункциональные изменения
состояния сетчатки у собак являются предпосылкой прогнозирования
степени тяжести течения и исхода данного заболевания.
Показана целесообразность проведения генетических исследований
собак с подозрением на ГПАС, позволяющая не только выявлять патологию
на ранней стадии, но и своевременно проводить грамотную селекционную
работу.
Полученные результаты являются базовыми в расшифровке механизма
и характера поражения сетчатки при генерализованной прогрессирующей
атрофии, а также в
диагностике доклинической стадии заболевания,
дифференциальной диагностике патологического состояния сетчатки и
разработке методов корригирующей терапии собак с данной патологией. Их
целесообразно использовать при комплексном исследовании сетчатки.
Материалы диссертации могут быть использованы в учебном процессе и
обучении
ветеринарных
врачей
по
специализации
ветеринарная
офтальмология.
Основные положения, выносимые на защиту:
1.
Классификация клинических форм течения ГПАС у собак,
основанная на применении методов офтальмоскопии, ретинофотографии и
электроретинографии.
2.
Информативность генетического анализа, объективных методов
исследования в мониторинге ранних проявлений ГПАС.
3.
Электроретинография, ретинофотография и генетический анализ
как основные методы диагностики генерализованной прогрессирующей
атрофии
сетчатки
у
собак,
позволяющие
морфофункционального состояния сетчатки.
8
определить
критерии
4.
Оценка
возможности
терапевтической
внутримитохондриального антиоксиданта
эффективности
«Визомитин» улучшающего
трофику тканей и обладающего ретинопротективным действием, для
сохранения зрения у животных.
Сведения о практическом использовании научных результатов
Полученные данные используются при чтении лекций и проведении
лабораторно-практических занятий на кафедре биологии и патологии мелких
домашних, лабораторных и экзотических животных, а также на кафедре
ветеринарной хирургии
ФГОУ ВПО МГАВМиБ.
результате научных исследований,
Разработанные,
в
данные внедрены в ветеринарную
практику. Опубликовано методическое указание «Прогрессирующая атрофия
сетчатки у собак».
Апробация и публикация результатов исследований
По теме диссертации опубликовано 8 работ, из них 4 в изданиях,
входящих в перечень ВАК РФ. Основные положения работы были доложены
на Международной научно-практической конференции молодых ученых и
специалистов «Вопросы ветеринарной медицины и биотехнологии» Москва
2009, I Всероссийской межвузовской конференции по ветеринарной
хирургии, Москва 2010, а также Международной научно-практической
конференции «Адаптация и становление физиологических функции у
животных» Москва 2010.
Объем и структура работы
Диссертация изложена на 144 страницах машинописного текста и
включает разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы
исследования,
результатов,
собственные
выводы,
исследования,
практические
список. Работа содержит 26 таблиц и
обсуждение
предложения,
полученных
библиографический
65 рисунков. Библиографический
список включает в себя 153 наименований: 131 иностранных и 22
отечественных авторов.
9
ГЛАВА 1
СОВРЕМЕННЫЕ ВОПРОСЫ ЭТИОЛОГИИ, ПАТОГЕНЕЗА,
КЛИНИЧЕСКОЙ КАРТИНЫ И ДИАГНОСТИКИ
ГЕНЕРАЛИЗОВАННОЙ ПРОГРЕССИРУЮЩЕЙ АТРОФИИ
СЕТЧАТКИ У СОБАК
1.1. Строение сетчатки
Внутренняя чувствительная оболочка глазного яблока, сетчатка (tunica
interna sensoria bulbi, retina) состоит из наружного пигментного слоя (pars
pigmentosa, stratum pigmentosum) и внутреннего светочувствительного
нервного (pars nervosa). Функционально выделяют заднюю большую
зрительную часть сетчатки (pars optica retinae), меньшие части – цилиарную,
покрывающую цилиарное тело (pars ciliares retinae) и радужковую,
покрывающую заднюю поверхность радужки (pars iridica retinae) (Millichamp
N.J., 1990).
К подлежащей сосудистой оболочке сетчатка крепится прочно лишь в
нескольких зонах: вдоль зубчатой линии и вокруг зрительного нерва.
Сетчатка состоит из трех типов радиально расположенных нейронов.
Первый тип нейронов, расположенных наружно- это фоторецепторные
нейроны (палочки и колбочки), второй тип- биполярные нейроны,
осуществляющие контакты между первым и третьим типом, третий тип –
ганглионарные нейроны. Кроме того, имеются нейроны осуществляющие и
горизонтальные связи - горизонтальные и амакриновые клетки (Barnett K. C.,
2002; Rodieck R.W., 1973).
Сетчатка эмбриологически является частью мозга и состоит из 10
слоев (таб.1): пигментного эпителия, слоя палочек и колбочек, наружной
пограничной мембраны, наружного ядерного слоя, наружного сетчатого (или
синаптического) слоя, внутреннего ядерного слоя, внутреннего сетчатого
10
слоя, слоя ганглионарных клеток, слоя волокон зрительного нерва,
внутренней пограничной мембраны.
Таблица 1
Гистологическое строение сетчатки
Слои сетчатки
Клетки, образующие слои
Пигментный эпителий
Наружные сегменты фоторецепторов,
отростки клеток Мюллера
Конечные отростки, соединяющие
палочки, колбочки и клетки Мюллера
Ядра палочек и колбочек
Аксоны палочек и колбочек, которые
образуют синапсы с дендритами
биполярных, горизонтальных клеток
и другими фоторецепторами
Ядра биполярных, горизонтальных,
амакриновых клеток и клеток
Мюллера
Аксоны биполярных и амакриновых
клеток, образующие синапсы с
дендритами ганглиозных клеток
Тела ганглионарных клеток
Аксоны ганглионарных клеток
Базальная мембрана Мюллеровых
клеток
Пигментный эпителий
Слой палочек и колбочек
Наружная пограничная мембрана
Наружный ядерный слой
Наружный сетчатый слой
Внутренний ядерный слой
Внутренний сетчатый слой
Ганглионарный слой
Слой нервных волокон
Внутренняя пограничная
мембрана
Пигментный слой (RPE
retinal pigment epithelium)
это слой
столбчатых клеток, формирующих самый наружный слой сетчатки (рис.1.).
Ядра этих клеток смещены в их базальную часть. Базальные части этих
клеток плотно прилежат к мембране Бруха, а клеточные мембраны образуют
многочисленные
базальные
инвагинации
(Жункейра
Л.К.,
2009).
Митохондрии преобладают в зоне цитоплазмы вблизи этих инвагинаций.
Апикальные мембраны пигментных клеток контактируют непосредственно с
дистальной
частью
наружных
сегментов
фоторецепторов
сетчатки.
Цитоплазма клеток пигментного эпителия содержит большое количество
11
эндоплазматической сети, в которой, происходит эстерификация витамина А,
транспортируемого к фоторецепторам (Жункейра Л.К., 2009; Козлов К.А.,
2007; Schulz H.L., 2004).
Рис.1 . Пигментный эпителий.
Апикальная
поверхность
пигментоцитов
имеет
два
типа
микроворсинок: длинные микроворсинки, которые располагаются между
наружными сегментами фоторецепторов, и короткие микроворсинки,
которые соединяются с концами наружных сегментов фоторецепторов. Один
пигментоцит
контактирует
фоторецепторов,
а
вокруг
с
30—45
одного
наружными
наружного
сегментами
сегмента
палочек
обнаруживается 3—7 отростков пигментоцитов, содержащих меланосомы,
фагосомы и органеллы общего значения. В то же время вокруг наружного
сегмента колбочки — 30— 40 отростков, которые длиннее и не содержат
органелл,
за
исключением
меланосом.
Пигментоциты
являются
разновидностью специализированных макрофагов ЦНС.
Фагосомы образуются в процессе фагоцитоза дисков наружных
сегментов фоторецепторов. Наличие меланосом обусловливает поглощение
85—90% света, попадающего в глаз. Под воздействием света меланосомы
перемещаются в апикальные отростки пигментоцитов, а в темноте
12
меланосомы возвращаются в цитоплазму. Это перемещение происходит с
помощью микрофиламентов при участии гормона меланотропина.
Клетки
пигментного
слоя
плотно
пигментированные,
за
исключением того участка, где расположен тапетум люцидиум. Отсутствие
меланина приводит к пропусканию света через RPE на тапетум, который
затем отражается обратно к светочувствительным рецепторам.
На латеральных клеточных мембранах имеются межклеточные
соединения с хорошо развитыми поясками замыкания и поясками слипания
вблизи верхушек; выявляются также десмомомы и щелевые соединения.
Благодаря этому эпителиальный пласт плотно перекрыт в области
апикального и базального участков, что обеспечивает сообщение между
клетками.
Располагаясь
вне
сетчатки,
пигментный
эпителий
тесно
взаимодействует с ней, выполняя ряд важных функций (рис.2.): оптическую
защиту и экранирование от света; транспорт метаболитов, солей, кислорода,
из сосудистой оболочки к фоторецепторам и обратно; фагоцитарную
функцию,
обеспечивающую
сегментов
фоторецепторов
уборку
и
отработанных
доставку
материала
дисков
для
наружных
постоянного
обновления фоторецепторной мембраны; а также участвует в регуляции
ионного состава в субретинальном пространстве.
Рис.2. Фагоцитоз внешних долей сегментов.
13
В пигментном эпителии велика опасность развития темновых и
фотоокислительных деструктивных процессов. Все ферментативные и
неферментативные звенья антиокислительной защиты присутствуют в
клетках пигментного эпителия: пигментоциты участвуют в защитных
реакциях, тормозящих перекисное окисление липидов с помощью ферментов
микропероксисом и функциональных групп меланосом. Меланосомы в
клетках пигментного эпителия, обладающие выраженным антиоксидантным
свойством, служат специфическими участниками системы антиоксидантной
защиты. Они эффективно связывают прооксидантные зоны (ионы железа) и
не менее эффективно взаимодействуют с активными формами кислорода.
Базальный комплекс (complexus basalis) — мембрана Бруха (lamina
vitrea, lamina elastica, membrana Brucha) — очень тонкая пластинка (1—4
мкм), располагается между сосудистой оболочкой и пигментным слоем
сетчатки. В ней различают наружный коллагеновый слой с зоной тонких
эластических волокон, являющихся продолжением волокон сосудистокапиллярной пластинки; внутренний коллагеновый слой, волокнистый
(фиброзный), более широкий; третий слой представлен базальной мембраной
пигментного эпителия – кутикулярный (Pecold K., 2006).
Слой палочек и колбочек. Фоторецепторы сетчатки делятся на два
типа; палочковые и колбочковые. Палочковые клетки являются рецепторами
сумеречного (ночного) зрения, колбочки – фоторецепторами дневного зрения
(таб.2.).
Морфологически
фоторецепторы
представляют
собой
длинные
цилиндрической формы клетки. Дистальная часть фоторецепторов –
наружный сегмент – содержит фоторецепторные мембраны. Он является
светочувствительным участком, а внутренний сегмент содержит структуры,
участвующие в метаболических реакциях, необходимых для процессов
биосинтеза и выработки энергии в этих клетках (Жункейра Л.К., 2009). Во
внутреннем сегменте находятся множество митохондрии и полирибосом,
14
цистерны
аппарата
Гольджи,
небольшое
количество
элементов
эндоплазматического ретикулума и гликоген (Young R.W., 1971).
Наружный сегмент связан с внутренним соединительной ножкой –
цилией. (Cоколов В.И., 2004; Козлов К.А., 2007; Millichamp N.J., 1990).
Таблица 2.
Сравнительная характеристика фоторецепторов
Палочки (rods)
Скотопическое видение (ночное)
Чувствительные к небольшим
изменениям интенсивности света
Низкая острота изображения
Чувствительные к синему свету
Не влияют на цветоощущение:
монохроматическая абсорбция
Чувствительные к движению
Поглощают вспышку света низкой
частоты
В большом количестве расположены
на периферии сетчатки
Колбочки (cones)
Фотопическое видение (дневное)
Не чувствительные к небольшим
изменениям света
Высокая острота изображения
Чувствительные к красному свету
Влияют на цветоощущение: видение
двух-, трех-, и четырехцветное
Чувствительные к контрастам
Поглощают вспышки света высокой
частоты
В большом количестве расположены
в центральной части сетчатки
Палочковые клетки – тонкие удлинненые клетки. Мембранные диски в
палочковых клетках не связаны с плазматической мембраной; наружный и
внутренний
сегмент
отделены
друг
от
друга
суженным
участком.
Уплощенные диски палочковых клеток содержат пигмент зрительный
пурпур, или родопсин, который обесцвечивается на свету и обусловливает
зрительную
стимуляцию.
Зрительный
пигмент
представляет
собой
хромогликопротеид. Эта сложная молекула содержит одну хромофорную
группу, две олигосахаридные цепочки и водонерастворимый мембранный
белок опсин. Хромофорной группой зрительных пигментов служит ретиналь
– 1 (альдегид витамина А). У собак имеются два типа зрительных пигментов
(Steinberg R., 1973) .
Колбочковые
клетки
отличаются
от
палочковых
формой
(конической) и строением своих наружных сегментов. Мембранные диски не
отделены от наружной плазматической мембраны, а образуются как ее
15
инвагинации. В колбочковых клетках вновь синтезированный белок не
концентрируется в недавно образованных дисках, как это происходит в
палочковых клетках, а распределяется равномерно по всему наружному
сегменту. Имеются три типа колбочковых клеток, каждый из которых
содержит
отдельную
разновидность
светочувствительного
пигмента
колбочек, йодопсина (Жункейра Л.К., 2009).
Другие клетки. Горизонтальные клетки. Отростки горизонтальных
клеток вступают в контакт с палочками и колбочками. Передача возбуждения
с горизонтальных клеток на синапсы фоторецепторного и биполярного
нейронов вызывает временную блокаду
в передаче импульсов от
фоторецепторов (эффект латерального торможения), что увеличивает
контраст в зрительном восприятии. Горизонтальные клетки образуют малые
круги, влияющие на передачу информации внутри сетчатки, благодаря
синаптическим связям, расположенным латерально от синаптических
полосок фоторецепторов, вместе с центрально расположенными синапсами
биполярных клеток. Круг дает информацию биполярной клетке об
окружении.
Существует обратная связь между горизонтальной клеткой и
фоторецептором (Cоколов В.И., 2004; Козлов К.А., 2007; Millichamp N.J.,
1990; Barnett K.C., 2002; Riordan-Eva P., 2003).
Биполярные клетки бывают двух типов: диффузные биполярные
клетки, которые образуют синапсы с двумя или большим числом
фоторецепторов,
устанавливающие
и
контакт
моносинаптические
биполярные
с
одного
аксоном
только
клетки,
колбочкового
фоторецептора и только одной ганглионарной клеткой. Некоторое число
колбочковых
клеток,
таким
образом,
передают
свои
импульсы
непосредственно в мозг
Клетки ганглионарного слоя формируют контакты с биполярными
клетками. Направляя свои аксоны в особый участок сетчатки, объединяются,
образуя зрительный нерв. Этот участок, не содержащий рецепторов, известен
как слепое пятно сетчатки или сосочек зрительного нерва. Ганглионарные
16
клетки – это типичные нервные клетки, содержащие крупное эухроматичное
ядро и базофильные тельца Ниссля. Эти клетки, подобно биполярным
клеткам, на основании их связей с другими клетками, разделяют на
диффузные и моносинаптические (Жункейра Л.К., 2009).
Амакриновые
клетки
относятся
к
интернейронам,
которые
осуществляют на втором синаптическим уровне вертикального пути:
фоторецептор
–
биполяр-
ганглионарная
клетка.
Их
синаптическая
активность во внутреннем сетчатом слое проявляется в интеграции,
модуляции, включении сигналов, идущих к ганглионарным клеткам. Эти
клетки, как правило, не имеют аксонов, однако некоторые амакриновые
клетки содержат длинные аксоноподобные отростки.
Амакриновые
клетки
очень
разнообразны
по
форме,
и
для
функционирования используют большое число нейромедиаторов. Концевые
веточки их отростков образуют связи и с биполярными, и с ганглионарными
клетками, создавая между ними непрямой путь передачи зрительных
сигналов (Cоколов В.И., 2004; Козлов К.А., 2007; Millichamp N.J., 1990;
Barnett K.C., 2002; Riordan-Eva P., 2003).
Клетки Мюллера (радиальные гиальные клетки). Это
основные
ненейронные клетки сетчатки позвоночных животных, которые являются
поддерживающими для большинства нейронов в сетчатке. Клетки Мюллера
имеют большее количество цитоплазмы
и лежат
во внешней части
внутреннего ядерного слоя. Клетки Мюллера удлинены, простираются от
внутренней до наружной пограничной мембраны.
Они играют важную роль как внутренняя скелетная опора, и как
элемент питания сетчатки. Клеточные волокна заполняют почти все
внеклеточное пространство между нервными клетками.
Витреальные окончания Мюллерных клеток, имеют ножки, которые
могут
фагоцитировать
чужеродные
вещества
и,
следовательно,
поддерживают нормальную функцию сетчатки. Латеральные поверхности
17
этих ножек содержат
промежуточные соединения, позволяющие этим
клеткам передавать информацию через всю сетчатку.
У большинства
животных, Мюллерные клетки имеют
с
кровеносными
сосудами,
близкие
пространственные
отношения
указывая
возможную роль
в формировании барьера кровь-сетчатка, канала для
питания и удаления метаболитов (Cоколов В.И., 2004; Козлов К.А., 2007;
Millichamp N.J., 1990; Barnett K. C., 2002; Riordan-Eva P., 2003).
Питание сетчатки
Питание сетчатки осуществляется из двух источников: внутренние
шесть слоев получают его из системы центральной ее артерии (ветвь
глазной), а нейроэпителий - из хориокапиллярного слоя собственно
сосудистой оболочки. Сетчатая оболочка имеет свою собственную систему
кровеносных сосудов. Она снабжается аpтеpиальной кровью из особой
веточки от a.ophthalamica - центральной артерии сетчатки, a.centralis retinae.
Все венозные ветви сетчатки собираются в v.centralis retinae, которая
идет вместе с одноименной артерией по оси зрительного нерва и вливается в
v.ophthalamica superior или в sinus cavernosus.
Различают 4 типа сетчатки (Martin Charles L., 2005) : голангический на
котором вся поверхность сетчатки получает прямую поставку крови;
мерангиотический, в котором сосуды находятся в определенной области
сетчатки; паренгиотический, где сосуды
ограничены непосредственной
околососочковой зоной; и анагиотический, в котором кровеносные сосуды
сетчатки отсутствуют (таб.3.).
Таблица 3.
Разновидности кровоснабжения сетчатки
Тип
1
Голангический
(holangiotic)
Характеристика
2
Внутренная часть
сетчатки питается
непосредственно
18
Примеры
3
Большинство
млекопитающих в том
числе собака, кошка,
1
Мерангиотический
(merangiotic)
Паурагиотический
(paurangiotic)
Анангиотический
(anagiotic)
центральной артериtq
сетчатки (arteria centralis
retinae)-приматы, либо с
помощью ресничных
артерии (aa.ciliares),
которые формируют
сосудистый круг Цинна
(circulus arteriosus nervi
optici)- большинство
млекопитающих
2
Кровоснабжается только
носовая и скуловая
область внутренней
части сетчатки
Мелкие сосуды питают
небольшую область
вокруг диска
зрительного нерва
Внутренная часть
сетчатки не содержит
сосудов
овса, крыса, мышь, и
приматы
3
Кролик
Лошадь, носорог, слон
Птицы,
пресмыкающееся,
земноводные,
некоторые
млекопитающие:
шиншилла, морская
свинка, летучая мышь
1.2. Глазное дно собаки
Вид нормального глазного дна зависит от вида животного, возраста,
шерстного покрова (короткий - длинный) и пигментации (Martin Charles L.,
2005).
Отражательна пластинка, tapetum lucidum располагается между
сосудисто – капиллярной пластинкой и сосудистым слоем и состоит из слоев
специализированных отражательных клеток (кристаллы гуаниннуклеотида
пуринового ряда в чистом виде и в форме кальциевых солей), у собак их до
15, у кошек – до 30.
палочковидными
Цитоплазма отражательных клеток заполнена
структурами,
которые
19
у кошек содержат большое
количество рибофлавина, у собак – цинка (Копенкин Е.П., Сотникова Л.Ф.,
2008).
У взрослых собак тапетум окрашено в светлые цвета, напоминает
неравносторонний треугольник (рис.3.), с правильным углом на вершине и
острым углом
расположенным назально. Его функция заключается в
собираний света в тусклым освещении и его отражение назад к сетчатке.
Рис.3. Строение глазного дна взрослой собаки.
Тапетум является частью собственной сосудистой оболочки и
развивается после рождения. Таким образом, окраска характерна для
взрослых животных не может присутствовать до 10-12 недельного возраста.
(Martin Charles L., 2005; Dziezyc J., Millichamp N.J., 2007).
Отсутствие видимого тапетума является его разновидностью и
наиболее часто встречается у
животных с синей радужкой
альбиносов. Глаза альбиноса характеризуются недостатком
или
у
пигмента в
сетчатке и хориоидеи (Weng K., 2005).
Размер тапетума связан напрямую с размером собаки: большие собаки
имеют относительно большой тапетум и с оптическим диском находящимся
в его пределах, а мелкие пароды имеют маленький тапетум, обычно с диском
вне. Переход тапетума в нетапетальную часть резкий у короткошерстных
20
собак, так, как у длинношерстных собак выделяется переходная зона (Weng
K., 2005).
Оптический диск или сосочек зрительного нерва у собак обычно
миелинизированный. Маленькое темное пятно, физиологическая ямка
(впадина), наблюдается в центре некоторых дисков, она является остатком
эмбриональной стекловидной артерии.
Самые большие сосуды -
вены (количество 2-5).
Как правило,
заметны 3 крупные вены: с дорсальной стороны к зрительному соску, кровь
отводит верхняя назальная вена сетчатки (v.nasalis retinae superior), из
назальной нижней части – нижняя назальная вена сетчатки (v.nasalis retinae
inferior), из височной нижней части – нижняя височная вена сетчатки
(v.temporalis retinae inferior). У собак три основные вены в области
зрительного соска формируют открытую по направлению к виску венозную
дугу, в которую впадают проежуточные вены, а также некоторые венулы
(вторичные вены). От венозной дуги кровь идет через короткие задние
ресничные вены (vv. ciliares posteriors breves), в наружную глазную вену (v.
ophthalmica externa) (Gerstein D., 1969; Dziezyc J., Millichamp N.J.,2007).
Вентральную область тапетума называют тапетум нигрум, но этот
термин неправилен так, как подразумевает присутствие тапетума. Тапетум
нигрум у большинства собак имеет довольно плотно
пигментирован
пигментный эпителий, который в свою очередь затеняет визуализацию
хороидеи и склеры. Область вокруг сосочка зрительного нерва часто может
иметь беспигментные участки и глыбки. Собаки с красновато – коричневой
шерстю, часто имеют меньшее количество пигмента в нетапетальной
области. Это вместе с хороидальными сосудами, передает оранжевый цвет
нетапетальной области (Wyman M., 1965; Wen G.. 1982, Millichamp N. J.,
1990; Martin Charles L., 2005; Dziezyc J., Millichamp N.J., 2007).
21
1.3.
Этиология и патогенез генерализованной прогрессирующей
атрофии сетчатки у собак
Прогрессирующая атрофия сетчатки – термин, принятый для описания
ряда наследственных нейроретинальных дегенераций: генерализованной
прогрессирующей
атрофии
сетчатки
(ГПАС),
и
центральной
прогрессирующей атрофии сетчатки (ЦПАС).
Генерализованная прогрессирующая атрофия сетчатки (PRA, PRCD)
это унаследованная, двухсторонняя прогрессирующая дегенерация сетчатки
приводящая к слепоте, связанная с неправильным развитием палочек и
колбочек, и нарушением процессов в них происходящих. Болезнь впервые
описал в 1911 году Hilding Magnusson у шотландских сеттеров (Parry H.,
1954; Aguirre G., Rubin L., 1971; Schmidt G., 1979; Paulsen M., 1988; Curtis
R., 1988;
Narfstrom K., 1994;
Parkes J., 1992; Martin Charles L., 2005;
Сотникова Л.Ф., Копенкин Е.П., Депта Э.,2010).
Признак был назван retinitis pigmentoza (пигментозный ретинит) из-за
своего подобия с наследуемой дегенерации сетчатки у человека. Позднее
заболевание получило название «прогрессирующая атрофия сетчатки»,
отображаемое аббревиатурой PRA в ветеринарной и гуманной медицине, и
стало регистрироваться во многих частях света у нескольких пород
животных. Затем данная патология была переименована в генерализованную
прогрессирующую атрофию сетчатки (ГПАС) для дифференциации от
центральной
прогрессирующей
атрофии
сетчатки
(ЦПАС).
Генерализованную прогрессирующую атрофию сетчатки со временем
разделили
на
ряд
самостоятельных
патологий,
в
первую
очередь
поражающих фоторецепторы, и классифицировали их как дисплазии, или
дегенерации. Классификация дистрофии сетчатки связана с возрастом
животного и характером поражения палочек или колбочек (таб.4).
Генерализованная
прогрессирующая
атрофия
сетчатки
может
сопровождаться дисплазией и дегенерацией клеток сетчатки. При дисплазии
нарушается развитие клеток фоторецепторов уже в первые несколько недель
22
после рождения. При дегенерации (абиотрофии) уже сформировавшиеся
фоторецепторные клетки постепенно перестают функционировать и умирают
(Cogan D., 1965; Kijas J., 2002).
Таблица 4.
Наследственные дегенерации сетчатки
Порода
1
Заболевание
2
3
Развитие заболевания на ранним возрасте
Аляскинский
маламут
Бельгийская
овчарка
Бернский
зененхунд
Бриар
Бульмастиф
Вельш-КоргиКардиган
Шотландская
овчарка
Котон-де-тулеар
Миниатюрная
такса
длинношерстная
Жесткошерстная
такса
Бордоский дог
Французский
мастифф
Немецкий пойнтер
короткошерстный
Пиренейская
горная собака
Сокращение
Дегенерация
колбочек
(куриная слепота)
Дисплазия
фоторецепторов
Прогрессирующая
атрофия сетчатки
Дистрофия сетчатки
Многоочаговая
ретинопатия собак
Дисплазия палочек и
колбочек 3
Дисплазия палочек и
колбочек
Многоочаговая
ретинопатия собак
Дегенерация палочек
и колбочек 1
Дегенерация палочек
и колбочек
Многоочаговая
ретинопатия собак
Многоочаговая
ретинопатия собак
Дегенерация
колбочек (куриная
слепота)
Многоочаговая
ретинопатия собак
23
Способ
наследования
4
cd
Аутосомнорецессивное
-
?
PRA
CMR
rcd3
rcd2
CMR
crd1
crd
CMR
CMR
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
cd
Аутосомнорецессивный
CM
Аутосомнорецессивный
1
Ирландский сеттер
рыжо-белый
Староанглийский
мастифф
Норвежский
эльгхунд
Пит-бультерьер
Миниатюрный
шнауцер
2
Дисплазия палочек и
колбочек 1
Многоочаговая
ретинопатия собак
Дисплазия палочек
Ранняя дегенерация
колбочек
Дегенерация
колбочек и палочек 2
Прогрессирующая
атрофия сетчатки
типа А
3
rcd1
CM
rd
erd
crd2
A-PRA
Развитие заболевание в старшем возрасте
Прогрессирующая
Акита
PRA
атрофия сетчатки
Прогрессирующая
Американский
дегенерация палочек
prcd
кокер спаниель
и колбочек
Прогрессирующая
Австралийская
дегенерация палочек
prcd
овчарка
и колбочек
Прогрессирующая
Бульмастифф
PRA
атрофия сетчатки
Прогрессирующая
Чесапик бей
дегенерация палочек
prcd
ретривер
и колбочек
Прогрессирующая
Китайская
дегенерация палочек
prcd
хохлатая
и колбочек
Прогрессирующая
Cockapoo
дегенерация палочек
prcd
и колбочек
Прогрессирующая
Английский кокер
дегенерация палочек
prcd
спаниель
и колбочек
Прогрессирующая
дегенерация палочек
Entlebucher
prcd
и колбочек
Лапхунд
Прогрессирующая
дегенерация палочек
24
prcd
4
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
Частично
дрминирующая
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
Доминантный
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
Аутосомнорецессивный
1
Голден ретривер
Куваш
Лабрадор ретривер
Laponian herder
Американский
мастифф
Шотландский
ретривер
Папилон
Миниатюрный
пудель и той
Португальская
водная собака
Самоед
Schapendoe
Сибирский хаски
Арабский харт
Испанская водная
собака
Тибетский
спаниель
и колбочек
2
Прогрессирующая
дегенерация палочек
и колбочек
Прогрессирующая
дегенерация палочек
и колбочек
Прогрессирующая
дегенерация палочек
и колбочек
Прогрессирующая
дегенерация палочек
и колбочек
Прогрессирующая
атрофия сетчатки
Прогрессирующая
дегенерация палочек
и колбочек
Прогрессирующая
атрофия сетчатки
Прогрессирующая
дегенерация палочек
и колбочек
Прогрессирующая
дегенерация палочек
и колбочек
Прогрессирующая
атрофия сетчатки
сцеплена с
хромосомой X
Прогрессирующая
атрофия сетчатки
Прогрессирующая
атрофия сетчатки
сцеплена с
хромосомой X
Дегенерация палочек
и колбочек 1а
Прогрессирующая
дегенерация палочек
и колбочек
Прогрессирующая
атрофия сетчатки
25
3
4
prcd
Аутосомнорецессивный
prcd
Аутосомнорецессивный
prcd
Аутосомнорецессивный
prcd
Аутосомнорецессивный
PRA
Доминантный
prcd
Аутосомнорецессивный
PRA
Аутосомнорецессивный
prcd
Аутосомнорецессивный
prcd
Аутосомнорецессивный
XLPRA
Аутосомнорецессивный
PRA
Аутосомнорецессивный
XLPRA
Аутосомнорецессивный
rcd1a
Сцеплена с
хромосомой X
prcd
Аутосомнорецессивный
PRA
Аутосомнорецессивный
1
2
Прогрессирующая
атрофия сетчатки
Тибетский терьер
3
4
Аутосомнорецессивный
PRA
Для того чтобы понять причину вызывающую прогрессирующую
атрофию сетчатки нужно понять как происходит процесс фототрансдукции.
Свет входит в глаз через роговицу, жидкость передней камеры, хрусталик,
жидкость задней камеры, стекловидное тело и, пройдя через толщу всех
слоев сетчатки, попадает на отростки фоточувствительных палочек и
колбочек, в наружных сегментах которых начинаются физиологические
процессы возбуждения, фототрансдукции. Механизм фототрансдукции
обеспечивает преобразование и усиление почти в миллион раз первичного
светового сигнала в фоторецепторной клетке. Квант света поглощается
хромофорной группой молекулы родопсина «Р» - 11 – цис ретиналем и
изомеризует ее в полностью транс форму. Эта реакция происходит менее
чем за 200 фемтосекунд. Это первая и единственная фотохимическая реакция
в зрении. Цис – транс переход ретиналя вызывает, в свою очередь,
конформационную перестройку белковой части молекулы (опсина): сначала
ближайшего к хромофору окружения, а затем и всей белковой части.
Вследствие
этого
родопсин
приобретает
способность
к
взаимодействию со следующим белком в цепи процессов фототрансдукции
- G белком (в зрительной клетке он называется трансдуцином T).
Активированный трансдуцин, в свою очередь, активирует следующий белок
- фермент фосфодиэстеразу (ФДЭ). Этот фермент с высокой скоростью
гидролизует
циклический
низкомолекулярный
гуанозиномонофосфат
внутриклеточный
(цГМФ).
Падение
передатчик
в
–
цитоплазме
наружного сегмента фоторецепторной клетки концентрации свободного
цГМФ
приводит
к
гиперполяризации
клеточной
мембраны.
Этот
электрический потенциал, представляет собой фоторецепторный сигнал,
который передается в первом синапсе сетчатки следующим нервным клеткам
– биполярным и горизонтальным.
26
Таким образом, цепочка процессов родопсин – трансдуцин –
фосфодиэстераза представляет собой каскад
ферментативных реакции,
обеспечивающих усиление (размножение) светового сигнала (Young R.W.,
1970; Petersen-Jones S.M., 1999; Bisegna P., 2007; Островский М.А., 1992;
Shen L., 2005).
Наиболее распространенными причинами PRA являются мутаций гена
кодирующего:

субъединицы фермента циклической фосфодиэстеразы мооонфосфата
гуанина cGMP ( PDE6A, PDE6B, PDE6D, PDE6G)

субъединицы пигментных клеток родопсина и опсина

белки цитоплазматической мембраны палочек и колбочек (transducin,
phosducin, peripherin). Эти белки участвуют в фототрансдукций и их
недостаток приводит к нарушению видения. Изучение генов и мутаций
ответственных
за
появление
атрофии
сетчатки
помогает
составить
генетические тесты исключающие эту болезнь из популяций данной пароды
(Ray K., 1994; Zhang Q.,1998; Petersen-Jones S.M., 1999; Larska М., 2003;
Aguirre G., Acland G., 2007).
ГПАС соответствует пигментной дегенераций сетчатки у людей, и
как она наследуется на три разных способа:

Аутосомная рецессивная. Наиболее часто встречаемая. Родители в
этом случае либо носители, либо больные.
У носителей, как правило,
болезнь не возникает, они являются резервуаром дефектного гена, и
передают его потомству, утрудняя этим его элиминацию из популяций.

Аутосомная доминантная. Означает, что присутствие одного гена
приводит к возникновению заболевания. Нет носителей, собака либо
заболевает, либо рождается здоровой. Эта форма описана у английского
мастиффа и бульмастиффа.

Передача с Х- хромосомой (X- linked PRA). Встречается у
сиберийских хаски и самоедов. Носителями являются только самки (ХХ), а
самцы (ХY) могут быть либо больными, либо здоровыми. У самок носителей
27
гена Х-linked PRA часть клеток сетчатки развивается нормально, а часть
подвергается дегенераций за счет экспрессии дефектного гена (Aguirre G.,
Acland G., 1988; Acland G., 1994; Larska М., 2003; Sutter N.B., 2004; Aguirre
G.D., 2006; Goldstein O., 2006).
1.4.
Клиническая картина генерализованной прогрессирующей
атрофии сетчатки
Первым клиническим проявлением является гемералопия
“куриная
слепота” (Priester W., 1974; Parshall C.J., 1994; Parry H., 1954; Aguirre G.,
Rubin L., 1971; Schmidt G., 1979; Paulsen M., 1988; Curtis R., 1988; Narfstrom
K.,1994; Parkes J., 1992; Gelatt К., Kirk N., 2000; Barnett K. C., 2002; Martin
Charles L.,2005).
Начальную стадию ГПАС иногда бывает сложно диагностировать.
При офтальмоскопии как правило не выявляется явно заметных изменении
состояния глазного дна как правило, нетапетальный участок глазного дна и
диск зрительного нерва имеют нормальный внешний вид (Риис Р.,2006).
На поздней стадии повреждения двухсторонние и симметричные.
Увеличение отражательной способности обусловливает разрежение
сетчатки (при осмотре, глаза кажутся, "серебристыми" или "желтыми").
Одновременно уменьшаются сосуды сетчатки в количестве и величине
(ослабление сосудистого рисунка, побледнение диска зрительного нерва и
пятна на нетапетальной части глазного дна). Сосуды сетчатки истощаются,
что связано с истощением сетчатки, и постепенно запустевают. Дегенерация
фоторецепторов происходит задолго до того, как развивается выражена
сосудистая реакция (Gerstein D., 1969).
Все изменения сосудов приводят к атрофическим и дегенеративным
изменения диска зрительного нерва. Они могут проявляться в виде
побледнения диска зрительного нерва.
В дальнейшем на нетапетальной
части сетчатки появляются пигментированные или непигментированные
28
участки (глыбки). Генерализованная
депигментация
встречается чаще.
Зрительная атрофия является поздним признаком, и представлена беловатосерым диском с зубчатыми краями, чашеобразной формы.
У большинства собак на поздней стадий
ГПАС развивается
катаракта ассоциирована с отдельным геном или обусловлена повреждением
хрусталика,
токсическими веществами выделяемыми
из поврежденной
сетчатки. Одним из таких веществ является докозагексаеновая кислота,
являющаяся
одной
из
трех
фосфолипидов
фоторецепторной мембраны. Эта кислота
наружного
сегмента
подвергается аутооксидаций в
малоальдегид и липидные радикалы, которые и являются
причиной
возникновения катаракты (Островский М.А., 1992; Van der Woerdt A., 1994).
1.5.
Диагностика генерализованной прогрессирующей
атрофии сетчатки у собак
Офтальмоскопические
признаки.
Двусторонние,
симметричные,
увеличение отражательной способности тапетума (гиперрефлеккторность) и
ослабление сосудистого рисунка. На поздней стадии развивается катаракта а
на
нетапетальной
части
глазного
дна
появляются
очаги
де-
и
гиперпигментации.
Анамнез. Ночная слепота, прогрессирующая в дневную.
Породная
предрасположенность (Narfstrom K., 1994; Parkes J., 1992; Gelatt, Kirk N.,
2000; Barnett K. C., 2002; Martin Charles L., 2005).
Электроретинография используется для изучения функционального
состояния сетчатки, для диагностики и дифференциальной диагностики,
наследственных заболевании сетчатки и зрительного нерва. Ее величина
зависит от количества здоровых функционирующих клеток. Это регистрация
многофазной биоэлектрической реакции клеточных элементов сетчатки в
ответ на световой раздражитель. Она проводится в тех случаях, когда
29
предполагается наличие заболевании сетчатки связанных с нарушением
функции зрения.
По данным элетроретинографических исследований можно судить о
различии патогенетических механизмов патологических процессов
в
сетчатке, порой сходных по офтальмоскопической картине (Sandberg M. G.,
1986; Rubin L., 1975; Gelatt, Gouras P., 1986; Karwoski C.J., 1987; Хи Х.,
1993; Bush R.A., 1994; Kirk N., 2000; Barnett K. C., 2002; Шамшинова А.М.,
2004; Martin Charles L., 2005; Marmor M.F., 2009).
Генетические тесты. Используется
ПЦР для анализа ДНК и
обнаружения дефектного гена (материал для исследования проба крови).
Тест на наличие мутаций позволяет выявлять конкретное ДНК-нарушение,
ответственное за данное заболевание. Такое нарушение может включать
изменение последовательности ДНК, замену в данной последовательности
ДНК или исчезновение или добавление в цепи ДНК новых генов ((Aguirre G.,
Acland G., 1988; Acland G., 1994; Ray K.,1994; Zhang Q.,1998; Petersen-Jones
S.M., 1999; Larska М., 2003; Aguirre G., Sutter N.B., 2004; Aguirre G.D., 2006;
Goldstein O., 2006; Melamud A., 2006; Acland G., 2007).
1.6.
Лечение генерализованной прогрессирующей атрофии
сетчатки у собак
На сегодняшний день методов лечения не существует. Уровень
повреждения зрения варьирует у разных пород и при разном течении
заболевания, но большинство собак в итоге полностью слепнут.
Профилактикой является грамотная селекционная работа, так как их
потомство обязательно будет наследовать дефект - щенки родятся либо
предрасположенными к заболеванию, либо носителями (Sutter N.B., 2004;
Aguirre G.D., 2006; Goldstein O., 2006; Melamud A., 2006; Acland G., 2007).
30
ГЛАВА II
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Диссертационная
патологии мелких
«Московская
работа
выполнялась
кафедре
биологии
и
домашних и экзотических животных ФГОУ ВПО
государственная
биотехнологии
на
академия
ветеринарной
медицины
и
им. К.И. Скрябина». Клинические, морфологические,
биохимические, гематологические и исследования проводились на базе
данной кафедры. Работа проводилась с 2006 по 2010 год.
Характеристика больных животных
Основной
признаков
задачей этого раздела являлось изучение целого ряда
характеризующих
больных
собак с генерализованной
прогрессирующей атрофией сетчатки. Учитывая,
зрения
встречается
у
животных
принадлежащих к обоим полам,
для
что патология
различных
возрастных
органа
групп,
проведения исследования была
отобрана группа животных в количестве 45 собак в возрасте от 6
месяцев до 13 лет, поступивших в клинику МГАВМиБ им. К.И.Скрябина
с клиническими признаками генерализованной прогрессирующей атрофии
сетчатки.
Все
животные принадлежали
частным
лицам,
условия
кормления и содержания были сходными.
Характеристика исследований
Цель
исследований
морфологическую
и
–
изучить
диагностику,
электроретинографическую
дать
характеристику
генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки у собак.
Для диагностических исследований применяли:
I.
Общее клиническое исследование животного;
31
клинико-
II.
Исследование зоны патологического процесса;
III.
Клинико-морфологическое исследование крови;
IV.
Биохимическое исследование сыворотки крови;
V.
Исследование сыворотки крови на тироксин и трийодтиронин
VI.
Гистологическое исследование.
VII.
Генетические исследования. ДНК-маркерный тест
I.
Общее клиническое исследование животного.
Обследование
собаки
с
подозрением
на
генерализованную
прогрессирующую атрофию сетчатки проводили со сбора анамнеза. У
животных проводили измерение температуры тела, частоты пульса и
дыхания. Исследовали габитус, кожный и волосяной покров, слизистые
оболочки и лимфатические узлы головы. Общее клиническое исследование
животного проводилось по общее принятой методике. Исследование
переднего отрезка глаза проводили по общепринятой методике.
II.
Исследование зоны патологического процесса
Использовались субъективные методы исследования состояния
сетчатки: мигательный рефлекс, тест с лабиринтом, тест с шариком ваты, а
также объективные методы исследования состояния сетчатки, включающие
электроретинографию, ретинофотографию, генетические исследования.
Субъективные методы исследования.
Мигательный рефлекс – по направлению к голове собаки проводили
резкое движение руки, обращая внимание на реакцию животного. В норме
здоровое животное реагирует морганием, втягиванием глазного яблока в
орбиту, или движением в сторону от источника угрозы.
Тест с лабиринтом. Животное помещается в незнакомое затемненное
помещение с большим количеством препятствий. Здоровое животное
хорошо ориентируется в окружающем пространстве.
32
Тест с шариком ваты. В поле зрения животного бросали комок ваты.
Животные с хорошим зрением отвечали на увиденное поворотом глаз,
движением головы.
Объективные
методы
исследования
сетчатки
проводились
с
использованием офтальмоскопа фирмы Riester (Германия), фундускамеры
(Kowa Genesis) и электроретинографа RETIport ERG Laptop Version Acri/Tec.
При помощи прямой
офтальмоскопия
и фундускопии
изучали
состояние диска зрительного нерва, сетчатки, хориоидеи, прозрачность
светопреломляющих сред. При этом обращали внимание на размер, форму,
цвет диска зрительного нерва, перипапиллярную область. При исследовании
ретинальных сосудов обращали внимание на их количество, распределение,
диаметр, наличие ветвлений. Осматривая тапетальную и нетапетальную зону,
обращали внимание на наличие гиперрефлекторности, очагов гипер- и
депигментации. Данный метод исследования позволял также
получать и
сохранять панорамную картину глазного дна животного, с возможностью
выведения ее на большой экран.
Электроретинографическое
исследование
проводилось
основных принципов и стандартов регистрации ЭРГ
по
схеме
принятые European
College of Veterinary Ophthalmologists (ECVO) включающих:
1) максимальный ответ в темно-адаптированном глазу;
2) палочковый ответ в темно-адаптированном глазу;
3) колбочковый ответ (необходимо световая адаптация в течение
5-10 мин, фоновое освещение 20 лк с целью подавления
палочкового аппарата);
4) осцилляторные биопотенциалы;
5) фликер-ответ, возникает при быстро повторяющемся стимуле
(мелькающая или ритмическая ЭРГ).
Методика
электроретинографического
исследования
была
следующей, исследуемую собаку помещали в темную комнату на 20 минут
33
(для темновой адаптации). Для обезболивания конъюнктивы роговицы
использовали 0.5% алкаин. Для расширения зрачка применяли мидрум
(тропикамид). Для проведения исследований использовали три электрода:
два пассивных и один активный. Пассивные электроды ставили под кожу в
области наружного угла глаза и орального края теменной кости. Активный
электрод с контактной линзой и со вспышкой на присоске, фиксировали на
поверхности роговицы.
Полученные данные выводились
плоскость
в
виде
кривой.
По
прибором
оси
на координатную
абсцисс отмечали
время
в
миллисекундах, а по оси ординат - суммарное число в микровольтах. В
полученной кривой выделяется две основные волны.
Основой
этого
метода
являлась
регистрация
и
анализ
электроретинограммы в различных условиях световой стимуляции и
адаптации при варьировании размера, формы, длительности и частоты
следования стимулов, длины волны и интенсивности световых вспышек и
фона.
III. Клинико-морфологическое исследование крови. Проводили
по общепринятой методике.
IV. Биохимическое
автоматических
исследование
многофункциональных
крови проводили
биохимических
на
анализаторах:
Синхрон 4 (фирма Бекман) и Хитачи (Япония). Использовались реактивы
фирм: Бекман и Хуматрон. Контролем качества реактивов являлись
контрольные сыворотки фирмы Hymatron с нормальным и высоким
содержанием исследуемых показателей. Контроль проводился обязательно
перед каждым исследованием, одновременно проводился контроль со
стандартом.
34
V.
Исследование
сыворотки
крови
на
тироксин
и
трийодтиронин.
Радиоиммунологический
радиоизотопной
метки
метод
антигенов
или
основан
антител.
на
применении
Является
наиболее
чувствительным методом определения антигенов и антител, Первоначально
он
был
разработан
как
специфический
метод
измерения
уровня
циркулирующих в крови гормонов. Тест-системой являлись меченный
радионуклидом гормон (антиген) и антисыворотка к нему. Если к такой
антисыворотке добавить материал, содержащий искомый гормон, то он
свяжет часть антител, при последующем внесении меченого титрованного
гормона с антителами свяжется уменьшенное по сравнению с контролем его
количество. Результат оценивают по сопоставлению кривых связанной и
несвязанной радиоактивной метки. Эта разновидность метода носит название
конкурентной реакции.
VI.
Гистологические методы исследования.
Для гистологического исследования использовали энуклиированное
глазное
яблоко
от
трупов
животных
с
клиническими
признаками
генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки.
Образцы фиксировали в 10%-ном
нейтральном формалине, затем
проводили проводку в гистологическом процессоре TBS-120, далее заливали
в парафин в заливочном модуле «Микром». Парафиновые
срезы
изготавливали на микротоме «Olympus» толщиной 5-7 мкм. Окраску срезов
гематоксилином и эозином проводили в покрасчике Shandon. После чего
исследовали срезы под световым микроскопом Olympus, фотографировали
камерой Pixelink 2,2 Мр.
35
VII. Генетические исследования.
Исследования проводились в лаборатории Optigen в Германии.
Материалом для исследования являлась проба крови, взятая в специальные
пробирки. Метод основан на многократном избирательном копировании
определенного участка ДНК при помощи ферментов in vitro. Для выявления
мутантного
гена
производится
обработка
окрашивание и ультрафиолетовое облучение
гелем-электрофорезом,
амплифицированного
(размноженного) участка ДНК.
Цифровой
материал,
полученный
в
процессе
исследований,
подвергали статистической обработки по классической методике (В.Ю.
Урбах, 1964).
36
ГЛАВА III
ФАКТОРЫ РИСКА ВОЗНИКНОВЕНИЯ И РАЗВИТИЯ
ГЕНЕРАЛИЗОВАННОЙ ПРОГРЕССИРУЮЩЕЙ АТРОФИИ
СЕТЧАТКИ У СОБАК
Исследования, проведенные на кафедре биологии и патологии мелких
домашних лабораторных и экзотических животных ФГОУ ВПО МГАВМиБ,
позволили нам сделать предположение о наличии определенных групп риска
в отношении генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки у собак
в
зависимости
от
породы,
момента
проявления
клинических
и
электроретинографических признаков, а также половых особенностей.
При выяснении тяжести течения генерализованной прогрессирующей
атрофии сетчатки у собак, у владельцев собирали данные о содержании,
кормлении заболевшего
животного, времени появления клинических
признаков и изменений поведения питомцев.
Изучая
характер
течения
генерализованной
прогрессирующей
атрофии сетчатки у собак, выявили 8 собак (18% случаев) с начальной
стадией ГПАС, 17 собак (37% случаев) со средней стадией заболевания и 20
собак (45%) с поздней стадией (таб.5., рис.4).
Таблица 5
Степень тяжести генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки у
собак
Течение болезни
Абсолютные
величины
Относительные
величины %
Начальная стадия
8
18
Средняя стадия
17
37
Поздняя стадия
20
45
Всего:
45
100
р0,05
37
Степень тяжести ГПАС
18%
45%
начальная стадия
средняя стадия
поздняя стадия
37%
Рис.4. Структурная характеристика собак больных генерализованной
прогрессирующей атрофии сетчатки разной степени тяжести.
Как показали проведенные исследования клинические признаки и
тяжесть развития генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки
зависят от породы и возраста животного (рис.5).
Установлена корреляция между возрастными параметрами животного
и
количеством
заболевших
собак
(таб.6.).
Генерализованную
прогрессирующую атрофию сетчатки чаще встречали у собак в возрасте от 3
до 6 лет 49% (22 случаев), а также
Наименьшее количество
от 7 до 9 лет 31% (14 случаев).
случаев заболеванием приходилось на пожилых
собак, старше 9 лет 10% (5 случаев) а также молодых от 1 года до 2 лет 5% (2
случая).
38
Таблица 6
Частота возникновения генерализованной прогрессирующей атрофии
сетчатки в зависимости от возраста
Возраст
(лет)
Количество больных
(в абсолютных
величинах)
Количество больных
(в относительных величинах,
%)
до 1
2
5
1–2
2
5
3–6
22
49
7-9
14
31
9 и более
5
10
Всего
45
100
р0,05
Возраст собак
15%
2%
13%
до 1 года
2-3 года
от 4 до 6 лет
старше 7 лет
70%
Рис.5. Структурная характеристика собак больных генерализованной
прогрессирующей атрофии сетчатки разного возраста.
39
Результаты
исследования
показали,
что
чаще
всего
генерализованную прогрессирующую атрофию сетчатки диагностировали у
таких пород как: карликовый пудель (12 собак– 29% случаев), лабрадор (6
собак– 13 % случаев), цверкшнауцер (5 собак – 11% случаев), американский
кокер спаниель (3 собаки – 6,5% случаев), такса (3 собаки – 6,5% случаев),
бернский зененхунд (3 собаки – 6,5% случаев), менее распространено у щитцу (2 собаки – 4,5% случаев), шотландской овчарки (2 собаки – 4,5%
случаев) и шпица (2 собаки – 4,5% случаев). И как показали исследования
менее распространена данная офтальмопатия у мопсов (1 собака – 2%
случаев), йоркширских терьеров (1 собака – 2% случаев), пекинесов (1 собака
– 2% случаев), сибирских хаски (1 собака – 2% случаев), и ирландских
сеттеров (1 собака – 2% случаев), (таб. 7., рис.6).
карликовый
пудель
такса
мраморная
10% 3% 2%
45%
20%
цверг-шнауцер
лабрадор
20%
кокер спаниель
йоркширский
терьер
Рис.6. Структурная характеристика собак больных генерализованной
прогрессирующей атрофии сетчатки разных пород.
40
Таблица 7
Породный состав собак больных генерализованной прогрессирующей
атрофией сетчатки у собак
Порода
Количество больных
(в абсолютных
величинах)
Количество больных
(в относительных
величинах, %)
Американский
коккер спаниель
3
6,5
Йоркшир. терьер
1
2
Цверкшнауцер
5
11
Щи-тцу
2
4,5
Мопс
1
2
Карл. пудель
12
29
Пекинес
1
2
Такса
3
6,5
Сиберийский
хаски
1
2
Ирландский
сеттер
1
2
Шотландская
овчарка
2
4,5
Шпиц
2
4,5
Лабрадор
6
13
Бернский
зененхунд
3
6,5
Беспородные
2
6,5
Всего
45
100%
р0,05
41
Кроме того выявлена корреляционная
зависимость
изменения в
поведении животного, электроретинографических показателей, а также
появлении первых диагностических клинических признаков заболевания
(таб.8.). И так у ирландского сеттера и шотландской овчарки офтальмические
признаки проявлялись в возрасте 12-16 недель, изменения в поведении 6-8
недель, изменения электроретинограммы диагностировали уже в 2-6
недельном возрасте. У норвежских зененхундов и такс офтальмические
признаки проявлялись в 6-12 месяцев,
изменения в поведении в 6 месяцев,
изменения электроретинограммы диагностировали у зененхунда на 5-6
недели а у такс на 4-9 мес. У тибетского терьера офтальмические признаки
диагностировали в возрасте 10-18 месяцев, изменения в поведении в 6-12
месяцев, изменения электроретинограммы диагностировали на 10 месяце. У
акиты офтальмические признаки проявлялись в возрасте 2 лет, изменения в
поведении 1-3 года, изменения электроретинограммы 1,5 – 2 года. У
шнауцеров офтальмические признаки проявлялись в 1-2 года, изменения в
поведении в 6-12 месяцев, изменения электроретинограммы диагностировали
на 6-8 неделе. У пуделей, американских, английских кокер спаниели и
цвергшнауцеров офтальмические признаки и изменения в поведении
проявлялись в возрасте 3-5 лет, так как изменения электроретинограммы
диагностировали в 1 год.
У лабрадоров офтальмические
признаки
проявлялись в возрасте 4-6 лет, изменения в поведении 3-5 лет, изменения
электроретинограммы диагностировали в 3 года. У
сибирских хаски
офтальмические признаки проявлялись в 2 года, изменения в поведении 2 -4
года, изменения электроретинограммы диагностировали в 1 год.
42
Таблица 8
Динамика развития ГПАС в зависимости от породы
Порода
Ирландский
сеттер
Шотландская
овчарка
Норвежский
эльгхунд
Такса
миниатюрная
длинношерстная
Тибетский
терьер
Акита
Миниатюрный
шнауцер
Сибирский
хаски
Пудель
Американский
кокер спаниель
Цверг-шнауцер
Лабрадор
ретривер
Английский
кокер спаниель
Офтальмические
признаки
Изменения
Изменения
в
электроретинограммы
поведении
14 ±3 недели
7 ± 2нед.
4± 3 нед.
14± 2 недели
5± 1 нед.
4± 3нед.
9 ± 4месяцев
5± 2 мес.
4± 2 нед.
9± 4 мес.
5± 2 мес.
6± 3 мес.
14± 4 мес.
9± 2 мес.
10± 1 мес.
1,5± 1 год
2± 1 год
1,5± 1 год
2± 1 год
9± 3 мес.
7± 2 нед.
1,5± 1 год
3± 1 год
8±4 мес.
4± 1 год
4± 1 год
7± 2 мес.
4± 1 год
4± 1 год
8± 2 мес.
4± 2 года
4± 2 года
14 ± 3 мес.
5± 1 год
3-5 лет
3 года
6± 2 года
4 ± 2 года
11± 2 мес.
р0,05
Изучая факторы риска развития генерализованной прогрессирующей
атрофии сетчатки в зависимости от пола, установлено, что из общего
количества животных 19 собак (100% случаев) аутосомно-рецессивный тип
наследования выявлялся у 14 собак (73,7% случаев) из которых 6 самцов
(31,6 % случаев) и 8 самок (42,1 % случаев). Аутосомно-доминантный тип
наследования выявлялся у 2 собак (10,6 % случаев) из которых один самец
(5,3 % случаев) и одна самка (5,3% случаев). Наследовали дефектный ген с Х
хромосомой 3 самки (15,7% случаев).
43
Аутосомно-рецессивный
и
аутосомно-доминантный
способ
наследования, встречался у собак обоих полов, практически с равной
частотой, однако с Х - хромосомным типом наследования чаще встречался
у самок (таб. 9.), что подтверждают и другие авторы Donald J., 1990;
Hardcastle A.J., 2000; Hamel C., 2006.
Таблица 9
Частота возникновения генерализованной прогрессирующей атрофии
сетчатки в зависимости от пола и типа наследования
Аутосомнорецесивный
Тип
насл.
Кол.
Жив.
(абсо.
число)
Кол.
жив.(относи.
число, %)
Аутосомнодоминантный
Кол.
Жив.
(абсо.
число)
Кол.
жив.(относи.
число, %)
Передача с Х
хромосомой
Кол.
Жив.
(абсо.
число)
Кол.
жив.(относи.
число, %)
Пол
Кобели
6
31,6
1
5,3
-
-
Суки
8
42,1
1
5,3
3
15,7
Всего
19
100
19
100
19
100
р0,05
Резюме
Клиническим
обоснованием
развития
генерализованной
прогрессирующей атрофии сетчатки у собак являются следующие факторы
риска: возраст животного, порода, пол, тип наследования.
Установленная
животного
и
корреляция
количеством
между
заболевших
44
возрастными
собак
параметрами
свидетельствует,
что
генерализованную прогрессирующую атрофию сетчатки чаще встречали у
собак в возрасте от 3 до 6 лет, а также от 7 до 9 лет.
Изучая факторы риска развития генерализованной прогрессирующей
атрофии сетчатки в зависимости от типа наследования и пола, установлено,
что из общего количества животных, аутосомно-рецессивный и аутосомнодоминантный тип наследования выявлялся чаще у самок.
45
ГЛАВА IV
ОСОБЕННОСТИ КЛИНИЧЕСКОЙ КАРТИНЫ И
МОРФОЛОГИЧЕСКОГО СОСТАВА КРОВИ У СОБАК С
ГЕНЕРАЛИЗОВАННОЙ ПРОГРЕССИРУЮЩЕЙ АТРОФИЕЙ
СЕТЧАТКИ
Основной задачей данного раздела работы явилось изучение
клинических особенностей глазного дна на различных стадиях заболевания.
Клинические
признаки
генерализованной
прогрессирующей
атрофии
сетчатки разнообразны и в большой степени зависели от тяжести
патологического процесса. Установленная корреляционная зависимость
между показателями электроретинографии, ретинофотографии позволила
классифицировать
заболевания на три стадии: начальную, среднюю и
позднюю.
Изучая
характер
течения
генерализованной
прогрессирующей
атрофии сетчатки у собак, выявлено 8 собак (18% случаев) с начальной
стадией ГПАС, 17 собак (37% случаев) со средней стадией и 20 собак (45%) с
поздней стадией. Как видно из таблицы 10 поражения при генерализованной
прогрессирующей атрофии сетчатки были симметричные – 45 собак (100%
случаев).
Объективными
диагностическими
клиническими
признаками
начальной стадии ГПАС (таб.10.) являлись: истощение сосудов сетчатки,
клинически характеризующееся, изменением их диаметра, определяли у 2
собак (25% случаев), незначительные изменения окраски глазного дна на
ранней стадии у 1 собаки (12,5% случаев).
46
Таблица 10
Особенности проявления клинической картины ГПАС.
Клин.
признаки.
Никталоп
ия
Двустор.
пораже.
Гиперреф.
Истощ.
сосудов
сетч.
Умень.кол
сосудов
сетч.
Побледне
ние д.з.н.
Незнач.
изм
окраски
глаз. дна
Пятна на
нетапет.ча
сти глаз.
дна
Появлени
е пигмен.
и депиг.
участков
Отклады.
миелина
вокруг
д.з.н.
Втор.
катаракта
Всего
Начальная
стадия
Кол.
Кол. жив.
жив(аб (относи.чи
со.
сло, %)
число)
-
Средняя
Поздняя
стадия
стадия
Кол.
Кол.
Кол. жив.
Кол. жив.
жив(аб
жив(аб (относи.чи
(относи.чи
со.
со.
сло, %)
сло, %)
число)
число)
20
100
17
100
8
100
17
100
20
100
-
-
10
58,8
20
100
2
25
17
100
20
100
-
-
3
17,6
20
100
-
-
8
47
18
90
1
12,5
2
11,8
20
100
-
-
1
5,7
12
60
-
-
2
11,7
15
75
-
-
-
-
9
45
-
-
-
-
13
65
8
100
17
100
20
100
р0,05
47
Объективными
диагностическими
признаками
генерализованной
прогрессирующей атрофии сетчатки на средней стадии (таб.10.) явились:
никталопия (потеря ночного зрения), которая была выявлена у 17 собак
(100% случаев). Гиперрефлекторность или увеличение отражательной
способности тапетума (рис.7, 9, 12) обнаруживали у 10 собак (58,8%
случаев). Истощение сосудов сетчатки (рис. 8, 10 ,11), и уменьшение их
количества зарегистрировали у 17 собак (100% случаев), (рис.11, 12) и у 3
собак (17,6% случаев) соотвественно. Для этой стадии характерным также
являлось незначительные изменение окраски глазного дна (2 собак - 11,8%
случаев), побледнение диска зрительного нерва (рис. 11.) (8 собак - 47%
случаев), пятна на нетапетальной части глазного дна (рис.12.) (1 собака 5,7%
случаев),
а
также
чередование
пигментированных
депигментированных участков (2 собаки - 11,7 % случаев).
Рис.7. ГПАС средняя стадия
48
и
Рис.8. ГПАС умеренная стадия. Гиперрефлекторность (увеличение
отражательной способности), ослабление сосудистой сети.
Рис.9. ГПАС умеренная стадия. Выраженная гиперрефлекторность.
49
Рис.10. ГПАС умеренная стадия. Ослабление сосудистой сети.
Рис.11. ГПАС умеренная стадия. Ослабление сосудистой сети,
гиперрефлекторность.
50
Рис. 12. ГПАС умеренная стадия. Нетапетальная часть глазного дна с
выраженной гиперефлекторностью.
Субъективным клиническим признаком поздней стадии явилось
снижение зрительной способности, как ночью, так и днем, особенно это
было заметно при попадании собаки в незнакомую обстановку. Характерным
являлось расширение зрачка, при осмотре, глаза казались, "серебристыми"
или "желтыми".
При поздней стадии генерализованной прогрессирующей атрофии
сетчатки
обнаружены (таб.10.): никталопия у 20
гиперрефлекторность (рис.14, 15, 19, 21),
собак (100% случаев),
у 20 собак (100% случаев),
истощение сосудов сетчатки, клинически характеризующееся изменением
их диаметра (рис. 13,14) у 20 собак (100% случаев), уменьшение количества
сосудов сетчатки (рис.13-26) у 20 собак (100% случаев), незначительные
изменения окраски глазного дна (рис.14,15) у 20 собак (100%).
Все изменения сосудов приводили к атрофическим и дегенеративным
изменениям диска зрительного нерва и так: побледнение диска зрительного
51
нерва (рис.13, 14, 15) выявили у 18 собак (80% случаев), скопление миелина
вокруг зрительного нерва (рис.15,16) выявили у 9 собак (45% случаев).
Зрительная атрофия являлась
поздним признаком, и представлена была
беловато-серым диском с зубчатыми краями, чашеобразной формы (рис. 1720).
Очень часто на поздних стадиях отмечались ярко выраженные сосуды
хороидеи (рис.26.).
В дальнейшем на нетапетальной части сетчатки
у 15 собак (75%
случаев) выявили пигментированные и депигментированные (рис.22 - 25.)
участки- глыбки. Генерализованная депигментация встречалась чаще. Пятна
на нетапетальной части глазного (рис.26.) дна выявили у 12 собак (60%
случаев).
Вторичная катаракта у 13 собак (65% случаев), на поздних стадиях
развития болезни
проявлялась в виде радиальных, спицеобразных
помутнений от экватора к центру хрусталика (кортикальная катаракта).
Рис. 13. ГПАС поздняя стадия. Истончение сосудов, гиперрефлекторность,
побледнение диска зрительного нерва.
52
Рис.14. ГПАС поздняя стадия. Гиперрефлекторность, ослабление сосудистой
сети, атрофия диска зрительного нерва, изменение цвета вокруг диска
зрительного нерва.
Рис. 15. ГПАС поздняя стадия. Атрофия диска зрительного нерва,
изменение цвета вокруг диска зрительного нерва.
53
Рис.16. ГПАС поздняя стадия. Атрофия диска зрительного нерва, изменение
цвета вокруг диска зрительного нерва.
Рис.17. ГПАС поздняя стадия. Беловато -серый диск с зубчатыми краями,
чашеобразной формы.
54
Рис.18. ГПАС поздняя стадия. Вторичная катаракта, атрофия диска
зрительного нерва.
Рис. 19. ГПАС поздняя стадия. Атрофия зрительного нерва, беловато-серый
диск с зубчатыми краями, чашеобразной формы
55
Рис. 20. ГПАС поздняя стадия. Атрофия сетчатки.
Рис.21.ГПАС поздняя стадия. Гиперрефлекторность нетапетального участка
глазного дна.
56
Рис. 22. ГПАС поздняя стадия. Нетапетальная зона –очаги
гиперпигментации.
Рис. 23. ГПАС поздняя стадия. Нетапетальная зона –очаги де-и
гиперпигментации.
57
Рис.24. ГПАС поздняя стадия. Нетапетальная зона –очаги депигментации в
виде просветлении.
.
Рис. 25. ГПАС поздняя стадия. Нетапетальная зона –очаги де – и
гиперпигментации. Ходы сосудов.
58
Рис.26. Сосуды хороидеи.
Резюме
Таким
образом,
клиническое
прогрессирующей атрофии сетчатки
проявление
генерализованной
у собак многообразно,
частота
выявления данного заболевания пропорциональна его степени тяжести. Ее
объективными диагностическими симптомами являются: куриная слепота,
мидриаз, гиперрефлекторность, ослабление сосудистого рисунка, изменение
окраски глазного дна, гипер- или депигментация тапетум нигрум, вторичная
катаракта.
59
ГЛАВА V
ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ПРИ
ГЕНЕРАЛИЗОВАННОЙ ПРОГРЕССИРУЮЩЕЙ АТРОФИИ
СЕТЧАТКИ У СОБАК
5.1. МОРФОЛОГИЧЕСКИЙ
Результаты
исследования
СОСТАВ КРОВИ ПРИ ГПАС
морфологического
состава
крови
при
начальной, средней и тяжелой стадии ГПАС представлены в таблицы 11, из
нее следует, что количество
гемоглобина в группе контроля составляет
140±20 г/л, так как на начальной стадии 139,4±4,1 г/л, на средней стадии
142,1± 4,2 г/л, а на поздней стадии 140,6± 3,9 г/л. Количество эритроцитов в
контрольной группе составляет 6,5±2,1 млн/мкл, на начальной стадии 6,8
±0,2 млн/мкл, на средней стадии 6,6±0,4 млн/мкл, а на поздней стадии 7,1±0,3
млн/мкл. Лейкоциты в группе контроля составляют 9,0±3,0 тыс/мкл, на
начальной стадии 10,2 ±0,8 тыс/мкл, на средней стадии 8,9±0,8 тыс/мкл, на
поздней 8,8±0,6 тыс/мкл. Базофилии отсутствуют
в каждой из групп.
Эозинофилы составляют в группе контроля 2-10 %, на начальной стадии
1,6±1,9 %, на средней стадии 4,1±0,8 %, а на поздней 4,8±0,6 %. Количество
палочкоядерных нейтрофилов составляет в группе контроля
0-3 %, на
начальной стадии 0,7±0,2 %, на средней стадии 1,2±0,4 %, а на поздней
69,3±1,3 %. Сегментоядерные нейтрофилы составляют в группе контроля 6577 %, на начальной стадии 69±1,9 %, на средней стадии 69,7±1,7 %, а на
поздней 69,3±1,3. Процентное соотношение лимфоцитов в группе контроля
составляет 10-30 %, на начальной стадии 19,6±2,3 %, на средней стадии
17,7±1,6 %, а на поздней 20,1±1 %. Количество моноцитов составляет в
группе контроля 2-10 %, на начальной стадии 6,4±0,5 %, на средней стадии
6,4±0,8 %, а на поздней 4,3±0,5 %.
60
Таблица 11
Результаты исследования морфологического состава крови у собак
Нейтрофилы, %
Эрит.
Групп
ы жив.
Гем
, г/л
Контр.
140
±20
Нач.
стадия
139,
4±
млн/м
кл
Лейко
тыс/м
кл
6,5±2,1 9,0±3,0
6,8
±0,2
10,2
±0,8
Баз
%
Эо
з
П
% М Ю Я
0-1
210
-
4,1
Сред.
стадия
Позд.
стадия
142,
1±
4,2
6,6±
0,4
0,8
140,
6±
3,9
7,1±
8,8±
8,9±
-
0,3
0,6
1030
2-10
0-3
-
19,6
±
1,9
0,7
± 69±1
,9
0,2
4,1
±
1,2
±
69,7
±
17,7
±
0,8
0,4
1,7
1,6
4,8
±
1,5
±
69,3
±
0,3
1,3
0,6
р0,05
61
6577
Мон,
%
-
1,6
±
-
СЯ
Лим
ф
%
-
-
-
-
-
6,4±0
,5
2,3
20,1
±1
6,4±0
,8
4,3±0
,5
5.2. БИОХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ КРОВИ ПРИ ГПАС
Результаты исследования по изучению биохимических показателей
сыворотки крови (таб. 12.) собак с ГПАС свидетельствуют, что содержание
общего белка на начальной стадии составляет 64,7±1,8 г/л, на средней стадии
72,8±2,3 г/л, а на поздней 75,8±2,2 г/л.
Содержание альбумина в сыворотке крови на начальной стадии
составляет 29,4±1,2 г/л, на средней стадии 32,3±1,8 г/л, а на поздней стадии.
Содержание глюкозы на начальной стадии составляет 4,8±0,2 ммоль/л, на
средней стадии 4,8±0,3 ммоль/л, а на поздней стадии 5,5±0,3 ммоль/л.
На начальной стадии содержание креатинина составляет
92,5±2,8
мкмоль/л, на средней стадии 101,3±8,1 мкмоль/л, а на поздней стадии
99,7±12,9 мкмоль/л. Количество мочевины на начальной стадии составляет
6,3±0,5 ммоль/л, на средней стадии 6,7±0,7 ммоль/л, а на поздней стадии
7,7±0,9 ммоль/л. Содержание амилазы на начальной стадии составляет
870,3±96 МЕ/л, на средней стадии 984±119 МЕ/л, а на поздней стадии
1022±140 МЕ/л. Количество АЛТ на начальной стадии составляет 51,6±4,2
МЕ/л, на средней стадии 47,0±9,7 МЕ/л, а на поздней стадии 55,2±11,8 МЕ/л.
Количество АСТ на начальной стадии составляет 38,8±2,9 МЕ/л, на средней
стадии 37,2±3,9 МЕ/л, а на поздней стадии 34,6±3,8 МЕ/л.
Содержание общего билирубина на начальной стадии составляет
7,2±0,5 мкмоль/л, на средней стадии 7,8±0,5 мкмоль/л, а на поздней стадии
8,2±0,9 мкмоль/л. Количество прямого билирубина на начальной стадии
составляет 0,5±0,06 мкмоль/л, на средней стадии 0,73±0,08 мкмоль/л, а на
поздней стадии 0,81±0,07 мкмоль/л.
Содержание щелочной фосфатазы на начальной стадии составляет
72,9±6,5 МЕ/л, на средней стадии 93,6±12,4 МЕ/л, на поздней стадии
составляет 104,6±10,7 МЕ/л. Количество холестерина составляет на
начальной стадии 4,7±0,3 ммоль/л, на средней стадии 5,5±0,7 ммоль/л, а на
поздней 5,9±0,8 ммоль/л.
Содержание
62
триглицеридов составляет на
начальной стадии 0,73±0,04 ммоль/л, на средней стадии 0,88±0,05 ммоль/л, а
на поздней 0,81±0,07 ммоль/л.
Таблица 12
Биохимические показатели сыворотки крови собак
Общий белок, г/л
55,0-79,2
Начальная
стадия
М±m
64,7±1,8
Альбумин, г/л
25,6-37,0
29,4±1,2
32,3±1,8
35,8±1,6
Глюкоза, ммоль/л
3,3-6,3
4,8±0,2
4,8±0,3
5,5±0,3
Креатинин,мкмоль/л
61-111
92,5±2,8
101,3±8,1
99,7±12,9
Мочевина, ммоль/л
3,6-9,7
6,3±0,5
6,7±0,7
7,7±0,9
Амилаза, МЕ/л
395-1278
870,3±96
984±119
1022±140
АЛТ, МЕ/л
29,8-70,5
51,6±4,2
47,0±9,7
55,2±11,8
АСТ, МЕ/л
23,8-45,1
38,8±2,9
37,2±3,9
34,6±3,8
Билирубин общий,
мкмоль/л
6,1-9,9
7,2±0,5
7,8±0,5
8,2±0,9
Билирубин прямой,
мкмоль/л
0,0-1,0
0,5±0,06
0,73±0,08
0,81±0,07
27-112,8
72,9±6,5
93,6±12,4
104,6±10,7
2,1-6,0
4,7±0,3
5,5±0,7
5,9±0,8
0,51-0,94
0,73±0,04
0,88±0,05
0,81±0,07
Показатели
Щел. фосф. МЕ/л
Холестерин, ммоль/л
Контроль
Средняя
стадия
М±m
72,8±2,3
Поздняя
стадия
М±m
75,8±2,2
Триглицериды,
ммоль/л
р0,05
63
5.3. РЕЗУЛЬТАТЫ
ИССЛЕДОВАНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ ГОРМОНОВ ЩИТОВИДНОЙ
ЖЕЛЕЗЫ (ТИРОКСИНА И ТРИЙОДТИРОНИНА) В КРОВИ СОБАК С ДИАГНОЗОМ
ГПАС.
Результаты
исследования
концентрации
гормонов
щитовидной
железы (трийодтиронина и тироксина) в крови собак с диагнозом
генерализованная прогрессирующая атрофия сетчатки показаны на таблице
13, и рисунке 27, из которой следует, что из 19 исследуемых животных
(100% случаев) у 10 животных (52,6% случаев) выявлено снижение общего
количества трийодтиронина
(Т3) до 0,9 ±0,1
nmol/l, р≤0,05 а также
тироксина (Т4) 24,2±0,4 nmol/l р≤0,05: из них 3 самца (15, 8 % случаев) и 7
самок (36,8% случаев). Количественная и структурная характеристики
показаны на таблице 14 и рисунке 28.
47%
53%
собаки с
пониженным
содержанием
гормонов
собаки с
нормальным
содержанием
гормонов
Рис. 27. Структурная характеристика концентрации гормонов щитовидной
железы у собак с ГПАС.
Таким образом,
самки болеют в 2,5 раза чаще (36,8% случаев), чем
самцы (15,8 % случаев). Такой больший риск возникновения заболевания у
самок мы связываем с проведением у этих животных гистеровариоэктомии.
64
Таблица 13
Результаты исследования по изучению содержания трийодтиронина и
тироксина в крови собак с диагнозом генерализованная прогрессирующая
атрофия сетчатки
Показатель
Трийодтиронин
(Т3)
Тироксин (Т4)
Контрольная
Опытная
группа
группа
nmol/l
1,1- 2,1
0,9 ±0,1
nmol/l
25,7 – 51,5
24,2±0,4
Ед. изм.
р0,05
Важно также подчеркнуть, что такие породы собак, как пудели, таксы
кокер-спаниели, золотистые ретриверы, ирландские сеттера, староанглийская
и шотландская овчарки имеют повышенный риск развития гипотиреоза,
особенно в среднем возрасте (2-6 лет). А у некоторых цверкшнауцеров
отмечается врожденный вторичный гипотиреоз, вследствие недостатка
тиреотропного гормона (Гофф А., Томас А., 2005).
Таблица 14
Количественная характеристика собак по половой принадлежности
Пол
Количество собак в
Количество собак в
абсолютных
относительных
величинах
величинах, %
Собаки с нормальным содержанием гормонов
Кобели
3
15,8
Суки
6
31,6
Собаки с пониженным количеством гормонов
Кобели
3
15,8
Суки
7
36,8
Всего животных
19
100
р0,05
65
Пол собак
32%
кобели
68%
суки
Рис. 28. Структурная характеристика собак с гипотиреозом разного пола.
РЕЗЮМЕ
Анализ
результатов
исследования
морфологического
и
биохимического состава крови не выявил отклонении от физиологической
нормы. Таким образом, данные показатели не являются значимыми в
диагностике исследуемого заболевания. Полученные результаты согласуются
с данными Parkes J., Aguirre G., Rockey J., Liebman P., 1982; Acland G., 1988;
Barnett К., 1965; Larska M., 2003; Martin Charles L., 2005.
В связи с этим, изменение гормонального фона у опытных животных,
скорее всего не является диагностическим маркером, указывающим на
наличие генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки. Наши
исследования нашли подтверждение в работах Patterson D.F., 2000; Galibert
F.2004; Maubaret C., 2005; Aguirre G.D., Acland G.M., 2006.
66
ГЛАВА VI
ЗНАЧЕНИЕ ОБЪЕКТИВНЫХ И СУБЪЕКТИВНЫХ МЕТОДОВ
ИССЛЕДОВАНИЯ В ДИАГНОСТИКЕ ГПАС
Для оценки зрительной способности использовались субъективные
методы исследования состояния сетчатки: мигательный рефлекс, тест с
лабиринтом, тест с шариком ваты, а также зрачковый рефлекс, а также
объективные методы исследования состояния сетчатки, включающие
электроретинографию
Изучая результаты субъективных и объективных
зрительной
способности,
на
разных
стадиях
методов оценки
генерализованной
прогрессирующей атрофии сетчатки выявлено: у 8 собак (18% случаев) с
начальной стадией ГПАС, 17 собак (37% случаев) со средней стадией
заболевания и 20 собак (45%) с поздней стадией.
6.1 СУБЪЕКТИВНЫЕ МЕТОДЫ ОЦЕНКИ ЗРИТЕЛЬНОЙ СПОСОБНОСТИ НА
РАЗНЫХ СТАДИЯХ ГПАС
В
таблицах
15-17
представлены
результаты
субъективного
исследования собак с начальной, средней и поздней стадией.
Методика этих исследовании была следующей:
для проверки
мигательного рефлекса – по направлению к голове собаки проводили резкое
движение руки, обращая внимание на реакцию животного. В норме здоровое
животное реагирует морганием, втягиванием глазного яблока в орбиту, или
движением в сторону от источника угрозы. Зрачковый рефлекс позволяет
оценить реакцию зрачка на свет. В норме зрачки суживаются при ярким
свете.
Для проведения теста с лабиринтом, животное помещали в
незнакомое затемненное помещение с большим количеством препятствий.
Здоровое животное хорошо ориентируется в окружающем пространстве.
67
При проведении теста с шариком ваты
в поле зрения животного
бросали комок ваты. Животные с хорошим зрением отвечали на увиденное
поворотом глаз, движением головы.
На начальной стадии (таб.15.) мигательный и зрачковый рефлексы
сохранялись у 8 собак (100 % случаев). Все собаки прошли положительно
тест с шариком ваты и тест с лабиринтом.
Таблица 15
Субъективные методы оценки зрительной способности на начальной
стадии ГПАС
Реакция
Начальная стадия
животного
Положительная реакция (+)
Отрицательная реакция (-)
Количество
Количество
Количество
Количество
животных
животных
животных
(абсолютное (относительное (абсолютное (относительное
число)
число)
число)
число)
животных
Методы
исследования
Мигатель.
8
100
-
-
8
100
-
-
8
100
-
-
8
100
-
-
8
100
-
-
рефлекс
Тест с лаб.
Тест с
шариком
ваты
Зрачковый
рефлекс
Всего
р≤0,05
68
На средней стадии ГПАС (таб.16.) положительную реакцию на
мигательный рефлекс отмечали у 15 собак (88% случаев), отрицательную у 2
собак (11,8% случаев). Тест с лабиринтом положительно прошли 6 собак
(35,3 % случаев), 11 собак (64,7 % случаев) натыкались на препятствия в
темном помещении. При дневном освещении собаки ориентировались лучше.
На бросаемый комок ваты положительно отреагировали 2 собаки (11,8
% случаев), у 15 собак (88 % случаев) реакция была отрицательной.
Зрачковый рефлекс был сохранен у всех 17 собак (100 % случаев).
Таблица 16
Субъективные методы оценки зрительной способности на средней
стадии ГПАС
Реакция
Средняя стадия
животного
Положительная реакция (+)
Отрицательная реакция (-)
Количество
Количество
Количество
Количество
животных
животных
животных
(абсолютное (относительное (абсолютное (относительное
Методы
число)
число)
число)
число)
исследования
животных
Мигатель.
15
88
2
11,8
6
35,3
11
64,7
2
11,8
15
88
Зрач.рефл.
17
100
-
-
Всего
17
100
17
100
рефлекс
Тест с лаб.
Тест с
шар.ваты
р≤0,05
69
На
поздней
стадии
ГПАС
(таб.17.)
мигательный
рефлексы
отрицательный у 17 собак (88 % случаев), положительно отреагировали 3
собаки (15 % случаев). Все 20 собак (100% случаев) не реагировали на комок
бросаемый ваты. Во время проведения теста с лабиринтом, все 20 собак (100
% случаев) натыкались на предметы, как в темном помещении, так и при
дневном свете. Положительный зрачковый рефлекс отмечали у 5 собак (25%
случаев). У 15 собак зрачковый рефлекс был отрицательным (75 % случаев),
у таких собак, как правило, зрачки расширены, не реагировали на свет.
Таблица 17
Субъективные методы оценки зрительной способности на поздней
стадии ГПАС
Реакция
Поздняя стадия
животного
Положительная реакция (+)
Количество
Методы
исслед.
животных
(абсолютное
число)
Мигатель
Количество
Количество
животных
(относительное
число %)
Тест с шар.
число)
17
85
-
-
20
100
-
-
20
100
5
25
15
75
20
100
20
100
рефлекс
Всего
(абсолютное
Количество
животных
(относительное
число %)
15
ваты
Зрачковый
животных
3
рефлекс
Тест с лаб.
Отрицательная реакция (-)
р≤0,05
70
6.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭЛЕКТРОРЕТИНОГРАФИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ СОБАК С
ГЕНЕРАЛИЗОВАННОЙ ПРОГРЕССИРУЮЩЕЙ АТРОФИЕЙ СЕТЧАТКИ
Изучая данные электроретинографических исследований, собак с
генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки на разных стадиях
заболевания
выявлена, корреляционная зависимость между показателями
электроретинограммы и стадиями заболевания.
На рисунке 29 представлена электроретинограмма здоровой собаки
(контрольная группа). Максимальный ответ в темноадаптированном глазу
состоит из комбинации ответов палочковой и колбочковой систем. На
нисходящей части а-волны выделяется две волны маленькой латентности –
ранние рецепторные потенциалы. Волна а имеет двойное происхождение
соответственно двум видам фоторецепторов: а1- волна отражает активность
фотопической системы сетчатки, а2-волна- скотопической системы.
Волна
b,
или
трансретинальный
потенциал,
представлена
в
позитивном компоненте волнами b1 и b2 . На восходящей части b- волны
отмечали 5-7 волночек – осцилляторные потенциалы, которые отражают
клеточные процессы, происходящие во внутренних плексиформных и
внутренних ядерных слоях, в особенности отражают ответ амакриновых и
биполярных клеток. В случае возникновения патологических процессов в
сетчатке при оценке электроретинограммы важно учитывать латентный
период а и b-волн Lа – латентный период а-волны; Lb- латентный период b –
волны;
Нарастание амплитуды а и b – волны, или изменение времени до пика
в ходе темновой адаптации отражает
фоторецепторов,
клеток
Мюллера,
функциональную сохранность
амакриновых,
биполярных
и
ганглионарных клеток: Тсb1- время кульминации b1; Тсb2- время кульминации
b 2.
71
В
таблице 18 и на рисунках 30-32 представлена сравнительная
характеристика компонентов электроретинограммы контрольной группы
собак, и собак с диагнозом
начальная, средняя и поздняя стадия
генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки.
Анализ данных по сравнительной характеристике
показателей
электроретинографии опытных и контрольных животных показал, что на
нисходящей части а-волны у животных выделяли
рецепторные
потенциалы.
Функциональные
две волны -ранние
показатели
а1-волны
(отображающей активность фотопической системы сетчатки), составляли в
группе контроля 50±8 мкВ, на ранней стадии 40±5 мкВ, на средней 30±5мкВ,
на поздней меньше 25 мкВ.
Активность скотопической системы сетчатки или а2-волна составляла
в группе контроля 80±10 мкВ, на ранней стадии 65±5 мкВ, на средней 50±5
мкВ, на поздней стадии меньше 35 мкВ.
Волна b представлена двумя волнами b1 b 2. Волна b1 составляла в
контрольной группе 220±10 мкВ, на начальной стадии 190±5 мкВ, на средней
150±20 мкВ, на поздней 20±15 мкВ. Волна b2 составляла в контрольной
группе 260±20мкВ, на начальной стадии 220±5мкВ, на средней 170±20 мкВ,
на поздней 50±30 мкВ.
На восходящем колене b-волны в контрольной группе отмечали 5-7
волн, называемых осцилляторными потенциалами, которые отражают
клеточные процессы, происходящие во внутренних плексиформных и
внутренних ядерных слоях, в особенности ответ амакриновых и биполярных
клеток. На начальной стадии генерализованной прогрессирующей атрофии
сетчатки количество осцилляторных потенциалов снижалось незначительно,
либо вообще их количество не изменялось. На средней стадии количество
осцилляторных потенциалов составляло 3 волны, а на поздней 2 или вообще
они отсутствовали.
72
Рис. 29. Электроретинограмма здоровой собаки.
По оси ординат – амплитуда волн электроретинограммы, мкВ, по оси абсцисс
– длительность волн электроретинограммы, мс.
Рис.30. Электроретинограмма собаки с начальной стадией генерализованной
прогрессирующей атрофии сетчатки (черный график-норма, синий-эрг на
начальной стадий ГПАС).
73
Рис. 31.Электроретинограмма собаки со средней стадией генерализованной
прогрессирующей атрофией сетчатки (черный график-норма, желтый-эрг на
средней стадий ГПАС)
Рис. 32. Электроретинограмма собаки на поздней стадии
генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки (черный графикнорма, красный-эрг на поздней стадий ГПАС).
74
Таблица 18
Сравнительная характеристика компонентов электроретинограммы
контрольной и опытной групп собак
Стадия
заболевания
Контрольная
Начальная
Средняя
Поздняя
группа
стадия
стадия
стадия
Компоненты
ЭРГ
а-волна
(Максимальный ответ в темно-адаптированном глазу, суммарный ответ палочек и
колбочек)
а1-волна, мкВ
50±8
40±5
30±5
≤25
а2-волна, мкВ
80±10
65±5
50±5
≤35
b-волна
b1-волна, мкВ
220±10
190±5
150±20
20±15
b2-волна, мкВ
260±20
220±5
170±20
50±30
5±2
5±1
3±1
2±1
10
8
17
20
Наличие
осцилляторных
потенциалов
Всего
животных
р0,05
В качестве примера рассмотрим наиболее демонстративные формы
генерализованной
прогрессирующей
атрофии
сетчатки,
при
которых
результаты электроретинографических исследовании играют важную роль в
подтверждении диагноза.
На рисунке 33 – 34 и в таблице 19 представлена электроретинограмма
6-летней
собаки
породы
карликовый
пудель
с
прогрессирующей атрофией сетчатки на поздней стадии.
75
генерализованной
Из рисунка 34 следует, что максимальный
ответ в темно-
адаптированном глазу (суммарный ответ палочек и колбочек) в правом и
левом
глазу составил 20±4 мкВ. Палочковый
ответ (рис.33.)в темно-
адаптированном правым глазу составил 15±5 мкВ, в левом 12±4 мкВ.
Волна b отражает электрическую активность биполяров и клеток
Мюллера, с возможным вкладом горизонтальных и амакриновых клеток. Из
схемы следует, что b-волна составляла правого глаза 36±4 мкВ, левого 25±3
мкВ.
Таким образом, данная электроретинограмма по классификации, в
основе которой лежат амплитудные характеристики а и b волн, является
субнормальной (по форме заболевания сетчатки – дегенеративный паттерн,
паттерн с редуцированным ответом). Функциональные показатели как а1волны (активность фотопической системы сетчатки), так и
(активность
скотопической
редуцировании
а-волны,
системы
что
сетчатки)
связано
с
а2-волны
свидетельствовали
сильным
о
поражением
фоторецепторов, особенно колбочковой системы. Время кульминации а
волны увеличено.
Сниженные показатели b волны свидетельствовало о поражении
нейронов второго порядка (биполяров, клеток Мюллера, горизонтальных и
амакриновых клеток). Стоит отметить, что на восходящем колене b –волны
отмечалось редуцирование осцилляторных потенциалов, свидетельствующих
об отсутствии импульсов (электрических потенциалов) из внутреннего
плексиформного, а также внутреннего ядерного слоя.
Отмечалось также увеличение латентного периода а и b-волн.
76
Рис. 33. Палочковый ответ правого и левого глаза (flash -2.1; 2 вспышки в 1с).
Н
Рис. 34. Палочково-колбочковый ответ в правом и левом глазу (flash 0).
77
Таблица 19
Компоненты электроретинограммы правого и левого глаза
Электроретинограмма
Правый глаз, мкВ
Левый глаз, мкВ
20± 4
20± 3
15± 5
12± 4
В –волна
36± 4
25± 3
Осцилляторные
потенциалы
2± 1
2± 1
Максимальный ответ в
темно-адаптированном
глазу (палочки и
колбочки)
Палочковый ответ в
темно-адаптированном
глазу
р0,05
На рисунке 35-36 и в таблицы 20 представлена электроретинограмма
9-летней собаки породы пудель с генерализованной прогрессирующей
атрофией сетчатки на поздней стадии. Из рисунка 36 следует, что
максимальный ответ в темно-адаптированном глазу в правым глазу составил
30±3 мкВ а в левым
38±3 мкВ. Палочковый
адаптированном правым глазу составил
ответ (рис.35.) в темно-
10±2 мкВ, в левым 8±2 мкВ.
Латентный период и время кульминации а-волны увеличены, а сама волна а
редуцирована, что свидетельствовало о сильном поражении фоторецепторов.
Время кульминации а- волны увеличено.
Из схемы следует, что b-волна составила на электроретинограмме
правого
глаза 20±5 мкВ,
левого глаза 20±3 мкВ. Снижение
b волны
показывает значительное поражение нейронов второго порядка.
На
восходящем
осцилляторных
колене
потенциалов,
b
–волны
что
отмечалось
свидетельствовало
редуцирование
о
электрических потенциалов амакриновых и биполярных клеток.
78
снижении
Таким образом, данная электроретинограмма по классификации, в
основе которой лежат амплитудные характеристики а и b волн, является
субнормальной. Латентный период а и b-волн увеличен.
Рис.35. Палочковый ответ правого и левого глаза (flash -2.1; 2 вспышки в 1с).
Рис.
36. Палочково-колбочковый ответ в правом и левом глазу (flash 0).
79
Таблица 20
Компоненты электроретинограммы правого и левого глаза
Электроретинограмма
Максимальный ответ в
темно-адаптированном
глазу
Палочковый ответ в
темно-адаптированном
глазу
В-волна
Осцилляторные
потенциалы
Правый глаз
Левый глаз
30± 3
38± 3
10± 2
8± 2
20± 5
20± 3
2± 1
2± 1
р0,05
На
рисунках
37-38
электроретинограмма
являющейся
сетчатки.
носителем
а
также
в
таблице
21
представлена
7-летней собаки породы серебристый пудель
генерализованной
прогрессирующей
Из рисунка 38 следует, что максимальный
атрофии
ответ в темно-
адаптированном глазу (палочки и колбочки) в правым и левым глазу
составил 40±5 мкВ. Палочковый ответ (рис.37.) в темно-адаптированном
правым глазу составил 15±5 мкВ, а в левым 20±5 мкВ. Время кульминации
а –волны увеличено, сама волна а редуцирована, что свидетельствовало о
сильном поражении фоторецепторов.
Волна b составила на электроретинограмме правого глаза
мкВ, левого 48± 10 мкВ. Снижение
50±10
b волны показывало значительное
поражение нейронов второго порядка. На восходящем колене b –волны
отмечалось снижение осцилляторных потенциалов до 3 (норма 5-7).
Таким образом, данная электроретинограмма по классификации, в
основе которой лежат амплитудные характеристики а и b волн, является
субнормальной. Латентный период а и b-волн увеличен.
80
Рис. 37. Палочковый ответ правого и левого глаза (flash -2.1; 2 вспышки в 1с).
Рис.38. Палочково-колбочковый ответ в правом и левом глазу (flash 0).
81
Таблица 21
Компоненты электроретинограммы правого и левого глаза
Электроретинограмма
Максимальный ответ в
темно-адаптированном
глазу
Палочковый ответ в
темно-адаптированном
глазу
В-волна
Осцилляторные
потенциалы
Правый глаз
Левый глаз
40± 5
40± 5
15± 5
20± 5
50± 10
48± 10
3± 1
3± 1
р0,05
На рисунках 39-40 а также в
электроретинограмма
таблице
22 представлена
6 месячной собаки породы бернский зененхунд с
диагнозом генерализованная прогрессирующая атрофия сетчатки средней
стадии.
Из рисунка 40 следует, что максимальный
ответ в темно-
адаптированном глазу (палочки и колбочки) составил в правым глазу 45±5
мкВ а в левым глазу составляет 50±5 мкВ. Палочковый ответ (рис.39.) в
темно-адаптированном правым глазу составил 20±5 мкВ, а в левым 25±5
мкВ. Латентный период а-волны увеличен. Время кульминации а –волны
увеличено, сама волна а снижена, что свидетельствовало о поражении
фоторецепторов.
Из схемы следует, что b-волна составила на электроретинограмме
правого глаза
150±10 мкВ, левого 170± 20 мкВ. Снижение
b волны
указывало на начинающиеся дегенеративные процессы нейронов второго
порядка. На восходящем колене b –волны отмечалось незначительное
снижение осцилляторных потенциалов.
Таким образом, данная электроретинограмма по классификации, в
основе которой лежат амплитудные характеристики а и b волн, является
субнормальной.
82
Палочковый ответ правого и левого глаза (flash -2.1; 2 вспышки в 1с).
Рис. 39. Палочковый ответ правого и левого глаза (flash -2.1; 2 вспышки в 1с).
Т
Рис. 40. Палочково-колбочковый ответ в правом и левом глазу (flash 0).
83
Таблица 22
Компоненты электроретинограммы правого и левого глаза
Электроретинограмма
Максимальный ответ в
темно-адаптированном
глазу
Палочковый ответ в
темно-адаптированном
глазу
В-волна
Осцилляторные
потенциалы
Правый глаз
Левый глаз
45± 5
50± 5
20± 5
25± 5
150± 10
170± 20
4± 1
4± 1
р0,05
Резюме
Таким образом, у животных с начальной стадией генерализованной
прогрессирующей атрофией сетчатки электроретинограмма субнормальная
и характеризуется незначительным снижением показателей а и b-волн.
Это может быть результатом начала дегенеративных процессов в
фоторецепторах.
Для средней стадии генерализованной прогрессирующей атрофии
сетчатки характерным являлось как снижение
амплитуда а-волны, с
увеличение ее латентного периода и времени кульминации. Так и
снижение b-волны, с увеличением ее латентного периода и постепенным
редуцированием осцилляторных потенциалов, связанным со снижением
активности нейронов второго порядка.
Для поздней стадии
генерализованной прогрессирующей атрофии
сетчатки, с одной стороны, характерно редуцирование
а- b волны, и
осцилляторных потенциалов. С другой стороны характерно увеличение
времени
кульминации,
и
латентного
периода
а
и
свидетельствует о поражении нейронов второго порядка и
b-волн.
Это
отсутствии
импульсов (электрических потенциалов) из внутреннего плексиформного,
84
а также внутреннего
ядерного слоя. Электроретинограмма
стадии отображает тяжелые необратимые дегенеративные
на данной
изменения в
сетчатке.
Снижение
а
и b- волн электроретинограммы,
редуцирование
осцилляторных потенциалов, пролонгированное время кульминации в
начале а –волны а в дальнейшем и b-волны характерны не только для
больных собак генерализованной прогрессирующей атрофией сетчатки а
также для носителей этого заболевания.
85
ГЛАВА VII
РЕЗУЛЬТАТЫ ГЕНЕТИЧЕСКИХ ТЕСТОВ СОБАК С
ДИАГНОЗОМ ГЕНЕРАЛИЗОВАННАЯ ПРОГРЕССИРУЮЩАЯ
АТРОФИЯ СЕТЧАТКИ
Результаты анализа полученных генетических тестов по выявлению
собак с палочко-колбочковой дегенерацией (prcd) показала, что из 19
исследованных животных (100% случаев) - 7 собак (37% случаев) явились
гомозиготными по мутантному гену, 8 собак (42% случаев) были носителями
дефектного гена, а 4 собаки
клинические
признаки
(21% случаев)
генерализованной
несмотря на выраженные
прогрессирующей
атрофии
сетчатки оказались здоровыми (таб. 23.).
Таблица 23
Результаты генетических тестов собак с генерализованной прогрессирующей
атрофией
Резуль.
анализа
Порода
Карлик.
пудель
Болен
Кол.
жив.
(абсол.
число)
Кол. жив.
(относи.
число, %)
Носитель
Кол.
Кол. жив.
жив.
(относи.
(абсол. число, %)
число)
Здоров
Кол.
жив.
(абсол.
число)
Кол. жив.
(относи.
число, %)
5
26,1
1
5,3
1
5,3
2
10,5
2
10,5
1
5,3
-
-
1
5,3
1
5,3
Мопс
-
-
-
-
1
5,3
Лабрадор
-
-
1
5,3
-
-
Англ.
спаниель
Берн.
зененхунд
Всего
жив.
-
-
1
5,3
-
-
-
-
2
10,5
-
-
19
100
19
100
19
100
Цвергшнауцер
Такса
карлик.
р0,05
86
Из 7
животных -
больных гомозиготных по мутантному аллелю
гена prcd
5 собак (26,1% случаев) принадлежали к породе карликовый
пудель, и 2 собаки (10,5% случаев) породы цверкшнауцер (рис.38., таб.23.).
11%
26%
карликовый
пудель
цверкшнауцер
Рис. 38. Структурная характеристика животных гомозиготных по
мутантному гену.
Полученные
данные, означают что, что родители ее могли быть
носителями (Аа) (рис. 39.) и тогда в будущем помете один щенок будет
обязательно больным (АА). Это первый вариант возможного исхода.
87
+
Аа + Аа
=
2 Аа + аа + АА
Рис.39. Схематическое изображение способов наследования ГПАС
(Аа- носитель дефектного гена А, аа- здоровая собака, АА- больная собака).
Во втором варианте, при получении щенка гомозиготного по
мутантному аллелю гена А\А : один из родителей больной (АА) а другой
носитель (Аа), При таком условии в помете можно ожидать двух щенков с
генерализованной прогрессирующей атрофией сетчатки (АА) (рис.40.).
+
Аа + АА
=
2 Аа + 2АА
Рис.40. Схематическое изображение способов наследования ГПАС
(Аа- носитель дефектного гена А, аа- здоровая собака, АА- больная собак).
В третьем возможном варианте когда оба родителя болеют (АА), все
щенки рождаются больными (АА). (рис.41.).
88
+
АА + АА
=
4 АА
Рис.41. Схематическое изображение способов наследования ГПАС
(Аа- носитель дефектного гена А, аа- здоровая собака, АА- больная собак).
У 8 собак (42% случаев) один ген был здоровым и один мутантный.
Эти животные, несмотря на наличие у них клинических признаков ГПАС
явились носителями. Среди этих животных 2 собаки породы црергшнауцер
(10,5% случаев), 2 собаки породы бернский зененхунд (10,5% случаев), 1
собака - карликовый пудель (5,3% случаев), 1 собака - карликовая такса
(5,3% случаев), 1 собака - лабрадор (5,3% случаев), и 1 собака - английский
спаниель (5,3% случаев) (рис.42.).
А это означает что, в помете могут рождаться здоровые, больные
животные
и
носители ГПАС. Схема возможных вариантов показана на
рисунке 43, из которого следует, что если родители - носители (Аа) носители
тогда и в помете два щенка будут носители (Аа).
Либо (рис.44.) если один из родителей
носитель (Аа) тогда 2 щенка будут носителями (Аа).
89
больной (АА) а другой
цверкшнауцер
5%
5%
бернский
зененхунд
карликовый
пудель
английский
спаниель
карликовая такса
11%
5%
11%
5%
лабрадор
Рис. 42. Структурная характеристика собак, носителей дефектного
гена.
+
Аа + Аа
=
2 Аа + аа + АА
Рис.43. Схематическое изображение способов наследования ГПАС
(Аа- носитель дефектного гена А, аа- здоровая собака, АА- больная собака).
90
+
Аа + АА
=
2 Аа + 2АА
Рис. 44. Схематическое изображение способов наследования ГПАС
(Аа- носитель дефектного гена А, аа- здоровая собака, АА- больная собак).
Как показано на таблице 23 у 4 собак (21% случаев) с клиническими
признаками ГПАС отсутствовал мутантный ген prcd, среди них были: один
карликовый пудель (5,3% случаев), один цверкшнауцер (5,3% случаев), одна
карликовая такса (5,3% случаев), и один мопс (5,3% случаев) (рис.45.).
5%
5%
5%
5%
карликовый
пудель
карликовая такса
мопс
цверкшнауцер
Рис.45. Структурная характеристика собак, у которых ген prcd отсутствовал.
91
Это означает, что родители таких собак были носителями (Аа) и
имели один здоровый и один дефектный ген. В таком помете один щенок
будет здоровым (аа) (рис.46.).
+
Аа + Аа
=
2 Аа + аа + АА
Рис.46. Схематическое изображение способов наследования ГПАС
(Аа- носитель дефектного гена А, аа- здоровая собака, АА- больная собака).
Резюме.
Таким образом, генетические исследования собак с подозрением на
ГПАС, позволяют выявлять патологию на ранней стадии, и своевременно
проводить грамотную селекционную работу.
92
ГЛАВА VIII
РЕЗУЛЬТАТЫ ГИСТОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ И МИКРОСКОПИИ
МАЗКОВ-ОТПЕЧАТКОВ СЕТЧАТКИ.
При проведении гистологического исследования в тканях сетчатой
оболочки глаза выявлены структурные изменение нейроретины, которые
представляют собой глубокий деструктивный процесс, как в самих
фоторецепторах, так и в остальных частях сетчатки.
Материалом для проведения гистологического исследования явились
глаза одной здоровой собаки (рис.47-50.) и
7 (рис. 51-56.) собак с
клиническими признаками генерализованной прогрессирующей атрофии
сетчатки.
На микрофотографиях № 47-50 представлены гистологические срезы
сетчатки, хороидеи и зрительного нерва здорового глаза.
На рисунке 48
можно увидеть собственную сосудистую оболочку с большим количеством
сосудов, между которыми рыхлая соединительная ткань. Выделяется много
меланоцитов, придающих ей черный цвет.
На микрофотографиях 49 и 50 показан гистологический срез сетчатки.
Между слоем палочковых и колбочковых клеток и биполярными клетками
отмечается наружный сетчатый слой, в котором располагаются синапсы,
связывающие эти два типа клеток. Область, содержащая синапсы между
биполярными и ганглионарными клетками, образует внутренний сетчатый
слой.
Наружная
пограничная
мембрана
представлена
комплексом
соединений между фоторецепторами и гиальными клетками сетчатки
(клетками
Мюллера).
фоторецепторных
Наружный
нейронов,
нуклеарный
внутренний
слой
нуклеарный
содержит
слой
–
тела
тела
биполярных, горизонтальных и амакриновых клеток, а слой ганглиозных
клеток – тела ганглиозных и амакриновых клеток
93
Рис.47. Обзорная микрофотография сетчатки, пигментного эпителия и
зрительного нерва. Окрашивание гематоксилин и эозин. Ок.Х10, об.Х40.
Рис.48. Обзорная микрофотография пигментного эпителия и
фоторецепторного аппарата. Окрашивание гематоксилин и эозин. Ок.Х10,
об.Х40.
94
Рис.49. Обзорная микрофотография сетчатки здоровой собаки. Окрашивание
гематоксилин и эозин. Ок.Х10, об.Х40.
Рис.50. Обзорная микрофотография сетчатки здоровой собаки. Окрашивание
гематоксилин и эозин. Ок.Х10, об.Х100.
95
При проведении гистологического исследования у животных с
диагнозом ГПАС, в тканях сетчатой оболочки глаза выявлены структурные
изменение в фоторецепторном аппарате, которые представляют собой
глубокий деструктивный процесс, как в самих фоторецепторах, так и в
остальных частях сетчатки.
Полученные
свидетельствуют,
при
что
гистологическом
деструктивный
процесс
исследовании
на
начальной
данные
стадии
характеризуется деформацией палочек и колбочек. Они выражались в
существенной потере внешних и внутренних сегментов палочек и колбочек,
сокращении количества
клеточных тел фоторецепторов (включение
внешнего ядерного слоя), распадом клеток и в конечном итоге уменьшением
их количества. Следует подчеркнуть, что на начальной стадии внутренние
слои
сетчатки
не
затронуты,
что
говорит
только
о
повреждении
фоторецепторов.
Рис.51. ГПАС начальная стадия. Деформация палочек и колбочек.
Окрашивание гематоксилин и эозин. Ок.Х10, об.Х200.
96
Рис. 52. ГПАС начальная стадия. Сокращение количества клеточных тел
фоторецепторов. Окрашивание гематоксилин и эозин. Ок.Х10, об.Х100.
Рис.53. Распад фоторецепторных клеток, уменьшение их количества.
Окрашивание гематоксилин и эозин. Ок.Х10, об.Х100.
97
Распад фоторецепторов приводит к нарушению синаптических связей
с биполярными, ганглионарными и амакриновыми клетками. Поскольку во
внутренних сетчатых слоях происходит кульминация всех интегральных
процессов, связанных со зрительным образом, и передача информации через
зрительный нерв в мозг, на средней стадии большинство нейронов,
лишившись афферентного возбуждающего сигнала, погибают.
Рис. 54. Средняя стадия ГПАС. Постепенная гибель нейронов.
Окрашивание гематоксилин и эозин. Ок.Х10, об.Х100.
В итоге на поздней стадии обменные процессы в сетчатке нарушаются,
наступает полное глиальное ее перерождение.
98
Рис. 55. ГПАС поздняя стадия. Окрашивание гематоксилин и эозин. Ок.Х10,
об.Х200.
Рис. 56. Поздняя стадия ГПАС. Атрофия большинства нейронов.
Окрашивание гематоксилин и эозин. Ок.Х10, об.Х100.
99
Резюме.
Таким образом, выявленные структурные изменения в тканях
сетчатой
оболочки
генерализованной
полностью
соответствуют
прогрессирующей
атрофии
клинической
сетчатки
и
картине
являются
морфологическим эквивалентом степени тяжести заболевания (Martin C. L.,
1999; Rathbone-Gionfrddo J., 1995).
100
ГЛАВА IX
ЛЕЧЕНИЕ ГЕНЕРАЛИЗОВАННОЙ ПРОГРЕССИРУЮЩЕЙ
АТРОФИИ СЕТЧАТКИ.
Трудность лечения
ГПАС до настоящего времени, как видно из
обзора литературы, определяется не только тяжестью заболевания, но
и
факторностью наследственных механизмов возникновения дегенеративных
процессов в сетчатке. Правильнее, по-видимому, стоило бы говорить об
улучшении
качества
жизни
заболевших
животных,
связанного
с
возможностью воспринимать окружающий мир уже у совершенно слепого
животного с одной стороны. И с другой, затормозить процессы дегенерации
сетчатки и тем самым отсрочить момент полной потери зрения связанного с
неконтролируемой дегенерацией фоторецепторов.
В связи с этим впервые нами осуществлена попытка применения в
качестве лечения препарата «Визомитин». Это
внутримитохондриальный
антиоксидант. «Визомитин» применялся по 1 капле 1-2 раза в день до
получения клинических результатов.
До начала лечения, и далее на 3, 6 и 12 месяце проводили
электороретинографическое исследование.
В
таблице
24
представлена
сравнительная
характеристика
компонентов электроретинограммы и собак с диагнозом начальная, средняя
и поздняя стадия генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки до и
после лечения.
Анализ данных по сравнительной характеристике
электроретинографии
функциональные
животных
показатели
до
и
а1-волны
после
лечения
(отображающей
показателей
показал,
что
активность
фотопической системы сетчатки), составляли до лечения на ранней стадии
40±5 мкВ, после лечения 50±3 мкВ. На средней стадии до лечения 30±5мкВ,
после лечения 35±5 мкВ. На поздней стадии, меньше 25 мкВ до лечения, а
после лечения 30±10 мкВ.
101
Активность скотопической системы сетчатки или а2-волна составляет
до лечения на ранней стадии 65±5 мкВ, после лечения75±3 мкВ. На средней
стадии до лечения 50±5 мкВ, после лечения 55±5 мкВ. На поздней стадии до
лечения меньше 35 мкВ, после лечения 40±10 мкВ.
Волна b представлена двумя волнами b1 b2. Волна b1 составляет до
лечения на начальной стадии 190±5 мкВ, после лечения 200±5 мкВ,
на
средней стадии до лечения 150±20 мкВ, после лечения 155±5 мкВ, а на
поздней стадии до лечения 20±15 мкВ, так как после лечения 25±10 мкВ.
Волна b2 составляет до лечения на начальной стадии 220±5мкВ, после
лечения 230±5 мкВ, на средней стадии до лечения 170±20 мкВ, после лечения
175±5 мкВ, а на поздней стадии до лечения 40±10 мкВ, так как после лечения
45±10 мкВ.
На восходящем колене b-волны в норме отмечается 5-7 волн,
называемых осцилляторными потенциалами, которые отражают клеточные
процессы, происходящие во внутренних плексиформных и внутренних
ядерных слоях, в особенности ответ амакриновых и биполярных клеток. На
начальной стадии генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки до
лечения и после лечения количество осцилляторных потенциалов снижается
незначительно, либо вообще их количество не изменяется. На средней стадии
количество осцилляторных потенциалов до и после лечения составляет 3
волны, а на поздней 2 или вообще отсутствуют.
102
Таблица 24
Сравнительная характеристика компонентов электроретинограммы
контрольной и опытной групп собак
Стадия
Начальная
заболевания
До
Компоненты
Средняя стадия
стадия
После
До
Поздняя стадия
После
До
После
лечения лечения лечения лечения лечения лечения
ЭРГ
а-волна
(Максимальный ответ в темно-адаптированном глазу, суммарный ответ палочек и
колбочек)
а1-волна, мкВ
40±5
50±3
30±5
35±5
≤25
30±10
а2-волна, мкВ
65±5
75±3
50±5
55±5
≤35
40±10
b-волна
b1-волна, мкВ
190±5
200±5
150±20
155±5
20±10
25±10
b2-волна, мкВ
220±5
230±5
170±20
175±5
40±10
45±10
5±1
5
3±1
3±1
2±1
2±1
Наличие
осцилляторных
потенциалов
Всего
8
17
20
животных
р0,05
В
качестве
примера
электроретинографических
рассмотрим
исследовании
сравнительные
собак
с
результаты
генерализованной
прогрессирующей атрофией сетчатки до и после применения «Визометина»
(рис. 57-62.).
103
Рис.57. Палочковый ответ правого и левого глаза (flash -2.1; 2 вспышки в 1с)
до и после применения препарата «Визометин» (черная линия- схема
электроретинораммы до применения препарата «Визометин», красная линия
– схема электроретинограммы после применения «Визометина»).
Рис.58. Палочково-колбочковый ответ в правом и левом глазу (flash 0) до и
после применения препарата «Визометин» (черная линия- схема
электроретинораммы до применения препарата «Визометин», красная линия
– схема электроретинограммы после применения «Визометина»).
104
Рис.59. Палочковый ответ правого и левого глаза (flash -2.1; 2 вспышки в 1с)
до и после применения препарата «Визометин» (черная линия- схема
электроретинораммы до применения препарата «Визометин», красная линия
– схема электроретинограммы после применения «Визометина»).
Рис.60. Палочково-колбочковый ответ в правом и левом глазу (flash 0) до и
после применения препарата «Визометин» (черная линия- схема
электроретинораммы до применения препарата «Визометин», красная линия
– схема электроретинограммы после применения «Визометина»)
105
Рис.61. Палочковый ответ правого и левого глаза (flash -2.1; 2 вспышки в 1с)
до и после применения препарата «Визометин» (черная линия- схема
электроретинораммы до применения препарата «Визометин», красная линия
– схема электроретинограммы после применения «Визометина»).
Рис.62. Палочково-колбочковый ответ в правом и левом глазу (flash 0) до и
после применения препарата «Визометин» (черная линия- схема
электроретинораммы до применения препарата «Визометин», красная линия
– схема электроретинограммы после применения «Визометина»).
106
БЛИЖАЙШИЕ И ОТДАЛЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ЛЕЧЕНИЯ
ГЕНЕРАЛИЗОВАННОЙ ПРОГРЕССИРУЮЩЕЙ АТРОФИИ
СЕТЧАТКИ У СОБАК
Эффективность проводимого лечения оценивали
у 8 собак (18%
случаев) с начальной стадией ГПАС, 17 собак (37% случаев) со средней
стадией заболевания и 20 собак (45%) с поздней стадией, через 3 месяца, 6
месяцев и год. Полученные результаты сравнивали с результатами 14 собак
(100%) контрольной группы, у которых препарат «Визомитин» не
применялся. При повторном приеме проводили общий и офтальмический
осмотр животного. Использовались субъективные методы исследования
состояния сетчатки: мигательный рефлекс, тест с лабиринтом, тест с
шариком ваты, а также объективные методы исследования состояния
сетчатки, включающие электроретинографию, ретинофотографию,
В таблицах 25-27 и
на рисунках 63-65 показана эффективность
проводимого лечения.
Как видно из таблицы 25 и рисунка 63 через 3 месяца применения
препарата «Визомитин» положительная динамика отмечалась на начальной
стадии у 2 животных (4,4% случаев)
опытной группы, по сравнению с
группой контроля, в которой не отмечалось улучшении.
При
обследовании
пациентов
через
6
месяцев
применения
«Визомитина» положительная динамика отмечалась на начальной стадии у 4
животных (8,8 % случаев), в группе контроля у 1 собаки (7,1% случаев).
Через 1 год применения препарата
«Визомитин» положительная
динамика отмечалась на начальной стадии у 6 животных (13,3 % случаев), в
группе контроля у 1 собаки (7,1% случаев).
107
Таблица 25
Эффективность применения препарата «Визомитин» у собак с ГПАС на
начальной стадии
Колич.
жив.
Контрольная группа
(без прим.
«Визомитина»)
Начальная стадия
(прим.
«Визомитина»)
Количество
животных в
абсолютных
величинах
Количество
животных в
относительных
величинах %
Количество
животных в
абсолютных
величинах
Количество
животных в
относительных
величинах %
Через 3
мес.
-
-
2
4,4
Через 6
мес.
Через 1
год.
Всего
животных
1
7,1
4
8,8
1
7,1
6
13,3
4
28,6
8
18
Срок
прим.
р≤0,05
14%
12%
10%
8%
6%
контрольная группа
4%
опытная группа
2%
0%
через 3 месяца
через 6 месяцев
через 1 год
Рис.63. Структурная характеристика собак с ГПАС на начальной стадии и
собак опытной группы.
108
В таблице
25
и рисунке 64 показана эффективность проводимого
лечения на средней стадии. Как видно из таблицы через 3 месяца применения
препарата «Визомитин» положительная динамика отмечалась на средней
стадии у 2 собак (4,4 % случаев).
При
обследовании
пациентов
через
6
месяцев
применения
«Визомитина» положительная динамика отмечалась у 8 животных (17,8 %
случаев).
Через 1 год применения препарата
«Визомитин» положительная
динамика отмечалась на средней стадии у 14 животных (31,1 % случаев), по
сравнению с группой контроля - 1 собака (7,1% случаев).
Таблица 25
Эффективность применения препарата «Визомитин» у собак с ГПАС на
средней стадии
Колич.
жив.
Контрольная группа
(без прим.
«Визомитина»)
Средняя стадия
(прим.
«Визомитина»)
Количество
животных в
абсолютных
величинах
Количество
животных в
относительных
величинах %
Количество
животных в
абсолютных
величинах
Количество
животных в
относительных
величинах %
Через 3
мес.
-
-
2
4,4
Через 6
мес.
-
-
8
17,8
Через 1
год.
1
7,1
14
31,1
Всего
животных
5
35,7
16
37
Срок
прим.
р≤0,05
109
35%
30%
25%
20%
15%
контрольная группа
10%
опытная группа
5%
0%
через 3 месяца
через 6
месяцев
через 1 год
Рис.64. Структурная характеристика собак с ГПАС на средней стадии и
собак контрольной группы.
В таблице 26 и на рисунке 65
показана эффективность применения
препарата «Визомитин» на поздней стадии в опытной группе с сравнению с
группой контроля, в которой не применялся этот препарат.
Как видно из таблицы
26 через 3 месяца применения препарата
«Визомитин» положительная динамика отмечалась у 1 собаки (2,2 %
случаев).
При
обследовании
пациентов
через
6
месяцев
применения
«Визомитина» положительная динамика отмечалась у 5 животных (11,1 %
случаев) в опытной группе. Так, как в группе контроля не отмечалось
положительных результатов.
Через 1 год применения препарата
«Визомитин» положительная
динамика отмечалась на поздней стадии у 10 животных (22,2% случаев)
опытной группы. Так, как в группе контроля не отмечалось положительных
результатов.
110
Таблица 26
Эффективность применения препарата «Визомитин» у собак с ГПАС на
поздней стадии
Колич.
жив.
Срок
прим.
Контрольная группа
(без прим.
«Визомитина»)
Количество
Количество
животных в
животных в
абсолютных относительных
величинах
величинах %
Поздняя стадия
(прим.
«Визомитина»)
Количество
Количество
животных в
животных в
абсолютных относительных
величинах
величинах %
Через 3
мес.
-
-
1
2,2
Через 6
мес.
-
-
5
11,1
Через 1
год.
-
-
10
22,2
Всего
животных
5
35,7
20
45
р≤0,05
25%
20%
15%
10%
контрольная группа
5%
опытная группа
0%
через 3
месяца
через 6
месяцев
через 1 год
Рис.65. Структурная характеристика собак с ГПАС на поздней стадии и
собак контрольной группы.
111
Резюме
Результаты исследования эффективности применения препарата
«Визомитин» показали достоверное
улучшение средних показателей в
опытной группе пациентов (p<0,05) на начальной, средней и поздней стадии
ГПАС по сравнению с контрольной группой. Таким образом,
своевременном начатом
лечении существует возможность затормозить
процессы дегенерации сетчатки и тем самым
потери
зрения
при
связанного
с
отсрочить момент полной
неконтролируемой
фоторецепторов.
112
дегенерацией
ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
Среди заболеваний, ведущих к стойкому снижению зрительных
функций и слепоте у собак, генерализованная прогрессирующая атрофия
сетчатки занимает одно из лидирующих положений в мире (Maggs D.J.,
Miller P.E., Ofri R., 2009).
Генерализованная прогрессирующая атрофия сетчатки у собак это
унаследованная, двусторонняя патология, начинающаяся в сенсорной
сетчатке (палочки, колбочки) с последующем вовлечением нейрональной
сетчатки, что приводит к ее полной деафферентации. Степень тяжести
процесса и потери зрения зависит от породы и возраста собаки (Aguirre G.,
1984; Acland G., Aguirre G., 1987; Barnett K.S., 2003; Larska М., 2003; Martin
Charles L., 2005).
История проблемы прогрессирующей атрофии сетчатки берет начало в
1911 году когда то Hilding Magnusson впервые описал это заболевание у
шотландских
сеттеров..
офтальмоскопических
Учитывая
данных,
многообразие
прогрессирующая
клинических
атрофия
и
сетчатки
описывалась в зарубежной и отечественной литературе под различными
терминами. Признак был назван retinitis pigmentoza (пигментозный ретинит)
из-за своего подобия с наследуемой дегенерации сетчатки у человека (Kijas
J.W., Cideciyan A.V., 2002;
Hamel C., 2006; Zangerl B., 2006). Позднее
заболевание получило название «прогрессирующая атрофия сетчатки»,
отображаемое аббревиатурой PRA в ветеринарной и гуманной медицине, и
стало регистрироваться во многих частях света у нескольких пород
животных. К настоящему времени ветеринарные офтальмологи пришли к
единому мнению, что все эти виды патологии - проявление одного
заболевания, которое в настоящее время в мировой литературе чаще
обозначают, как генерализованная прогрессирующая атрофия сетчатки
(ГПАС) для дифференциации от центральной прогрессирующей атрофии
сетчатки (ЦПАС). Генерализованную прогрессирующую атрофию сетчатки
113
со временем разделили на ряд самостоятельных патологий, в первую очередь
поражающих фоторецепторы, и классифицировали их как дисплазии, или
дегенерации. Классификация дистрофии сетчатки связана с возрастом
животного и характером поражения палочек или колбочек (Acland G., 1987;
Petersen-Jones S., 2005; Pitts R., 2003).
В последние годы увеличение диагностического потенциала и
генетические исследования позволили по-новому оценить этиологию,
патогенез и клинику ГПАС. Поскольку причиной заболевания является
мутация гена отвечающего за нормальное функционирование рецепторов
сетчатки, идентификация генов, ответственных за развитие ГПАС, должна
помочь в понимании развития патологического процесса и обеспечении
развития правильных подходов в диагностике и профилактике (Dekomien G.,
Epplen J.T., 2002; Maubaret C., 2005; Zangerl B., 2006).
Цель нашего исследования - изучить диагностику, дать
морфологическую
и
электроретинографическую
клинико-
характеристику
генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки у собак.
Основной
признаков
задачей нашей работы являлось изучение целого ряда
характеризующих
больных
прогрессирующей атрофией сетчатки.
зрения
встречается
у
с
генерализованной
Учитывая, что патология органа
животных
принадлежащих к обоим полам,
собак
для
различных
возрастных
групп,
проведения исследования была
отобрана группа животных в количестве 45 собак в возрасте от 6
месяцев до 13 лет, поступивших в клинику МГАВМиБ им. К.И.Скрябина
с клиническими признаками генерализованной прогрессирующей атрофии
сетчатки.
Все
животные принадлежали
частным
лицам,
условия
кормления и содержания были сходными.
Работа
представляет
электроретинографическое
офтальмическими
методами
клинико-морфологическое,
исследование,
использовали
в
котором
наряду
и
с
электроретинографическое,
ретинофотограчическое исследования а также ДНК-маркерные тесты. В
114
качестве
дополнительных
методов
использованы
биохимические
и
морфологические методы исследования.
Перед
обследованием
животного
с
подозрением
на
прогрессирующую атрофию сетчатки от владельцев собирались данные о
содержании, кормлении, о времени появления патологических изменений и
наличии повторных случаев, темпе нарастания и стихания клинических
признаков,
а
также
о
проводимых
ранее
лечебных
мероприятиях.
Исследования общего состояния, морфологического состава крови, изменения
температуры тела, частоты пульса
и дыхания
проводилось
по
общепринятым методикам.
Изучалось отношение животных к окружающей обстановке, у собак
изучались поведенческие симптомы, мигательный рефлекс, зрачковый
рефлекс, проводятся тесты с лабиринтом и шариком выты. Оценивалась
симметрия морды и расстояние между глазами, положение и размер глазного
яблока, взгляд и движение глаза.
Исследования проведены в группе 45 собак с подозрением на
генерализованную прогрессирующую атрофию сетчатки. Изучая характер
течения генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки у собак,
выявлено 8 собак (18% случаев) с начальной стадией ГПАС, 17 собак (37%
случаев) со средней стадией заболевания и 20 собак (45%) с поздней стадией.
Основной задачей 1-ой главы явилось изучение распространения и
факторов риска возникновения генерализованной прогрессирующей атрофии
сетчатки у собак.
Клиническим
обоснованием
развития
генерализованной
прогрессирующей атрофии сетчатки у собак являются следующие факторы
риска: порода, возраст животного, пол, тип наследования.
Установлена корреляция между возрастными параметрами животного
и количеством заболевших собак. Генерализованная прогрессирующая
атрофия сетчатки чаще встречается у собак в возрасте от 3 до 6 лет, а также
от 7 до 9 лет.
115
Результаты нашего
исследования
показали,
что
чаще
всего
генерализованную прогрессирующую атрофию сетчатки диагностировали у
таких пород как: карликовый пудель (12 собак – 29% случаев), лабрадор (6
собак – 13% случаев),
цверкшнауцер (5 собак
– 11% случаев),
американский кокер спаниель (3 собаки – 6,5% случаев), такса (3 собаки –
6,5% случаев), бернский зененхунд (3 собаки – 6,5% случаев), менее
распространено у щи-тцу (2 собаки – 4,5% случаев), шотландской овчарки (2
собаки – 4,5% случаев) и шпица (2 собаки – 4,5% случаев). Полученные
нами результаты согласуются с данными Parkes J., Aguirre G., Rockey J.,
Liebman P., 1982; Acland G., 1988; Barnett К., 1965; Larska M., 2003; Martin
Charles L., 2005).
Кроме того выявлена корреляционная
зависимость
изменения в
поведении животного, электроретинографических показателей, а также
появлении первых диагностических клинических признаков заболевания.
Аутосомно-рецессивный
наследования,
и
аутосомно-доминантный
способ
встречался у собак обоих полов, практически с равной
частотой, однако с Х - хромосомным типом наследования чаще встречался
у самок , что подтверждают и другие авторы Donald J., 1990; Hardcastle A.J.,
2000; Hamel C., 2006; Ott J., Bhattacharya S., Chen J.D., Denton M.J., Donald J.,
Dubay C., Farrar G.J., Fishman G.A., Frey D., Gal A., 1990; Hardcastle A.J.,
Thiselton D.L., Zito I., Ebenezer N., Mah T.S., Gorin M.B., Bhattacharya S.S.,
2000; Hamel C., 2006).
Динамические наблюдения позволили впервые изучить особенности
клинических проявлений генерализованной прогрессирующей атрофии
сетчатки на разных стадиях заболевания. Выявлено, что самым ранним
морфологическим
признаком
ГПАС
является
изменение
формы
и
уменьшение количества фоторецепторных клеток особенно в области диска
зрительного нерва. К этому же выводу пришли Parry H.B., 1984; Galibert F.,
2004; Aguirre G., Lades A., 1976. В этой стадии офтальмоскопическое
исследование
малоинформативно,
поэтому
116
она
чаще
протекает
незамеченной.
Поэтому
электроретинография
и
на
начальной
генетические
стадии
тесты
показано,
являются
что
наиболее
информативными методами диагностики, так как типичных признаков на
глазном дне на данной стадии не отмечается.
Изменения на глазном дне можно обнаружить на следующей стадии, в
момент увеличения отражательной способности тапетальной части глазного
дна и ослабления сосудистого рисунка (Aguirre G., Rubin L., 1971; Barnett К.,
1965; Heywood R., 1970; Millichamp N., 1988; O'Toole D., 1984; Wilcock В.,
1983; Dziezyc J., 2007). Начинается ГПАС с никталопии- животное плохо
видело в темное время суток (ночью), особенно это было заметно при
попадании собаки в незнакомую обстановку. Изучая клиническую картину
умеренной (средней) ГПАС, нами выявлены незначительные демаркационные
изменения окраски тапетума. Сосудистая сеть в этих случаях была
значительно ослаблена в пораженных зонах, особенно на периферии.
Гиперрефлекторность
зависела
от
освещения.
Так
при
прямой
офтальмоскопии она различалась от неотчетливой до ярко выраженной. На
нетапетальном
участке
выявлялось
незначительное
уменьшение
пиг-
ментации. Изменения диска зрительного нерва были выражены слабо.
На поздней стадии ГПАС характерным являлось расширение зрачка и
увеличение отражательной способности тапетум (при осмотре, глаза
казались, "серебристыми" или "желтыми"). Одновременно уменьшались
сосуды сетчатки в количестве и величине.. Истончение сосудов сетчатки, по
видимому связано с
истощением сетчатки. Дегенерация фоторецепторов
происходила задолго до того, как происходили изменения со стороны
сосудов.
Изменения сосудов приводили к атрофическим и дегенеративным
изменениям диска зрительного нерва. Они могли проявляться в виде
побледнения диска зрительного нерва, либо приобретали другие изменения
связанные с изменением окраски вокруг зрительного нерва, потерей миелина
или его откладывание в больших количествах. Зрительная атрофия являлась
117
поздним признаком, и представлялась беловато-серым диском с зубчатыми
краями, чашеобразной формы. Очень часто на поздних стадиях мы могли
увидеть ярко выраженные сосуды хороидеи.
В
дальнейшем
пигментированные
на
нетапетальной
или
части
сетчатки
непигментированные
появлялись
участки-
глыбки.
Генерализованная депигментация встречалась чаще.
Вторичная
катаракта как на поздних стадиях развития болезни
проявлялась в виде радиальных, спицеобразных помутнений от экватора к
центру хрусталика (кортикальная катаракта). По мнению многих авторов
(Martin Charles L., 2005; Мaggs М., Miller L., Ofri R., Garncarz J., 2008) она
обусловлена
повреждением хрусталика,
токсическими веществами
выделяемыми из поврежденной сетчатки. Одним из таких веществ является
докозагексаеновая
кислота,
высвобождаемая
из
наружного
сегмента
фоторецепторов. Эта кислота подвергается аутооксидаций в малоальдегид и
липидные радикалы, которые и являются
причиной возникновения
катаракты.
Таким
образом,
клиническое
прогрессирующей атрофии сетчатки
проявление
генерализованной
у собак многообразно,
частота
выявления данного заболевания пропорциональна его степени тяжести. Ее
объективными диагностическими симптомами являются: куриная слепота,
мидриаз, гиперрефлекторность, ослабление сосудистого рисунка, изменение
окраски глазного дна, гипер- или депигментация тапетум нигрум, вторичная
катаракта.
Целью изучения главы
V явилось определение содержания
свободных гормонов щитовидной железы, что
функциональной
активности
щитовидной
является лучшей оценкой
железы,
а
также
анализ
результатов морфологического и биохимического состава крови собак с
ГПАС.
Анализ
результатов
исследования
морфологического
и
биохимического состава крови не выявил отклонении от физиологической
118
нормы. Таким образом, данные показатели не являются значимыми в
диагностике исследуемого заболевания. Полученные результаты согласуются
с данными Parkes J., Aguirre G., Rockey J., Liebman P., 1982; Acland G., 1988;
Barnett К., 1965; Larska M., 2003; Martin Charles L., 2005.
Результаты
исследования
концентрации
гормонов
щитовидной
железы (трийодтиронина и тироксина) в крови собак с диагнозом
генерализованная прогрессирующая атрофия сетчатки показаны в таблице 7,
из которой следует, что из 19 исследуемых животных (100% случаев) у 10
животных
(52,6%
случаев),
выявлено
снижение
общего
количества
трийодтиронина (Т3) до 0,9 ±0,1 nmol/l, а также тироксина (Т4) до 24,2±0,4
nmol/l: из них 3 самца (15, 8 % случаев) и 7 самок (36,8% случаев).
Такой
больший риск возникновения заболевания у самок мы
связываем с проведением у этих животных гистеровариоэктомии. Важно
также подчеркнуть, что такие породы собак, как
пудели, таксы
кокер-
спаниели, золотистые ретриверы, ирландские сеттера, староанглийская и
шотландская овчарки имеют повышенный риск развития гипотиреоза,
особенно в среднем возрасте (2-6 лет). А у некоторых цверкшнауцеров
отмечается врожденный вторичный гипотиреоз, вследствие недостатка
тиреотропного гормона (Гофф А., Томас А., 2005).
В связи с этим, изменение гормонального фона у опытных животных,
скорее всего не является диагностическим маркером, указывающим на
наличие генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки. Наши
исследования нашли подтверждение в работах Patterson D.F., 2000; Galibert
F.2004; Maubaret C., 2005; Aguirre G.D., Acland G.M., 2006.
Большое
распространение
в
диагностике
генерализованной
прогрессирующей атрофии собак получили электрофизиологические методы
исследования.
Поскольку
фоторецепторы
сетчатки
участвуют
в
фототрансдукции, нарушение даже одного из звеньев электрогенеза сетчатки
приводит к патологической электроретинограмме и нарушению передачи
119
информации в центральные отделы зрительной системы (Шамшинова А.М.,
2006; Островский М.А.,1992).
Комплексная
определяемая
вместе с
оценка
функционального
состояния
сетчатки,
субъективными и объективными методами исследования,
детализированным описанием клинической картины на каждой
стадии заболевания генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки у
собак является базовой в прогнозировании течения и исхода заболевания.
Нарушение нормального физиологического состояния сетчатки,
изменение
одного
возникновении
из
многочисленных
электроретинограммы,
факторов,
предопределяют
участвующих
в
изменение
ее
амплитуды. Электроретинограмма изменяется в зависимости от тяжести и
распространения патологического процесса, а также от длительности его
течения.
Основой
этого
метода
являлась
регистрация
и
анализ
электроретинограммы в различных условиях световой стимуляции и
адаптации при варьировании размера, формы, длительности и частоты
стимулов, длины волны и интенсивности световых вспышек а также фона
(Gouras P., 1970; Rubin L., 1975; Alligood J., O'Brien P., Buyukmihci N., 1982;
Sandberg M., Pawlyk B., Berson E., 1986; Xu X., Karwoski C.J., 1993; Bush
R.A., Sieving P.A., 1994; Narfstrom K., Wrigstad A., Ekesten B., Nilsson S.E.,
1994; Aguirre G., Acland G., Zangerl B., Goldstein O., Pearce-Kelling S., Felix J.,
Sidjanin D.J., 2007; Marmor M.F., Fulton A.B., 2009).
Таким образом, у животных с начальной стадией генерализованной
прогрессирующей атрофией сетчатки электроретинограмма субнормальная и
характеризуется незначительным снижением показателей а и b-волн. Это
может
быть
результатом
начала
дегенеративных
процессов
в
фоторецепторах.
Для средней стадии генерализованной прогрессирующей атрофии
сетчатки характерным являлось как снижение
амплитуда а-волны, с
увеличение ее латентного периода и времени кульминации. Так и снижение
120
b-волны,
с
увеличением
ее
латентного
периода
и
постепенным
редуцированием осцилляторных потенциалов, связанным со снижением
активности нейронов второго порядка.
Для поздней стадии
генерализованной прогрессирующей атрофии
сетчатки, с одной стороны, характерно редуцирование
а- b волны,
осцилляторных потенциалов. С другой стороны характерно
времени
кульминации,
и
латентного
периода
а
и
и
увеличение
b-волн.
свидетельствует о поражении нейронов второго порядка и
Это
отсутствии
импульсов (электрических потенциалов) из внутреннего плексиформного, а
также внутреннего ядерного слоя. Электроретинограмма на данной стадии
отображает тяжелые необратимые дегенеративные изменения в сетчатке.
Снижение
а
и b- волн электроретинограммы,
редуцирование
осцилляторных потенциалов, пролонгированное время кульминации в начале
а –волны а в дальнейшем и b-волны характерны не только для больных собак
генерализованной прогрессирующей атрофией сетчатки а также для
носителей этого заболевания.
Основной задачей главы VII явился анализ полученных результатов
генетических тестов. В последние годы
диагностический потенциал и
генетические исследования позволили по-новому оценить этиологию,
патогенез и клинику генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки у
собак.
Однако,
на
генетический
сегодняшний
анализ,
день
доступным
выявляющий
является
только
палочково-колбочковую
прогрессирующую атрофию сетчатки (prcd) (Patterson D.F., 2000; Lange K.,
Cantor R., Horvath S., Perola M., Sabatti C., Sinsheimer J., Sobel E., 2001;
Galibert F., Andre C., Hitte C.,2004; Maubaret C., Hamel C., 2005; Aguirre G.D.,
Acland G.M., 2006).
Причиной генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки у
собак является мутация гена отвечающего за нормальное функционирование
рецепторов сетчатки.
палочково-колбочковой
Идентификация генов, ответственных за развитие
генерализованной
121
прогрессирующей
атрофии
сетчатки у собак, должна помочь в понимании развития патологического
процесса и обеспечении развития правильных подходов в диагностике и
профилактике этой патологии.
Проведение
генетических
тестов
в
комплексе
с
другими
объективными и субъективными методами исследования сетчатки делает
возможным не только
выявление патологии на ранней стадии, но
и
своевременное проведение грамотной селекционной работы.
С учетом наследственного генеза генерализованной прогрессирующей
атрофии сетчатки
проявлений
не
задача диагностики ее многочисленных клинических
может
быть
решена
без
анализа
структурного
и
функционального состояния сетчатки на разных этапах патологического
процесса. Полученные результаты являются базовыми в расшифровке
механизма
и
характера
прогрессирующей
поражения
атрофии
сетчатки
сетчатки
у
при
собак
генерализованной
и
при
диагностике
доклинической стадий заболевания.
При проведении гистологического исследования у животных с
диагнозом ГПАС, в тканях сетчатой оболочки глаза выявлены структурные
изменение в фоторецепторном аппарате, которые представляют собой
глубокий деструктивный процесс, как в самих фоторецепторах, так и в
остальных частях сетчатки.
Полученные
свидетельствуют,
при
что
гистологическом
деструктивный
исследовании
процесс
на
данные
начальной
стадии
характеризуется деформацией палочек и колбочек. Они выражались в
существенной потере внешних и внутренних сегментов палочек и колбочек,
сокращении количества
клеточных тел фоторецепторов (включение
внешнего ядерного слоя), распадом клеток и в конечном итоге уменьшением
их количества. Следует подчеркнуть, что на начальной стадии внутренние
слои
сетчатки
фоторецепторов.
синаптических
не
затронуты,
Распад
что
говорит
фоторецепторов
только
приводит
о
повреждении
к
нарушению
связей с биполярными, ганглионарными и амакриновыми
122
клетками.
Поскольку
во
внутренних
сетчатых
слоях
происходит
кульминация всех интегральных процессов, связанных со зрительным
образом, и передача информации через зрительный нерв в мозг, на средней
стадии большинство нейронов, лишившись афферентного возбуждающего
сигнала, погибают.
В итоге на поздней стадии обменные процессы в сетчатке нарушаются,
наступает полное глиальное ее перерождение.
Таким образом, выявленные структурные изменения в тканях сетчатой
оболочки полностью соответствуют клинической картине генерализованной
прогрессирующей
атрофии
сетчатки
и
являются
морфологическим
эквивалентом степени тяжести заболевания (Martin C. L., 1999; RathboneGionfrddo J., 1995).
Трудность лечения ГПАС до настоящего времени, как видно из обзора
литературы, определяется не только тяжестью заболевания, но
и
факторностью наследственных механизмов возникновения дегенеративных
процессов в сетчатке. Правильнее, по-видимому, стоило бы говорить об
улучшении
качества
жизни
заболевших
животных,
связанного
с
возможностью воспринимать окружающий мир уже у совершенно слепого
животного с одной стороны. И с другой, затормозить процессы дегенерации
сетчатки и тем самым отсрочить момент полной потери зрения связанного с
неконтролируемой дегенерацией фоторецепторов.
В
последние
связывающие
годы
в
дегенеративные
научной
литературе
процессы
в
появились
сетчатке
и
данные,
дисфункцию
митохондрий (Скулачев В.П., 2005; 2007). Анализ этих работ позволил
сделать вывод о том, что применение митохондриальных антиоксидантов
может оказать позитивное действие в терапии ретинопатии. Это и явилось
причиной для изучения в условиях клиники терапевтической эффективности
и проведения клинико-диагностических исследований глазных капель
«Визомитин» на основе препарата SKQ 1, разработанного в разработанного в
123
Институте физико-химической биологии им. А.Н.Белозерского МГУ под
руководством академика В.П. Скулачева.
Этот препарат по своему действию является митохондриальным
антиоксидантом, т.е. обладает способностью снижать уровень свободных
радикалов произведенных митохондриями во всех типах клеток.
В связи с этим впервые нами осуществлена попытка применения в
качестве лечения препарата «Визомитин». «Визомитин» применялся по 1
капле 1-2 раза в день до получения клинических результатов.
Эффективность проводимого лечения оценивали
у 8 собак (18%
случаев) с начальной стадией ГПАС, 17 собак (37% случаев) со средней
стадией заболевания и 20 собак (45%) с поздней стадией, через 3 месяца, 6
месяцев и год. Полученные результаты сравнивали с результатами 14 собак
(100%) контрольной группы, у которых препарат «Визомитин» не
применялся. При повторном приеме проводили общий и офтальмический
осмотр животного. Использовались субъективные методы исследования
состояния сетчатки: мигательный рефлекс, тест с лабиринтом, тест с
шариком ваты, а также объективные методы исследования состояния
сетчатки, включающие электроретинографию, ретинофотографию.
Результаты
исследования
эффективности
«Визомитин» показали достоверное
применения
препарата
улучшение средних показателей в
опытной группе пациентов (p<0,05) на начальной, средней и поздней стадии
ГПАС по сравнению с контрольной группой. Таким образом,
своевременном начатом
лечении существует возможность затормозить
процессы дегенерации сетчатки и тем самым
потери
зрения
при
связанного
с
отсрочить момент полной
неконтролируемой
фоторецепторов.
124
дегенерацией
ВЫВОДЫ
1.
Представлена клинико-морфологическая и электроретинографическая
характеристика генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки, при
этом показано, что данная офтальмопатия начинается
изменениями,
дегенеративными
в сенсорной сетчатке (палочки, колбочки) с последующем
вовлечением
нейрональной
деафферентацией.
возникновения
сетчатки,
Клинически
заболевания
и
заканчивается
обоснованными
являются:
порода,
полной
факторами
пол,
ее
риска
возраст,
тип
наследования.
2.
Электроретинография, ретинофотография, офтальмоскопия являются
основными
объективными
методами
диагностики
генерализованной
прогрессирующей атрофии сетчатки у собак, позволяющие определить
критерии морфофункционального состояния сетчатки при данной патологии.
Установленная
корреляционная
электроретинографии,
зависимость
ретинофотографии
между
позволила
показателями
классифицировать
заболевание на три стадии: начальную, среднюю и позднюю.
3.
На
основании
выявленных
клинико-офтальмологических
и
функциональных параллелей определены дифференциально-диагностические
клинические критерии легкой, средней и тяжелой степеней тяжести
генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки у собак: никталопия
(100% случаев- средняя и поздняя стадия), гиперрефлекторность (58,8%
случаев- средняя стадия, 100% случаев- поздняя), истощение
сосудов
сетчатки (100% случаев- средняя и поздняя стадия), уменьшение количества
сосудов сетчатки (25% случаев – начальная стадия, 17,6% случаев- средняя,
100% случаев- поздняя),
побледнение
диска зрительного нерва (47%
случаев- средняя стадия, 80% случаев – поздняя), пятна на нетапетальной
части глазного дна (5,7% случаев- средняя стадия, 60% случаев- поздняя),
появление
пигментированных и депигментированных участков (11,7 %
125
случаев- средняя стадия, 75% случаев- поздняя), вторичная катаракта (65%
случаев – поздняя стадия).
4.
Гематологическая картина и биохимический анализ сыворотки крови
начальной,
средней и тяжелой
степени тяжести генерализованной
прогрессирующей атрофии сетчатки не отличается от показателей группы
контроля.
5.
Выявленное снижение
количества трийодтиронина
у 10 животных (52,6% случаев), общего
(Т3) до 0,9 ±0,1
тироксина (Т4) 24,2±0,4 nmol/l
nmol/l,
р≤ 0,05 а также
р≤ 0,05. не является диагностическим
маркером, указывающим на наличие генерализованной прогрессирующей
атрофии сетчатки
поскольку существует повышенный риск
развития
гипотиреоза у этих пород, особенно в среднем возрасте (2-6 лет).
6.
Морфологическим эквивалентом начальной стадии генерализованной
прогрессирующей атрофии сетчатки у собак является деформация палочек и
колбочек, распад клеток и в конечном итоге уменьшение их количества.
Внутренние
слои сетчатки вначале не затронуты, что говорит о
первоначальном повреждении фоторецепторов. На средней стадии гибель
нейронов, компенсируемая гипертрофией клеток Мюллера, что затрудняет
доступ сетчатки к хориоидее. В итоге на поздней стадии это приводит к
нарушению
процессов
метаболизма
в
сетчатке
и
ее
глиальному
перерождению.
7.
Применение
умеренной
препарата «Визомитин» целесообразно в начальной и
стадии
ГПАС.
Достоверное
изменение
показателей
электроретинограммы происходило у молодых животных через 6 месяцев
после применения глазных капель. Через 3 месяца применения препарата
«Визомитин» положительная динамика отмечалась на начальной и средней
стадии 4,4% случаев, на поздней стадии 2,2 % случаев. При обследовании
пациентов через 6 месяцев положительная динамика отмечалась на
126
начальной стадии в 8,8 % случаев, на средней 17,8 % случаев, а на поздней
11,1 % случаев. Через 1 год применения положительная динамика отмечалась
на начальной стадии в 13,3 % случаев, на средней стадии 31,1 % случаев, на
поздней стадии 22,2% случаев.
РЕКОМЕДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ
1. Представленные данные о клинической картине, диагностике,
морфологии и лечении генерализованной прогрессирующей атрофии
сетчатки у собак, являются фундаментальными для дифференциальной
диагностики и прогноза течения заболевания.
2. Целесообразно проводить полноценное обследование животных с
использованием офтальмоскопии, фундускопии и электроретинографии для
достоверной интерпретации структурных и функциональных изменений в
тканях сетчатки.
3. Рекомендуется
ежегодное проведение электроретинографических
исследований, для выявления различных наследственных и приобретенных
заболеваний глаз.
Особенно это важно для чистокровных парод,
находящихся в группе риска.
4.
Полученные
результаты
целесообразно
использовать
для
дальнейших исследований в области офтальмологии и расшифровке
этиопатогенеза данной патологии у разных пород, а также для разработки
методических рекомендаций для ветеринарных офтальмологов, а также в
учебном процессе зооветеринарных ВУЗов и факультетов.
127
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК.
1. Авроров, В.Н. Ветеринарная офтальмология / В.Н. Авроров, А.В.
Лебедев. - М.: Агропромиздат, 1985.
2. Бочкарева, А.А. Глазные болезни/ А.А. Бочкарева. - М.: Медицина,
2002.
3. Егоров, Е. А. Офтальмофармакология: Рук-во для врачей./ Е. А. Егоров,
Астахов Ю. С., Ставицкая Т. В. – М.: ГЭОТАР – МЕД, 2004. – 464с.
4. Жункейра, Л.К. Гистология / Л.К. Жункейра, Ж. Карнейро. – Москва.:
Гэотар – медиа, 2009. – 519 с.
5. Ирит и иридоциклит // Копенкин, Е.П. Болезни собак: Учеб.пособие/
Копенкин Е.П. -М: Колос, 1991.
6. Ковалевский, Е.И. Офтальмология./ Ковалевский Е.И. - М.: Медицина,
1995. - 235-241 с.
7. Козлов, К.А. Частная гистология домашних животных / К.А. Козлов,
В.В. Яглов. – М.: Зоомедлит, 2007.
8. Копаева, В.Г. Глазные болезни / В.Г. Копаева. -М.: Медицина, 2002.340-349 с.
9. Копаева, В.Г. Глазные болезни/ В.Г. Копаева. - М.: Медицина, 2002.
10. Копенкин, Е.П. Болезни глаз мелких домашних животных: Учеб.
пособие / Е.П. Копенкин, Л.Ф. Сотникова.- М.: 2008.
11. Ниманд, Х.Г. Болезни собак/ Х.Г. Ниманд, П.Б. Сутер.- М.: Аквариум,
2004.
12. Островский, М.А. Физиология зрения / М.А. Островский, В.И.
Говардовский.- М.: Наука, 1992.- 5-58 с.
13. Риис, Р. Офтальмология мелких домашних животных/ Р. Риис. –М.:
Аквариум, 2006.
128
14. Скулачев В.П. Внутримитохондриальный антиоксидант/ Скулачев
В.П. // Биохимия. - 2007. №72.- С. 1700—1714.
15. Скулачев, В.П. Внутримитохондриальный антиоксидант / Скулачев
В.П. // Вестник РАН. – 2005. - № 75. – С. 831—843.
16. Соколев, В.И. Цитология, гистология, эмбриология/ В.И. Соколев, Е.И.
Чумасов. - М.: Колоос, 2004.
17. Сомов, Е.Е. Введение в клиническую офтальмологию / Сомов Е.Е. –
Спб.: «ПМИ». - 1991. – 199с.
18. Сомов, Е.Е. Клиническая офтальмология / Сомов Е.Е. – М.:
МЕДпресс-информ, 2005. – 392с.
19. Справочник. Болезни собак
/ А.Д. Белов,
Е.П. Копенкин,
Е.П.
Данилов и др.- М.: Агропромиздат, 1990.
20. Фомин, К.А. Глазные болезни животных / Фомин К.А. - М.: Колос,
1968.
21. Хаппе, В. Офтальмология / Хаппе В. – М.: МЕДпресс-информ, 2004.
22. Шамшинова,
А.М.
Функциональные
офтальмологии. / А.М. Шамшинова,
методы
исследования
в
В.В. Волков.- М.: Медицина,
2004.
23. Abrams, K. Factors associated with canine sudden acquired retinal
detachment syndrome (SARDS): 350 cases / Abrams K., Gareen I.,
Marchand К. // Proceedings of the Scientific Meeting of the American
College of Ophthalmologists.- 2001.- Vol. 32.- P.17.
24. Acland, G. Day blindness in German Shorthaired Pointers in the United
States: clinical and electroretinographic findings/ Acland G.// Proceedings
of the Scientific Meeting of the American College of Veterinary
Ophthalmologists.- 1998.- Vol. 29.- P.33.
129
25. Acland, G. Retinal degenerations in the dog. IV. Early retinal degeneration
(ERD) in Norwegian Elkhounds/ Acland G., Aguirre G.// Experimental Eye
Research. – 1987. – Vol. 44. – P.491-521.
26. Acland, G. XLPRA: a canine retinal degeneration inherited as an X-linked
trait/ Acland G., Blanton S., Hershfield B., Aguirre G.// American Journal of
Medical Genetics. – 1994.- Vol.52. – P. 27-33.
27. Acland, G. Nonallelism of three genes (rcdl, rcd2, and erd) for early-onset
hereditary retinal degeneration. / Acland G., Fletcher R., Chader G., Aguirre
G.// Experimental Eye Research. – 1989. – Vol. 49. – P.983-998.
28. Acland, G. A new early-onset inherited retinal degeneration in the
Norwegian Elkhound. / Acland G., Gustavo A., Parkes J., Liebman P. //
Proceedings of the Scientific Meeting of the American College of Veterinary
Ophthalmologists. – 1983.- Vol. 14. – P.98-103.
29. Acland, G. Sudden acquired retinal degeneration in the dog: clinical and
morphologic characterization of the 'silent retina' syndrome. /Acland G., Irby
N., Aguirre G., Gross S., Nitroy S., Notarfrancesco К. // Proceedings of the
Scientific Meeting of the American College of Veterinary Ophthalmologists.
– 1984. – Vol. 15. – P. 86-104.
30. Acland, G. Auditory testing of dogs with inherited retinal degeneration.
/Acland G., Marsh R., Northington J. // Investigative Ophthalmology and
Visual Science. – 1985. – Vol. 26. – P. 785-788.
31. Acland, G. Rod renewal is cone-like in early retinal degeneration (erd). /
Acland G., O'Brian P., Aguirre G.// Proceedings of the Scientific Meeting of
the American College of Veterinary Ophthalmologists. – 1989. – Vol. 20. –
P. 152.
32. Acland, G.M. Diagnostic test to collie eye anomaly. Patent: EP 1 652
937. / Acland G.M., Kukekova A.V., Aguirre G.D., Ostrander E.A.,
130
Akey D., Goldstein O. // CORNELL RESEARCH FOUNDATION I,
NY 14850 (US). – 2006. – Vol. 31.
33. Aguirre, G. Variations in retinal degeneration phenotype inherited at the
prcd locus./ Aguirre G., Acland G. // Experimental Eye Research. – 1988. Vol. 46. – P. 663-687.
34. Aguirre, G. Method for identifying progressive rod-cone degeneration in
dogs. Patent: EP 1 798 295./ Aguirre G., Acland G., Zangerl B., Goldstein
O., Pearce-Kelling S., Felix J., Sidjanin D.J. // CORNELL RESEARCH
FOUNDATION I, NY 14850 (US). - 2007. – Vol. 22.
35. Aguirre, G. Pathogenesis of progressive rod-cone degeneration in Minature
Poodles. / Aguirre G., Alligood J., O'Brien P., Buyukmihci N. //
Investigative Ophthalmology and Visual Science. – 1982. – Vol. 23. – P.
610-630.
36. Aguirre, G. Congenital stationary night blindness in the dog: common
mutation in the RPE65 gene indicates founder effect./ Aguirre G., Baldwin
V., Pearce-Kelling S., Narfstrom K., Ray K., Acland G. // Molecular Vision.
– 1998. – Vol. 4. – P. 23-36.
37. Aguirre, G. The development of the canine eye./ Aguirre G., et all // Am J
Vet Res. – 1972. – Vol. 33. - P. 2399.
38. Aguirre, G. Pigment epithelial dystrophy in the dog./ Aguirre G., Lades A.//
Experimental ¥.ye Research. – 1976. – Vol. 23. – P. 247-256.
39. Aguirre, G. Morphological and biochemical studies of canine progressive
rod-cone degeneration. / Aguirre G., O'Brien P. // Investigative
Ophthalmology and Visual Science. – 1986. – Vol.27. – P.635-655.
40. Aguirre, G. Progressive retinal atrophy (rod dysplasia) in the Norwegian
Elkhound./ Aguirre G., Rubin L. // Journal of the American Veterinary
Medical Association. – 1971. – Vol. 158. – P. 208-218.
131
41. Aguirre, G. The early diagnosis of rod dysplasia in the Norwegian Elkhound.
/ Aguirre G., Rubin L. // Journal of the American Veterinary Medical
Association. – 1971. – Vol. 159. – P. 429.
42. Aguirre, G. Progressive retinal atrophy in the Minature Poodle: an
electrophysiologic study./ Aguirre G. Rubin L. // Journal of American
Veterinary Medical Association. – 1972. – Vol. 160. – P.191-201.
43. Aguirre, G. The electroretinogram in dogs with inherited cone degeneration.
/ Aguirre G., Rubin L. // Investigative Ophthalmology. -1975. – Vol. 14.- P.
840-847.
44. Aguirre, G.D. Models, Mutants, and Man: Searching for Unique Phenotypes
and Genes in the Dog Model of Inherited Retinal Degeneration. In The Dog
and its Genome. Edited by: Ostrander EA, Giger U, Lindblad-Toh K. New
York./
Aguirre G.D., Acland G.M. // Models Cold Spring Harbor
Laboratory Press. - 2006.
45. Anderson, R. Plasma lipid abnormalities in the Miniature Poodle with
progressive rod-cone degeneration./ Anderson R., Maude M., Alvarez R.,
Acland G., Aguirre G. // Experimental Eye Research. – 1991. – Vol. 52. –
P. 349-355.
46. Arnbjerg, J. Spontaneous microphthalmia in two Dobermann puppies with
anterior chamber cleavage syndrome./ Arnbjerg J. Jensen О. // Journal of the
American Animal Hospital Association. – 1982. – Vol. 18. – P. 481-484.
47. Ashton, N. Retinal dysplasia in the Sealyham Terrier. / Ashton N., Barnett
K., Sachs D. // Journal of Pathology and Bacteriology . – 1968. – Vol. 96.P. 269-272.
48. Barnett,
K. Hereditary retinal dysplasia in the Labrador Retriever in
England and Sweden. / Barnett K., Bjorck G., Коек Е. // Journal of Small
Animal Practice. – 1970. – Vol.10. – P.755-759.
49. Barnett, K.C. Retinal atrophy. / Barnett
K.C. //
record. - 1965. – Vol. 77(51). – P.1543-1560.
132
The Veterinary
50. Barnett , К. Canine retinopathies. II. The Miniature and Toy Poodle. /
Barnett К.// Journal of Small Animal Practice. – 1965. – Vol. 6. – P. 93109.
51. Bedford, P. Multifocal retinal dysplasia in the Rottweiler. / Bedford P. //
Veterinary Record. – 1982. – Vol.111. – P. 304-305.
52. Bedford, P.G. Collie eye anomaly in the border collie. / Bedford P.G.
// The Veterinary record.- 1982.- Vol.111(2). – P.34-35.
53. Bellhorn, R. Hereditary tapetal abnormality in the Beagle./ Bellhorn R.,
Bellhorn M., Swarm R., Impellizzeri С. // Ophthalmic Research. – 1975. –
Vol. 7. – P.250-260.
54. Bellhorn, R. Peripheral retinal cysts. / Bellhorn R., Haring В. // Veterinary
Medicine/Small Animal Clinician. – 1974. – Vol. 69. – P.1528-1530.
55. Bellhorn,
R. Antiretinal immunoglobulins in canine ocular diseases. /
Bellhorn R., Murphy C., Thirkill С. // Seminars in Veterinary Medicine and
Surgery. – 1988. – Vol.3. – P. 28-32.
56. Burns, M.S. Melanosome abnormalities of ocular pigmented epithelial cells
in Beagle dogs with hereditary tapetal degeneration. / Burns M.S., Tyler
N.K., Bellhorn R.W. // Current Eye Research. – 1988. – Vol. 7. – P. 115123.
57. Bush, R.A. A proximal retinal component in the primal fotopic ERG
a- wave. / Bush R.A., Sieving P.A. // Inv. Ophthalmol. Vis. Sci. –
1994. – Vol. 735, N 2. – P. 635-645.
58. Carrig, C. Retinal dysplasia associated with skeletal abnormalities in
Labrador Retrievers. / MacMillan A., Brundage S., Pool R., Morgan J. //
Journal of the American Veterinary Medical Association. – 1977. –
Vol.170.- P. 49-57.
59. Carrig,
C. Inheritance of associated ocular and skeletal dysplasia in
Labrador Retrievers./ Carrig C., Sponenberg D., Schmidt G., Tvcdten H. //
Journal of the American Veterinary Medical Association. – 1988. – Vol.
193. – P. 1269-1277.
133
60. Cogan, D. Photoreceptive abiotrophy of the retina in the Elkhound./ Cogan
D., Kuwabara T. // Veterinary Pathology. – 1965. – Vol. 2. – P.101-128.
61. Curtis, R. Retinal diseases in the dog and cat: an overview and update.
/Curtis R.// Journal of Small Animal Practice . – 1988. – Vol. 29. – P. 397415.
62. Dekomien, G. Generalized progressive retinal atrophy of Sloughi dogs is due
to an 8-bp insertion in exon 21 of the PDE6B gene./ Dekomien G., Runte
M., Godde R., Epplen J.T. // Cytogenetics and cell genetics. - 2000. – Vol.
90, № 3–4. – P. 261-267.
63. Dziezyc, J. Atlas chorob oczu psow I kotow. / Dziezyc J., Millichamp
Nicholas J.// Elsevier Urban&Partner Wroclaw. -2007.
64. Engerman, R. Vascular system of the dog retina: light and electron
microscopic studies. / Engerman R., Molitor D., Bloodworth J. //
Experimental Eye Research. – 1966. – Vol.5. – P. 296-301.
65. Kirk, N. Essentials of Veterinary Ophthalmology. / Kirk N., Gelatt,
Paperback. // Book, Veterinary Medicine, Barnes & Noble.com.-2000.
– Vol. 3. – P. 47-62.
66. Galibert, F. Dog as a mammalian genetic model. / Galibert F., Andre C.,
Hitte C. // Med Sci (Paris). - 2004. – Vol. 20, № 8–9. – P. 761-766.
67. Gerstein,
D. Retinal vascular changes in hereditary visual cell
degeneration./ Gerstein D., Dantzker D. // Archives of Ophthalmology. –
1969. – Vol.18.- P.99-105.
68. Goldstein, O. Linkage disequilibrium mapping in domestic dog breeds
narrows the progressive rod-cone degeneration interval and identifies
ancestral disease-transmitting chromosome. / Goldstein O., Zangerl B.,
Pearce-Kelling S., Sidjanin D.J., Kijas J.W., Felix J., Acland G.M., Aguirre
G.D. // Genomics. - 2006. – Vol. 88, № 5. – P. 541-550.
69. Gouras, P. electroretinography: same basic principles./ Gouras, P. //
Invest. Ophthalmol. – 1970. – Vol 9, N 8. – P. 557-569.
134
70. Grahn, B.H. Multifocal retinopathy of Great Pyrenees dogs./ Grahn B.H.,
Philibert H., Cullen C.I., Houston D.M., Semple H.A., Schmutz S.V. //
Veterinary Ophthalmology. – 1998. – Vol.1. – P. 211-221.
71. Grauwels, M. Multifocal retinopathy in a population of Coton de Tular
dogs./ Grauwels M. // Proceedings of the international Society of Veterinary
Ophthalmology/European College of Veterinary Ophthalmologists Meeting,
Sewsletter. – 1999. – Vol.11. – P.10.
72. Khanal, H. Response of dark-adapted retinal rod photoreceptors./ Khanal
V., Alexiades, and DiBenedetto E. // Proceedings of Dynamical Systems
and Applications. – 2004. – Vol. 4. – P.138-145.
73. Hamel, C. Retinitis pigmentosa. /Hamel C.// Orphanet J Rare Dis.- 2006.Vol. 1. – P.40.
74. Hardcastle, A.J. Evidence for a new locus for X-linked retinitis pigmentosa
(RP23). / Hardcastle A.J., Thiselton D.L., Zito I., Ebenezer N., Mah T.S.,
Gorin M.B.//
Bhattacharya SS Investigative ophthalmology & visual
science. - 2000. – Vol. 41, №8. - P. 2080-2086.
75. Hendrix,
D.V. Clinical signs, concurrent diseases, and risk factors
associated with retinal detachment in dogs. / Hendrix D.V., Nasisse M.,
Cowen P., Davidson M. // Progress in Veterinary and Comparative
Ophthalmology. – 1993. – Vol. 3. – P. 87-91.
76. Heywood, R. A retinal dysplasia in the Beagle dog. / Heywood R., Wells
G., // Veterinary Record . – 1970. – Vol.87. – P. 178-180.
77. Holle, D. The geographic form of retinal dysplasia in dogs is not always a
congenital abnormality. / Holle D., Stankovics M., Sarna C., Aguirre G. //
Veterinary Ophthalmology . – 1999. –Vol.2. – P. 61-66.
78. Holt, E. The prevalence of hyperadrenocorticism (Cushing's syndrome) in
dogs with sudden acquired retinal degeneration (SARD). / Holt E., Feldman
E., Buyukmihci N. // Proceedings of the Scientific Meeting of the American
College of Veterinary Ophthalmologists. – 1999. – Vol. 30. – P.35.
135
79. Barnett, K. C. Canine ophthalmology. / Barnett K. C., Sansom J., Heinrich
Ch. // Elsevier Health Sciences. – 2002. – Vol.5.- P.49-60.
80. Weng Sehu, K. Ophthalmic pathology: an illustrated guide for clinicians. /
Weng Sehu K., William R.// Wiley-Blackwell. – 2005. – Vol. 2. – P. 17-38.
81. Karwoski, C.J. A sources and sinks of light –evoked K+ in vertebrate
retina. / Karwoski C.J., Proenza L.M.// Can. J. Phisiol. Pharmacol. –
1987. – Vol. 65. – P. 1009-1017.
82. Kijas, J. Naturally occurring rhodopsin mutation in the dog causes retinal
dysfunction and degeneration mimicking human dominant retinitis
pigmentosa. / Kijas J., Cideciyan A., Aleman T., et al. // Proceedings of the
National Academy of Science. – 2002. – Vol. 99. – P. 6328-6333.
83. Kijas, J.W. Naturally occurring rhodopsin mutation in the dog causes retinal
dysfunction and degeneration mimicking human dominant retinitis
pigmentosa. /
Kijas J.W., Cideciyan A.V., Aleman T.S.,
Pianta M.J.,
Pearce-Kelling S.E., Miller B.J., Jacobson S.G., Aguirre G.D., Acland G.M.
// Proc Natl Acad Sci USA.-2002. – Vol. 9, №9. – P.6328-6333.
84. Koch, S. Distribution of cones in the hemeralopic dog. / Koch S., Rubin L. //
Journal of the American Veterinary Medical Association . – 1971. – Vol.
159. – P.1257-1259.
85. Koch, S. Distribution of cones in the retina of the normal dog. / Koch S.,
Rubin L. // American Journal of Veterinary Research. – 1972. – Vol. 33. –P.
361-363.
86. Shen, L. Fluctuations of the single photon response in visual transduction. /
Shen L., Andreucci D., Hamm H. E., DiBenedetto E. // AIP Conference
Proceedings - Noise and Fluctuations; 18th International Conference on
Noise and Fluctuations (ICNF).- 2005. – Vol. 780, №553. – P. 556.
87. Lange, K. Mendel version 4.0: A complete package for the exact genetic
analysis of discrete traits in pedigree and population data sets./ Lange K.,
Cantor R., Horvath S., Perola M., Sabatti C., Sinsheimer J., Sobel E.// Amer
J Hum Genetics.- 2001.- Vol. 69.
136
88. Lavach, R. Retinal dysplasia in the English Springer Spaniel./ Lavach R.,
Murphy J., Severin G. //
Journal of the American Animal Hospital
Association. – 1978. – Vol.14. – P.192-199.
89. Le Meur, G. Restoration of vision in RPE65-deficient Briard dogs using an
AAV serotype 4 vector that specifically targets the retinal pigmented
epithelium./ Le Meur G., Stieger K., Smith A.J., et al. // Gene therapy.2007. – Vol. 14, №4. – P. 292-303.
90. Loew, E. Congenital nyctalopia in the Tibetan Terrier./ Loew E., Riis R. //
Proceedings of the Scientific Meeting of the American College of Veterinary
Ophthalmologists. – 1983. – Vol. 14. – P. 82-97.
91. Lowe, J.K. Linkage mapping of the primary disease locus for collie
eye anomaly./ Lowe J.K., Kukekova A.V., Kirkness E.F., Langlois
M.C., Aguirre G.D., Acland G.M., Ostrander E.A. // Genomics. –
2003.- Vol. 82, №1. – P. 86-95.
92. Marmor, M.F. ISEV Standard for full-field clinical electroretinography. /
Marmor M.F., Fulton A.B., et all. // ISEV Doc. Ophthalmology. - 2009.
93. MacMillian A, Lipton D (1978) Heritability of multifocal retinal dysplasia in
American Cocker Spaniels. Journal of the American Veterinary Medical
Association 172:568-572.94. Larska, M. "PRA, czyli postępujący zanik siatkówki. Część I. Przyczyny i
sposoby diagnozowania u psów." / M. Larska // Dwumiesięcznik ZKwP
PIES. – 2003. - № 3. – Vol. 299.
95. Martin, Charles L. Ophthalmic disease in veterinary medicine. / Martin
Charles L. // Manson Publishing. – 2005.
96. Maubaret, C. Genetics of retinitis pigmentosa: metabolic classification and
phenotype/genotype correlations. /
Maubaret C., Hamel C. //
Journal
francais d'ophtalmologie. – 2005. – Vol. 28, №1 .– P.71-92.
97. Mcl.ellan, G.J. Systemic manifestations of vitamin E deficiency in canine
RPED (CPRA). /
Mcl.ellan G.J., Cappello R., Mayhew I.G., et al.//
137
Proceedings of the Scientific Meeting of the American College of Veterinary
Ophthalmologists. – 2000. – Vol. 31. – P. 41.
98. Mcl.ellan, G.J. Systemic manifestations of vitamin E deficiency in canine
RPED (CPRA). / Mcl.ellan G.J., Cappello R., Mayhew I.G., et al. //
Proceedings of the Scientific Meeting of the American College of Veterinary
Ophthalmologists. – 2000. – Vol.31. – P.41.
99. Mcl.ellan, G.J. Vitamin deficiency in canine retinal pigment epithelial
dystrophy (central retinal atrophy). / Mcl.ellan G.J., Watson P., Paganga G.,
Elks R., Lybaert P., Bedford P.G. // Proceedings of the Scientific Meeting
of the American College Veterinary Ophthalmologists/ - 1997. – Vol. 28. –
P.38.
100.
Mcl.ellan,
G.J.
Vitamin deficiency in canine retinal pigment
epithelial dystrophy (central retinal atrophy). / Mcl.ellan G.J., Watson P.,
Paganga G., Elks R., Lybaert P., Bedford P.G. // Proceedings of the
Scientific Meeting of the American College o/ Veterinary Ophthalmologists.
– 1997. – Vol.28. – P. 38.
101.
Melamud, A. Mapping a new genetic locus for X linked retinitis
pigmentosa to Xq28. / Melamud A., Shen G.Q., et al. // Journal of medical
genetics. – 2006. – Vol. 4, №36 -P.27.
102.
Meyers, V. Short-limbed dwarfism and ocular defects in the Sa moved
dog. / Meyers V., Jezyk P., Aguirre G., Patterson D. // Journal of the
American Veterinary Medical Association . – 1983. – Vol.183. – P.975-979.
103.
Millichamp, N. Progressive retinal atrophy in the Tibetan Terrier. /
Millichamp N., Curtis R., Barnett К. // Journal of the American Veterinary
Medical Association. – 1988. – Vol.192. – P.769-776.
104.
Millichamp, Nicholas J. Retinal degeneration in the cat and dog. /
Millichamp, Nicholas J. // . - 1990.
105.
Narfstrom, K. Hereditary retinal dystrophy in the Briard dog: clinical
and hereditary characteristics. / Narfstrom K., Wrigstad A., Ekesten B.,
138
Nilsson S.E. // Veterinary and Comparative Ophthalmology. -1994. – Vol.
4._- P.85-92.
106.
Neff, M.W. Breed distribution and history of canine mdr1-
1Delta, a pharmacogenetic mutation that marks the emergence of
breeds from the collie lineage./ Neff M.W., Robertson K.R., Wong
A.K., Safra N., Broman K.W., Slatkin M., Mealey K.L., Pedersen
N.C.// Proc Natl Acad Sci USA. – 2004/ - Vol. 101, № 32. – P.
11725-11730.
107.
Nelms, S.R. Hyphema associated with retinal disease in dogs: 17
cases (1986-1991). / Nelms S.R., Nasisse M.P., Davidson M.G., Kirschner
S.E. // Journal of the American Veterinary Medical Association. – 1993. –
Vol. 202. – P. 1289-1292.
108.
Netland, P.A.
Elevated
intraocular
pressure
secondary to rhegmatogenous retinal detachment. / Netland P.A., Mukai S.,
Covington
H.
//
Survey
of
Ophthalmology.
–
1994.-
Vol.
39.- P.234-240.
109.
Okun, E. Retinal breaks in the senile dog eye. / Okun E., Rubin L.,
Collins E. // Archives of Ophthalmology. – 1961. – Vol. 66. – P.702-707.
110.
O'Toole, D. Generalized progressive retinal atrophy in two Akita
dogs. / O'Toole D., Roberts S. // Veterinary Pathology . – 1984. – Vol. 21.P.457-462.
111.
Ott, J. Localizing multiple X chromosome-linked retinitis pigmentosa
loci using multilocus homogeneity tests. / Ott J., Bhattacharya S., Chen
J.D., et al. // Proc Natl Acad Sci USA. – 1990. – Vol. 87, №2 .- P.701-704.
112.
Bisegna, P. Diffusion of the second messengers in the cytoplasm acts
as a variability suppressor of the single photon response in vertebrate
phototransduction./ Bisegna P., Caruso G., Andreucci D., Shen L., Gurevich
V.V., Hamm H. E. // Biophysical Journal. - 2007.
139
113.
Parkes,
J.
Progressive
rod-cone
degeneration
in
the
dog:
characterization of the visual pigment./ Parkes J., Aguirre G., Rockey J.,
Liebman P. // Investigative Ophthalmology and Visual Science. – 1982. –
Vol. 23.- P. 674-678.
114.
Parry, H. Degeneration of the dog retina. VI. I entral progressive
atrophy with pigment epithelial dystrophy. / Parry H. // British Journal of
Ophthalmology. – 1954. – Vol. 38. – P.653-668.
115.
Parry, H.B. Degenerations of the dog retina. VI. Central progressive
atrophy with pigment epithelial dystrophy. / Parry H.B. //
The British
journal of ophthalmology.- 1984. – Vol. 38.- P. 653-668.
116.
Parry,
H.G. Degeneration of the dog retina II. Generalized
progressive atrophy of hereditary origin. / Parry H.G. // British Journal of
Ophthalmology . -1953. – Vol. 37. – P. 487-502.
117.
Parshall, C.J. Photoreceptor dysplasia: an inherited progressive retinal
atrophy of Miniature Schnauzer dogs. / Parshall C.J., Wyman M., Nitroy S.,
Acland G., Aguirre G. //
Progress in Veterinary and Comparative
Ophthalmology. – 1991. – Vol.1. – P.187-203.
118.
Paul,
Riordan-Eva. Vaughan & Asbury's general ophthalmology./
Paul Riordan-Eva, John Whitcher, Daniel Vaughan, Taylor Asbury. //
McGraw-Hill Professional. – 2003. - P. 80-99.
119.
Paulsen, M. Progressive retinal atrophy in a colony of Akita dogs. /
Paulsen M., Severin G., Young S., et al. // Proceedings of the Scientific
Meeting of the American College of Veterinary Ophthalmologists. – 1988. –
Vol. 19. – P. 1-3.
120.
Pecold, K. Siatkowka I cialo szkliste. Basic and Clinical Science
Course-part 12. / Pecold, K. //
American Academy of Ophthalmology.
Elsevier Urban&Partner Wroclaw. - 2005-2006.
121.
Petersen-Jones, S. Advances in the molecular understanding of canine
retinal diseases. / Petersen-Jones, S. // The Journal of small animal practices.
-2005. – Vol. 46. - P. 371-380.
140
122.
Petersen-Jones, S.M. cGMP phosphodiesterase-alpha mutation causes
progressive retinal atrophy in the Cardigan Welsh corgi dog. / PetersenJones S.M. // Investigative ophthalmology & visual science. – 1999. – Vol.
40. – P. 1637-1644.
123.
Petersen-Jones, S.M. cGMP phosphodiesterase-alpha mutation causes
progressive retinal atrophy in the Cardigan Welsh Corgi dog. / PetersenJones S.M., Entz D.D., Sargan D.R. // Investigative Ophthalmology and
Visual Science. – 1999. – Vol. 40. – P.1637-1644.
124.
Priester, W. Canine progressive retinal atrophy: occurrence by age,
breed, and sex. / Priester W. // American Journal of Veterinary Research. –
1974. – Vol. 35. – P.571-574.
125.
Prince, J. The globe. In: Anatomy and Histology of the Eye and Orbit
in Domestic Animals. / Prince J., Diesem C., Eglitis I., Ruskell G. // CC
Thomas, Springfield. – 1960.
126.
Pitts, R. A textbook of clinical ophthalmology: a practical guide to
disorders of the eyes and their management. / Pitts R. Crick, Peng Tee
Khaw . // World Scientific. - 2003. – P. 77-90.
127.
Ray K, Baldwin VJ, Ackland GM, Blanton SH, Aguirre GD (1994)
Cosegregation of codon 807 mutation of the canine rod cGMP
phosphodiesterase В gene and rcdl. Investigative Ophthalmology and Visual
Science 35:4291-4299.
128.
Riis, R. Pathological notations of retinal degeneration (rdi) in Tibetan
Terriers. / Riis R., Loew E. // Proceedingss of the Scientific Meeting of the
American College of Veterinary Ophthalmologists. – 1988. – Vol.19. – P.89.
129.
Riis, R. Inherited lipid retinopathy within a dog breed./ Riis R.,
Siakotos A. // Investigative Ophthalmology and Visual Science. – 1989. –
Vol. 30(Supplement).- P. 308.
130.
Rodieck, R. W. The vertebrate retina: principles of structure and
function./ Rodieck, R. W.// W. H. Freeman and Company, San Francisco. 1973.
141
131.
Rubin, I. Hereditary of retinal dysplasia in Bedlington Terriers. /
Rubin I. // Journal of the American Veterinary Medical Association. –
1968. – Vol.152. – P. 260-262.
132.
Rubin,
L.
Clinical features of hemeralopia in the adult Alaskan
Malamute. / Rubin
L.//
Journal of the American Veterinary Medical
Association. – 1971. – Vol.158. – P.1696-1698.
133.
Rubin, L. Hemeralopic in Alaskan Malamute pups. / Rubin L. //
Journal of the American Veterinary Medical Association. – 1971. – Vol.
158. – P. 1699-1701.
134.
Rubin, L.F. Inherited eye disease in purebred dogs./ Rubin L.F.
// Williams & Wilkins.- 1989.
135.
Sandberg, M. Full-field electroretinograms in Miniature Poodles with
progressive rod-cone degeneration. / Sandberg M., Pawlyk B., Berson E. //
Investigative Ophthalmology and Visual Science. – 1986.- Vol.27. –P. 11791184.
136.
Schmidt, G. Inheritance of retinal dysplasia in the English Springer
Spaniel. / Schmidt G., Ellersieck M., Wheeler C., Blanchard G., Keller W. //
Journal of the American Veterinary Medical Association. – 1979. – Vol.
174. – P. 1089-1090.
137.
Schulz, H.L. "The Retinome - defining a reference transcriptome of
the adult mammalian retina/retinal pigment epithelium". / Schulz H.L.,
Goetz T., Kaschkoetoe J., Weber B.H. // BMC Genomics. - 2004.- Vol.5 . –
P. 50.
138.
Steinberg, R. The distribution of rods and cones in the retina of the cat
(Felis domesticus). / Steinberg R., Reid M., Lacy P. //
Journal of
Comparative Neurology.- 1973. – Vol. 148. – P. 229-248.
139.
Sutter, N.B. Dog star rising: the canine genetic system. / Sutter N.B.,
Ostrander E.A.// Nature reviews.- 2004. – Vol. 5, №12. – P. 900-910.
142
140.
Toole, D. Retinal dysplasia of English Springer Spaniel dogs: light
microscopy of the postnatal lesions. / Toole D., Severin G., Neumann S.//
Veterinary Pathology. -1983. – Vol. 20.- P. 298-311.
141.
Van der Woerdt, A. Sudden acquired retinal degeneration in the dog:
clinical and laboratory findings in 36 cases. / Van der Woerdt A., Nasisse
M., Davidson M. // Progress in Veterinary and Comparative Ophthalmology
. – 1991. – Vol. 1.- P. 11-18.
142.
Van der Woerdt, A. Ultrasonographic abnormalities in the eyes of
dogs with cataracts: 147cases (1986-1992). / Van der Woerdt A., Wilkie D.,
Myer С. // Journal of the American Veterinary Medical Association. – 1993.
– Vol. 203. – P. 838-841.
143.
Wen, G. Chemical and ultrastructural changes in the tapetum of
Beagles with a hereditary abnormality. / Wen G., Sturman J., Wisniewski
H., MacDonald A., Niemann W. // Investigative Ophthalmology and Visual
Science. – 1982. – Vol. 23. – P. 733-742.
144.
Wilcock, В.
Ocular anomalies. In: Comparative Ophthalmic
Pathology. / Wilcock, В. // CC Thomas, Springfield. – 1983. - P. 3-46.
145.
Williams, L. A survey of ocular findings in the American Cocker
Spaniel. / Williams L., Peiffer R., Gelatt K., Gum G. // Journal of the
American Animal Hospital Association . – 1979. – Vol. 15. – P. 603-607.
146.
Witzel, D. Congenital stationary night blindness: an animal model. /
Witzel D., Smith E., Wilson R., Aguirre G. // Investigative Ophthalmology
and Visual Science. – 1978. – Vol.17. – P. 788-795.
147.
Wolf , E. Rod-cone dysplasia in the Collie. / Wolf E., Vainisi S.,
Santos-Anderson R. //
Journal of the American Veterinary Medical
Association. – 1978. – Vol. 173 . – P. 1331-1333.
148.
Wrigstad, A. Ultrastructural changes of the retina and the retinal
pigment epithelium in Briard dogs with hereditary congenital night blindness
and partial day blindness. / Wrigstad A., Nilsson S.E., Narfstrom К. //
Experimental Eye Research. - 1992.- Vol.55. – P. 805-818.
143
149.
Wyman, M. The ocular fundus of the normal dog./ Wyman M.,
Donovan E. // Journal of the American Veterinary Medical Association. –
1965. – Vol. 147. – P. 17-26.
150.
Xu, X. Current sourses and sinks associated with the ERG b –
wave / Xu X., Karwoski C.J. // Inv. Ophthalmol. Vis. Sci.- 1993. –
Vol. 34. – P. 1272- 1275.
151.
Young, R. W. The renewal of rod and cone outer segments in the
rhesus monkey. / Young R. W. // J. Cell Biol. – 1971. – Vol. 49. – P. 303318.
152.
Zangerl, B. Identical mutation in a novel retinal gene causes
progressive rod-cone degeneration in dogs and retinitis pigmentosa in
humans. / Zangerl B., Goldstein O., Philp A.R., et al. // Genomics. – 2006. –
Vol. 88. – P.551-563.
153.
Zhang, Q. Characterization of canine photoreceptor phosducin cDNA
and identification of a sequence variant in dogs with photoreceptor
dysplasia. / Zhang Q., Acland G.M., Parshall C.J., Haskell J., Ray K.,
Aguirre G.D.// Gene. - 1998. – Vol. 215, № 2. – P. 231-239.
144
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа