close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

(БМВ, 2002, т.6, №1, 118-121) (PDF)

код для вставкиСкачать
Y
F T ra n sf o
A B B Y Y.c
bu
to
re
he
C
lic
k
he
k
lic
C
w.
om
w
w
w
w
rm
y
ABB
PD
re
to
Y
2.0
2.0
bu
y
rm
er
Y
F T ra n sf o
ABB
PD
er
Y
w.
A B B Y Y.c
Буковинський медичний вісник, 2002, Т.6, №1, с.118-121.
УДК 616. 728. 3 – 007.248 – 07 615. 849. 19
ВОЗМОЖНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ЛАЗЕРНОЙ КОРРЕЛЯЦИОННОЙ
СПЕКТРОСКОПИИ ДЛЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ ХАРАКТЕРИСТИКИ
ПЛАЗМЕННОГО ГОМЕОСТАЗА У БОЛЬНЫХ С ОСТЕОАРТРОЗОМ КОЛЕННОГО
СУСТАВА.
Н. К.ТЕРНОВОЙ, П.В.БУЛЫЧ, И.М.ЗАЗИРНЫЙ.
Ортопедическое отделение Киевской городской клинической больницы № 12
(главный врач – Т.В.Лобода)
ВВЕДЕНИЕ.
Одной из актуальных проблем современной ортопедии является восстановление
функции суставов при заболеваниях с помощью новых технологий. Появление новых
методов лечения не всегда обеспечивается современной диагностикой. Это приводит к
необходимости разработки адекватных методов диагностики патологии костей и суставов с
использованием новых имидж-методов (С.П.Миронов). Перечисленные обстоятельства
послужили причиной разработки эффективных тестов интегрального характера,
отражающих совокупность комплекса проявлений болезни.
Цель работы - на основе метода лазерной корреляционной спектроскопии (ЛКС)
разработать диагностические критерии течения остеоартроза коленного сустава .
Метод ЛКС позволяет исследовать многокомпонентные препараты на
молекулярном уровне, избегая денатурирующих обработок образца и в низких его
концентрациях. Он позволяет быстро исследовать биологические препараты в нативных
условиях. Применение современной электронной, оптической аппаратуры в сочетании с
использованием эффективных средств математической обработки получаемой информации
обеспечивают объективность и точность проводимых исследований.
Физический смысл этого метода заключается в анализе спектра лазерного света,
рассеянного исследуемыми частицами [5, б]. В ряде работ [3, 4] отмечается возможность
применения ЛКС для решения многих медицинских проблем. Накоплен определенный
опыт работы в области исследований различных биологических объектов методом
ЛКС[10]. Важнейшим преимуществом ЛКС является большой диапазон доступных
измерению размеров биологических частиц [11]. Верхний предел размеров обусловлен
лишь соображениями целесообразности исследований такого типа. Минимальные размеры
приближены к величинам, типичным для обычных молекулярных жидкостей.
om
Y
F T ra n sf o
A B B Y Y.c
bu
to
re
he
C
lic
k
he
k
lic
C
w.
om
w
w
w
w
rm
y
ABB
PD
re
to
Y
2.0
2.0
bu
y
rm
er
Y
F T ra n sf o
ABB
PD
er
Y
w.
A B B Y Y.c
ЛКС можно использовать для определения характера изменений белков под
действием различных внешних факторов. С помощью ЛКС. устанавливается не только
денатурация, но и относительная величина происходящих в структуре изменений, что
исключительно важно для понимания молекулярных механизмов повреждения
биологической системы [7] . В работах [2-4] была обоснована принципиальная
возможность применения ЛКС для идентификации субфракционного молекулярного
состава плазмы крови.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ.
Нами обследованы больные с остеоартрозом коленного сустава. Контрольную
группу составили доноры. Тактика клинического применения автоматизированного
комплекса ЛКС у этой группы больных разработана совместно с сотрудниками института
биохимии им. А. В. Палладина АН Украины.
Забор крови проводили по обычной методике из концевой фаланги пальца кисти в
количестве. 100 мкл с последующим помещением ее в 4 % цитратный буфер.
Центрифугированием в течение 15 мин на лабораторной центрифуге MPW-310 (Польша)
при 5000 оборотов в 1 мин получали плазму крови. Для ее исследования использовали
лазерный корреляционный спектрометр, состоящий из источника света-He-Ne лазера с
длиной волны 633 нм, оптической системы Optimation (ФРГ), коррелятора фирмы
«Malvern» и ЭВМ типа PC/XT. После обработки сигнала на выходе коррелятора получали
функцию рассеянного света. Данные расшифровывали на персональном компьютере по
специально написанной программе «Экспо» на языке программирования «С». В результате
вычисления нормировали и. строили по ним гистограмму функции распределения частиц
по размерам в исследуемой плазме.
Для выявления существующих различий между спектральными характеристиками
исследуемых групп проводили компьютерный анализ по другой созданной программе
«классификатор» с соблюдением всех статистических условий. Функция распределения по
размерам для каждого представителя из двух групп представлялась в виде точки в
пятимерном пространстве. В результате получали распределение точек на плоскости, на
которой каждая точка отвечала представителю одной из двух групп.
Обследовано 143 больных деформирующим артрозом с различными стадиями
заболевания (I-III, согласно классификации Н. С. Косинской)[1]. Контрольную группу
составили 80 доноров в возрасте 24-60 лет. Все больные обследованы в стационарных
условиях. Кровь больных исследовали на лазерном корреляционном спектрометре с
гелиево-неоновым лазером. Больные в каждой из стадий остеоартроза разделены на 4
om
Y
F T ra n sf o
A B B Y Y.c
bu
to
re
he
C
lic
k
he
k
lic
C
w.
om
w
w
w
w
rm
y
ABB
PD
re
to
Y
2.0
2.0
bu
y
rm
er
Y
F T ra n sf o
ABB
PD
er
Y
w.
A B B Y Y.c
группы по признакам наличия биомеханических изменений: а) без нарушения оси и
стабильности, б) с нестабильностью сустава, в) с нарушением оси сустава, г) с нарушением
оси сустава и его нестабильностью. Результаты изображены в виде гистограмм (рис. 1,2).
РЕЗУЛЬТАТЫ И ДИСКУССИЯ.
По данным усредненной гистограммы, основную часть рассеивающей активности
занимают частицы из интервала 15-212 нм. Они составляют 80,3% всей активности.
У всех больных был деформирующий артроз разной степени выраженности,
поэтому представляет интерес определение характера изменений в зависимости от тяжести
основного патологического процесса [9].
Спектроскопические исследования плазмы крови больных деформирующим
артрозом позволили разделить их на двеподгруппы, в первую вошли преимущественно
больные стадии 1 и 2, во вторую – преимущественно больные 3 стадии и часть больных 2
стадии. Различия в системе гомеостаза нарастают по мере усугубления основного
патологического процесса. Этот вывод можно сделать на основании того, что различия
между 1-й и 2-й стадиями ОА менее существенны, чем между 2 и 3 стадиями
остеоартроза.
Основной вклад в рассеивающую активность внесли частицы со средним размером
158 нм, что составило примерно 41%. Меньшую группу составили частицы со средним
диаметром 31,9 нм (40%). Характерным признаком усредненной гистограммы больных с
III стадией деформирующего артроза стало перераспределение в сторону частиц со
сравнительно меньшим размером.
При использовании специально разработанной для сравнительного анализа
системы "Классификатор" между спектрами плазмы крови больных с остеоартрозом,
принадлежащих к 1 и 2 подгрупп, выявлено явное различие (от 84 до 971), выраженное в
отсутствии перекрывающихся зон (рис. 3). Такое различие свидетельствует о выраженных
изменениях гомеостаза у больных с III стадией деформирующего артроза.
Выявление степени различий в субфракционном составе плазмы крови в
зависимости от стадии деформирующего артроза позволило отнести основные
гомеостатические изменения к относительно легким и тяжелым, что можно использовать
для объективизации прогноза течения патологического процесса на основе данных ЛКС
плазмы крови. Сравнение усредненной ЛКС у лиц с I и III стадиями заболевания показало,
что ухудшение клинической картины деформирующего артроза сопровождается
перераспределением частиц плазмы крови, главным образом изменением в центральной
части спектра. Так, при тяжелом деформирующем артрозе абсолютно преобладают частицы
om
Y
F T ra n sf o
A B B Y Y.c
bu
to
re
he
C
lic
k
he
k
lic
C
w.
om
w
w
w
w
rm
y
ABB
PD
re
to
Y
2.0
2.0
bu
y
rm
er
Y
F T ra n sf o
ABB
PD
er
Y
w.
A B B Y Y.c
с модальным числом 40,6 нм (интервал 15-212 нм). При деформирующем артрозе I стадии
данный пик "размазан" по 40% частиц (158 и 31 нм соответственно).
Сопоставив результаты ЛКС больных с остеоартрозом коленного сустава и
распределение их по группам в зависимости от категории биомеханических нарушений, мы
выявили, что у больных 2 стадии остеоартроза с нарушением стабильности сустава и его
оси (группа 4) спектроскопическая картина такая же, как и у больных с 3 стадией
остеоартроза.
Таблица 1. Распределение частиц при ЛКС крови у больных с остеоартрозом.
(отражены значимые размеры )
Клини
Без
нарушення
ческие
оси
группы
стабильности
С
нарушением
и оси сустава
С
нарушением С
стабильности
оси
сустава.
стабильности
сустава
Інтервал,
нарушением
и
сустава
%
нм
Інтервал,
%
нм
Інтервал,
%
нм
Інтервал,
%
нм
1
36-73
31,1
8-13
3,3
17-69
38,9
13-84
37,7
стадия
88-421
43,7
24-74
45,3
73-379
42,1
88-436
44,3
ОАКС
789-1524
9,8
84-534
46,9
2
10-13
5,6
9-13
4,7
24-258
56,5
5-10
7,6
стадия
26-113
58,3
14-54
52,8
312-5134
11,8
18-389
61,9
ОАКС
226-513
18,0
96-664
27,7
516-3168
15,3
3
4-8
6,4
7-16
6,0
8-12
9,8
6-28
7,1
стадия
15-30
5,8
26-47
8,3
16-24
5,6
34-219
86,6
ОАКС
22-256
69,4
52-318
70,4
26-198
74,5
356-3157
5,4
301-5138
6,8
356-5298
3,5
243-2576
3,7
У доноров распределение частиц по размерам было следующее: 1) 6-7 нм – 2,5%, 2)
12-14 нм – 1,4%, 3) 16 – 40 нм – 19,8%, 4) 47 – 57 нм - 3,9%, 5) 51 – 5728 нм – 70,7%.
У больных с ОАКС основу рассеивающей активности составили частицы плазмы
интервала 15 – 212 нм (80,3%). Значительную часть из данного интервала составили
частицы размером до 50 нм. Необходимо отметить две основные информативные
om
Y
A B B Y Y.c
bu
to
re
he
C
lic
k
he
k
lic
C
w.
om
w
w
w
w
rm
y
ABB
F T ra n sf o
re
to
PD
Y
2.0
2.0
bu
y
rm
er
Y
F T ra n sf o
ABB
PD
er
Y
w.
A B B Y Y.c
параметры в спектрах больных ОАКС: почти полный переход спектра в область
гликолипопротеиновых комплексов (до 80%) и появление сверхвысокомолекулярных
имунных комплексов ( до 5000 нм).
ВЫВОДЫ.
Следовательно, тяжесть патологического процесса при деформирующем артрозе
коленного сустава характеризуется выраженными изменениями на уровне интегрального
плазменного гомеостаза, что подтверждает клиническую картину и происходящие
морфологические изменения и показывает адекватность выбранного метода диагностики
деформирующего артроза.
По нашему мнению, использование в клинической практике ЛКС расширит и
дополнит существующие диагностические методы исследования.
Темпы тканевой деструкции у больных с 2 стадией остеоартроза коленного сустава
при наличии нестабильности сустава и нарушения его оси соответствуют изменениям у
больных 3 стадии остеоартроза, что служит основанием для планирования аналогичного
хирургического лечения у этих больных.
om
Y
F T ra n sf o
A B B Y Y.c
bu
to
re
he
C
lic
k
he
k
lic
C
w.
om
w
w
w
w
rm
y
ABB
PD
re
to
Y
2.0
2.0
bu
y
rm
er
Y
F T ra n sf o
ABB
PD
er
Y
РИСУНКИ
Рис.1 Усредненная гистограмма распределения частиц по размерам плазмы крови
больных с остеоартрозом коленного сустава 1 ст.
w.
A B B Y Y.c
om
Y
F T ra n sf o
A B B Y Y.c
bu
to
re
he
C
lic
k
he
k
lic
C
w.
om
w
w
w
w
rm
y
ABB
PD
re
to
Y
2.0
2.0
bu
y
rm
er
Y
F T ra n sf o
ABB
PD
er
Y
w.
Рис. 2. Усредненная гистограмма распределения частиц по размерам плазмы крови
больных с остеоартрозом коленного сустава 3 ст.
A B B Y Y.c
om
Y
F T ra n sf o
A B B Y Y.c
bu
to
re
he
C
lic
k
he
k
lic
C
w.
om
w
w
w
w
rm
y
ABB
PD
re
to
Y
2.0
2.0
bu
y
rm
er
Y
F T ra n sf o
ABB
PD
er
Y
w.
A B B Y Y.c
Рис. 3. Усредненная гистограмма распределения по размерам частиц плазмы крови доноров
(контрольная группа).
Рис.4.Сравнение между спектров плазмы крови больных с I и III стадиями
остеоартроза коленного сустава.
om
Y
F T ra n sf o
A B B Y Y.c
bu
to
re
he
C
lic
k
he
k
lic
C
w.
om
w
w
w
w
rm
y
ABB
PD
re
to
Y
2.0
2.0
bu
y
rm
er
Y
F T ra n sf o
ABB
PD
er
Y
w.
A B B Y Y.c
ЛИТЕРАТУРА.
1.Диагностика и лечение дегенеративно-дистрофических поражений суставов / Под ред.
И. В. Шумады/ - К. – Здоровья. - 1990. - 200 с.
2. Деребин И. И., Рожнов А. С., Чернов Э. В.
Профилактика и лечение гнойных
осложнений тяжелой механической травмы // Вестник хирургии. - 1981. - № 7. - С. 70-73.
3. Камнис Г., Гайко Е., Спектроскопия оптического смешения и корреляции фотонов // - М.
– Мир. – 1978. - 584 с.
4. Лебедев А. Д., Левчук Ю Н, Ломакин А. В., Носкин В. А. Лазерная корреляционная
спектроскопия и биология // К. - Наукoвa думка. - 1987. - 458 с.
5.Яковлев А.А., Яковлев А.М., Омельченко В. С. и др. Лазерная корреляционная
спектроскопия для скрининговых систем II Диспансеризация больных с инфекционной
патологией: Сб. науч. трудов 1 Ленинград. мед. ин-та им. И.П.Павлова под ред.
Е.П.Шуваловой, В.А.Миняева. - Л. - Медицина, Ленингр. отд-ние. - 1987. - С. 77 - 83.
6. Омельченко В. С., Балабанов С. М., Блюгер А. Ф. и др. // Возможности методов,
восстанавливающих функцию распределения по размерам в вирусологии и иммунологии.
Препринт № 1330 ЛИЯФ АН СССР. — 1987. — 24 с.
7. Омельченко В. С. Клинико-диагностическое значение лазерной корреляциониной
спектроскопии при хронических вирусных гепатитах В // Автореф. дис. канд. мед. наук.
14.00.10. – Ленинград. ин–т усоверш. врачей. - С.-Пб. - 1992. - 21с.
8. Сименач Б. И. Об «артрозе» // Ортопедия, травматология и протезирование. - 1990. - № 1.
- С. 67-70.
9. Шехтер А. Б., Серов В. В. Воспаление, адаптивная регенерация и дисрегенерация (анализ
межклеточных взаимодействий) // Арх. патологии. - 1991. -Т. 53, № 7. - С.7-14.
10. Maser N.. Schertenberg P., Carey M. Quasi-Elastic light Scattering Studies of Native Hepatic
Bile from the Dog: Comparison with Aggregative Behavior of Model Billiary Lipid System //
Biochemistry. — 1984. - Vol. 23, N 9.— P. 2005.
11.Mazer N.,Carey M. Quasielastic Light Scattering Studies of Aqueous Biliary Lipid Systems.
Cholesterol Solubilization and Precipitation in Model Bile Solutions // Biochemistry. – 1983. –
V.22. – N2. – p. 426 – 442.
om
Y
F T ra n sf o
A B B Y Y.c
bu
to
re
he
C
lic
k
he
k
lic
C
w.
om
w
w
w
w
rm
y
ABB
PD
re
to
Y
2.0
2.0
bu
y
rm
er
Y
F T ra n sf o
ABB
PD
er
Y
w.
A B B Y Y.c
РЕЗЮМЕ
ВОЗМОЖНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ЛАЗЕРНОЙ КОРРЕЛЯЦИОННОЙ
СПЕКТРОСКОПИИ ДЛЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ ХАРАКТЕРИСТИКИ
ПЛАЗМЕННОГО ГОМЕОСТАЗА У БОЛЬНЫХ С ОСТЕОАРТРОЗОМ КОЛЕННОГО
СУСТАВА.
Н. К.ТЕРНОВОЙ, П.В.БУЛЫЧ, И.М.ЗАЗИРНЫЙ.
КИЕВ.
Ключевые слова: остеоартроз, коленный сустав, лазерная корреляционная спектроскопия.
Введение: проводился анализ спектра лазерного света, рассеянного частицами в крови.
Материал и методы: Обследовано 143 больных деформирующим артрозом с различными
стадиями заболевания. Контрольную группу составили 80 доноров.
Результаты: Спектроскопические исследования плазмы крови больных остеоартрозом
позволили разделить их на две подгруппы: в первую вошли преимущественно больные
стадии 1 и 2, во вторую – преимущественно больные 3 стадии. Различия в системе
гомеостаза нарастают по мере усугубления основного патологического процесса.
Выводы: использование в клинической практике ЛКС расширит и дополнит существующие
диагностические методы исследования.
om
Y
F T ra n sf o
A B B Y Y.c
bu
to
re
he
C
lic
k
he
k
lic
C
w.
om
w
w
w
w
rm
y
ABB
PD
re
to
Y
2.0
2.0
bu
y
rm
er
Y
F T ra n sf o
ABB
PD
er
Y
w.
A B B Y Y.c
om
Y
F T ra n sf o
A B B Y Y.c
bu
to
re
he
C
lic
k
he
k
lic
C
w.
om
w
w
w
w
rm
y
ABB
PD
re
to
Y
2.0
2.0
bu
y
rm
er
Y
F T ra n sf o
ABB
PD
er
Y
w.
A B B Y Y.c
РЕЗЮМЕ
МОЖЛИВІСТЬ ЗАСТОСУВАННЯ ЛАЗЕРНОЇ КОРЕЛЯЦІЙНОЇ
СПЕКТРОСКОПІЇ ДЛЯ ФУНКЦІОНАЛЬНОЇ ХАРАКТЕРИСТИКИ
ПЛАЗМЕННОГО ГОМЕОСТАЗУ В ХВОРИХ З ОСТЕОАРТРОЗОМ КОЛІННОГО
СУГЛОБА.
Н. К.ТЕРНОВОЇ, П.В.БУЛИЧ, И.М.ЗАЗІРНИЙ.
КИЇВ.
Ключові слова: остеоартроз, колінний суглоб, лазерна кореляційна спектроскопія.
Уведення: проводився аналіз спектра лазерного світла, розсіяного частками в крові.
Матеріал і методи: Обстежений 143 хворих деформуючим артрозом з різними стадіями
захворювання. Контрольну групу склали 80 донорів.
Результати: Спектроскопічні дослідження плазми крові хворих остеоартрозом дозволили
розділити їх на двох підгруп: у першу ввійшли переважно хворі стадії 1 і 2, у другу –
переважно хворі 3 стадії. Розходження в системі гомеостазу наростають у міру збільшення
основного патологічного процесу.
Висновки: використання в клінічній практиці ЛКС розширить і доповнить існуючі
діагностичні методи дослідження.
om
Y
F T ra n sf o
A B B Y Y.c
bu
to
re
he
C
lic
k
he
k
lic
C
w.
om
w
w
w
w
rm
y
ABB
PD
re
to
Y
2.0
2.0
bu
y
rm
er
Y
F T ra n sf o
ABB
PD
er
Y
w.
A B B Y Y.c
THE SUMMARY
OPPORTUNITY of APPLICATION of a LASER CORRELATION
SPECTROSCOPY FOR the FUNCTIONAL CHARACTERISTIC of a PLASMA
HOMEOSTASIS At the PATIENTS With an OSTEOARTHROSIS of a KNEE JOINT.
M.TERNOVIY, P.BULICH, I.ZAZIRNIY.
KIEV.
Key words: an osteoarthrosis, knee joint, laser correlation spectroscopy.
Introduction: the analysis of a spectrum of laser light, absent-minded particles in a blood was
carried out(spent).
Material and methods: 143 patients by a deforming arthrosis with various stages of disease Are
surveyed. The control group was made with 80 donors.
Results: the researches with use of a spectroscopy of a blood plasma of the patients by an
osteoarthrosis have allowed to divide them into two subgroups: the patients of a stage 1 and 2, in
second - mainly patients 3 stages have come mainly in first. The differences in system of a
homeostasis accrue in process of aggravation of the basic pathological process.
Conclusions: use in clinical practice of a laser correlation spectroscopy will expand and will add
existing diagnostic methods of research.
om
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа