close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

Морохотова Вероника Станиславовна. Микробиологические исследования воды открытых водоемов г. Саров и использование его в школьном курсе биологии 9 класса

код для вставки
МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ
ФЕДЕРАЦИИ
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ
ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ
«ОРЛОВСКИЙ ГОСУДАРСВТЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ
имени И.С. ТУРГЕНЕВА»
ВЫПУСКНАЯ КВАЛИФИКАЦИОННАЯ РАБОТА
по направлению подготовки 06.04.01 Биология
направленность (профиль) Медико-биологические науки
Студентки Морохотовой B.C.
шифр 176811
Институт естественных наук и биотехнологии
Тема выпускной квалификационной работы
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВОДЫ ОТКРЫТЫХ
ВОДОЕМОВ г. САРОВ И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЕГО В ШКОЛЬНОМ
КУРСЕ БИОЛОГИИ 9 КЛАССА
Морохотова B.C.
Студент
Руководитель
к.б.н., доцент Ляхова О.Л.
И.о.зав. кафедрой
к.б.н., доцент Ляхова О.Л.
Орёл 2018
МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ЕОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ
УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕЕО ОБРАЗОВАНИЯ
«ОРЛОВСКИЙ ЕОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ
имени И.С. ТУРЕЕНЕВА»
Институт естественных наук и биотехнологии
Кафедра анатомии, физиологии, гигиены и экологии человека
Направление подготовки 06.04.01 Биология
Направленность (профиль) Медико-биологические науки
УТВЕРЖДАЮ:
И.о. зав. кафедрой
0;,.. О--'t- Ляхова О.Л.
«_>У
20
г.
ЗАДАНИЕ
на выполнение выпускной квалификационной работы
студентки Морохотовой B.C.
шифр 176811
1.Тема ВКР: Микробиологическое исследование воды открытых водоемов г. Саров и использование его в школьном курсе биологии 9 класса.
Утверждена приказом по университету от « 24 » января 2017г. № 2-97
2. Срок сдачи студентом законченной работы « 06 » октября 2018 г. (за 20 дней до защиты
ВКР)
3. Исходные данные к работе: материалы ЕОСТы и ТУ, учебники, научные журналы и
статьи, справочные данные сети Internet, материалы по результатам преддипломной практики, результаты проведенных научных исследований.
4. Содержание ВКР (перечень подлежащих разработке вопросов):
1. Обзор литературы;
2. Организация и методы исследования;
3. Результаты собственных исследований;
4. Выводы.
Дата выдачи задания« 20 » октября 2017 г.
Руководитель ВКР
•'
к б.н., доцент Ляхова О.Л.
Задание принял к исполнению
Г
,t
Морохотова B.C.
vJ
-- ' "
КАЛЕНДАРНЫЙ ПЛАН
Наименование этапов
Срок выполнения
Примечание
ВКР
этапов работы
Подготовка материалов к написанию литературОктябрь, ноябрь
выполнено
ного обзора
выполнено
Декабрь, январь
Написание обзора литературы
Октябрь, ноябрь,
выполнено
Проведение экспериментальных исследований
февраль, март
выполнено
Март, апрель
Обработка материалов исследования
Оформление результатов собственных исследовыполнено
Март, апрель
ваний
выполнено
Апрель, май
Формулировка выводов и заключения
выполнено
Оформление работы
Апрель, май
Студент
уу .
Морохотова B.C.
Руководитель ВКР
С и ЫДк б.н., доцент Ляхова О.Л.
РЕЦЕНЗИЯ
на выпускную квалификационную работу
Морохотовой Вероники Станиславовны- магистра
(Ф.И.О. бакалавра (специалиста, магистра)
Микробиологическое исследование воды открытых водоемов г.Саров и
использование его в школьном курсе биологии 9 класса
(тема ВКР)
представленной к защите по направлению подготовки
06.04.01. Биология
(код и наименование направления подготовки (специальности))
Проблема
работы
актуальна.
Четко
определены
цели
и
задачи
исследования. Все задачи, поставленные в работе, решены.
Подробно
дан
обзор
современных
данных
по
проблеме
микробиологического загрязнения водоемов. Тщательно описаны методы
исследования и обстоятельно проведено исследование водоемов по многим
параметрам.
Особый
интерес
представляет
использование
полученных
в
ходе
исследования данных в школьном курсе биологии 9 класса.
Работа имеет практическую ценность и может быть полезна учебновоспитательным коллективам школ.
Считаю, что работа отвечает всем требованиям, предъявляемым к
выпускным квалификационным работам.
Оценка рецензента: «отлично»
Рецензент: к.б.н., доцент ФГБОУ ВО Орловский ГАУ
Занимаемая должность, место работы
Химичева С.Н.
отзыв
научного руководителя
Морохотовой Вероники Станиславовны- магистра
(Ф.И.О. бакалавра (специалиста, магистра)
Микробиологическое исследование воды открытых водоемов г.Саров и
использование его в школьном курсе биологии 9 класса
(тема ВКР)
представленной к защите по направлению подготовки
06.04.01. Биология
(код и наименование направления подготовки (специальности))
Поднимаемая
проблема
актуальна.
загрязнение
питьевой
воды
патогенным
и
вызвать
могут
Особую
микроорганизмами,
вспышки
опасность
которые
разнообразных
представляет
относятся
к
эпидемических
заболеваний среди населения и животных.
В работе подробно рассмотрено состояние проблемы в науке, выявлены
особенности микробиологического состава воды и приведены данные о
загрязненности водоемов.
Проведено достаточно обширное исследование водоемов, позволившие
дать
интегральную
оценку
потенциального
риска
эпидемиологической
опасности питьевой воды.
Считаю, что работа отвечает всем требованиям,
предъявляемым
выпускным квалификационным работам.
Руководитель выпускной
квалификационной работы,
доцент
Ляхова О.Л.
к
V
АНТИПЛАГИАТ
Орловский государственный
университет имени И.С. Тургенева
ТВОРИТЕ СОБСТВЕННЫМ УМОМ
СПРАВКА
о результатах проверки текстового документа
на наличие заимствований
Проверка выполнена в системе
Антиплагиат.ВУЗ
Автор работы
Морохотова B.C.
Подразделение
институт естественных наук и биотехнологии, кафедра анатомии, физиологии,
гигиены и экологии человека, 0214020Б
Тип работы
Магистерская диссертация
Название работы
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВОДЫ ОТКРЫТЫХ ВОДОЕМОВ г. САРОВ И
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЕГО В ШКОЛЬНОМ КУРСЕ БИОЛОГИИ 9 КЛАССА
Название файла
Диплом Морохотова B.C..doc
Процент заимствования
14,28%
Процент цитирования
0,87%
Процент оригинальности
84,85%
Дата проверки
16:10:00 01 ноября 2018г.
Модули поиска
Кольцо вузов; Модуль поиска "ФГБОУ ВО ОГУ им. И.С.Тургенева"; Модуль поиска
общеупотребительных выражений; Модуль поиска перефразирований Интернет;
Модуль поиска перефразирований eLIBRARY.RU; Модуль поиска Интернет;
Коллекция eltBRARY.RU; Цитирование; Коллекция РГБ; Сводная коллекция ЭБС
Работу проверил
Ляхова Ольга Леонидовна
ФИО проверяющего
Дата подписи
Чтобы убедиться
в подлинности справки,
используйте QR-код, который
содержит ссылку на отчет.
Ответ на вопрос, является ли обнаруженное заимствование
корректным, система оставляет на усмотрение проверяющего.
Предоставленная информация не подлежит использованию
в коммерческих целях.
Аннотация
Выпускная квалификационная работа имеет объем в количестве 93
страниц компьютерного текста и включает: 66 рисунков, 3 таблицы, 9
приложений, 44 использованных источника.
Ключевыми словами являются:
водоемы, исследование воды,
показатели загрязнения воды, микроорганизмы, заболеваемость, элективный
курс, биология для 9 класса.
Работа по теме: «Микробиологическое исследование воды
открытых водоемов г. Саров и использование его в школьном курсе
биологии 9 класса» сфокусирована на изучении микробиологического
исследования воды открытых водоемов г. Саров и использование его в
школьном курсе биологии 9 класса.
Целью исследования было микробиологическое исследование воды
открытых водоемов г. Саров в период с 2013 по 2017 гг и использование
методик анализа для разработки программы элективного курса «Микромир
воды» в школьном курсе биологии 9 класса.
Объект исследования:
– показатели микробиологического исследования воды открытых
водоемов г. Саров в летний период;
- анализ действующих учебных программ по биологии для основной
школы.
Предмет исследования – микробиологическое исследование воды
открытых водоемов г. Саров и использование его в школьном курсе биологии
9 класса.
Задачи исследования:
1. Рассмотреть основные методы исследования воды открытых водоемов по
литературным источникам и нормативным документам.
2. Проанализировать микробиологические пробы воды некоторых водоемов
г. Саров в период с 2013 по 2017 гг.
3. Изучить заболеваемость населения г. Саров в период с 2013 по 2017 гг.
4. Разработать программу для элективного курса «Микромир воды» в
школьном курсе биологии 9 класса.
Результаты проведенного исследования. Водоемы, находящиеся в
шаговой доступности для населения, являются неблагоприятными в
эпидемиологическом отношении: в них обнаружено наибольшее количество
микроорганизмов, в том числе Е. coli (2013 г). В период исследования
холерный вибрион обнаружен не был. Выявлено, что во всех водоемах
наиболее оптимальной для развития патогенной микрофлоры является
диапазон температур от +15 °С до +19 °С. Не выявлена зависимость уровня
инфекционной заболеваемости населения от количества положительных
микробиологических проб исследуемой воды и от температуры водоема.
На основе методик исследования воды открытых водоемов была
разработана программа элективного курса «Микромир воды» в школьном
курсе биологии 9 класса для учащихся общеобразовательных школ. В
школьном курсе биологии недостаточно полно представлена одна из
крупнейших систематических групп – надцарство Прокариоты. В
программах разных авторов всего лишь в 1 – 2 параграфах уделяется
внимание только строению бактериальной клетки. Особенности
жизнедеятельности и разнообразие микроорганизмов, их роль в разных
биоценозах и для человека остаются необоснованно за рамками школьной
программы.
Методы исследования применялись указанные в методиках,
утвержденных Федеральным медико - биологическим агентством:
1. СанПиН 2.1.5.980-00 Водоотведение населенных мест. Санитарная
охрана водных объектов.
2. МУК 4.2.1884-04 Санитарно-микробиологический и санитарнопаразитологический анализ воды поверхностных водных объектов.
3. МУК 4.2.2218-07 Лабораторная диагностика холеры. Методические
указания.
Благодаря этим методам дается характеристика группе кишечной
палочки (БГКП), колифагов, холерного вибриона; определение общих
колиформных бактерий, патогенных бактерий семейства Enterobacteriaceae
рода Salmonella, холерного вибриона; использовалась методика
статистического анализа изменчивости признака.
Теоретическая значимость состоит в том, что полученные данные
позволяют уточнить имеющиеся в литературе представления об
исследовании микрофлоры окружающей среды, с точки зрения влияния ее на
здоровье человека; расширить кругозор учащихся в знании строения клетки.
Практическая значимость заключается в том, что полученные
данные могут быть использованы в профилактических целях заболеваемости
населения, усовершенствования мониторинга окружающей среды. Нами
была
также
рассмотрена
возможность
применения
методик
микробиологического мониторинга воды в школьном курсе биологии 9
класса. Анализ действующих школьных программ показал недостаточность
использования возможностей раздела «Общая биология» 9 класса в
организации исследовательской деятельности учащихся.
Результаты
исследований, проведенных по теме выпускной
квалификационной работы, опубликованы
в статье Морохотовой В.С.,
Ляховой О.Л. «Микробиологическое исследование воды открытых водоемов
города Саров», материалах IV Международной очной научно-практической
конференции // Актуальные проблемы естественнонаучного образования,
защиты окружающей среды и здоровья человека» (Настоящее и будущее
подготовки учащихся студентов университетов в области естественных
наук): сб. материалов IV Международной очной научно-практической
конференции / ФГБОУ ВО « Орловский государственный университет им.
И.С. Тургенева»- Орел, / ОГУ им. И.С. Тургенева, 2018.
2
3
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ ____________________________________________________
ГЛАВА 1.ХАРАКТЕРИСТИКА ОТКРЫТЫХ ВОДОЕМОВ г. САРОВ___
1.1. Характеристика водоема о. Протяжкинский______________________
1.2. Характеристика водоема п. Варлаамовский ______________________
1.3 Характеристика водоема монастырское урочище Филипповка_______
1.4 Характеристика водоема п. Балыковский_________________________
ГЛАВА 2. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЕ ВОДЫ ОТКРЫТЫХ ВОДОЕМОВ г. САРОВ________________________________________________
2.1. Основные группы микроорганизмов открытых водоемов г. Саров ___
2.1.1. Характеристика группы кишечной палочки (БГКП)______________
2.1.2. Характеристика колифагов __________________________________
2.1.3. Характеристика холерного вибриона __________________________
2.2. Идентификация микроорганизмов______________________________
2.2.1. Определение общих колиформных бактерий____________________
2.2.2. Определение колифагов_____________________________________
2.2.3. Определение патогенных бактерий семейства Enterobacteriaceae
рода Salmonella _________________________________________________
2.2.4. Определение холерного вибриона ____________________________
2.3. Приготовление питательных сред ______________________________
2.4. Статистический анализ изменчивости признака___________________
ГЛАВА 3. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВОДЫ ОТКРЫТЫХ ВОДОЕМОВ г. САРОВ_______________________________
3.1. Изучение микробиологических показателей открытых водоемов
г. Саров________________________________________________________
3.2. Изучение заболеваемости населения г. Саров ____________________
ГЛАВА 4. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТОДИК МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ВОДЫ ОТКРЫТЫХ ВОДОЕМОВ В ШКОЛЬНОМ КУРСЕ БИОЛОГИИ 9 КЛАССА _____________________________
4.1 Возможности школьного курса биологии 9 класса в использовании
методик для определения бактериальных показателей_________________
4.2. Разработка программы элективного курса «Микромир воды»_______
ЗАКЛЮЧЕНИЕ_________________________________________________
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ_________________________________________
ПРИЛОЖЕНИЕ_________________________________________________
5
7
7
8
8
9
10
10
10
11
11
12
12
12
13
13
13
15
16
16
38
48
48
49
71
73
76
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность исследования. В современном мире экологическое состояние окружающей среды играет важную роль в здоровье человека, страны, мира. Для определения загрязненности окружающей среды разработано
множество методов, основанных на биологической оценке. В исследовании
воды открытых водоемов одним из главных методов является микробиологический анализ.
Степень научной разработанности проблемы. Исследованием микрофлоры окружающей среды, с точки зрения влияния ее на здоровье человека,
занимается наука санитарная микробиология. Как возможные источники и
факторы передачи инфекционных заболеваний в санитарной микробиологии
рассматриваются объекты окружающей среды - микрофлора почвы, воды,
воздуха, пищевых продуктов и др. Главными задачами санитарной микробиологии являются:
- мониторинг всех объектов внешней среды, с гигиенической точки
зрения;
- разработка и усовершенствование методов выявления и идентификации патогенных и условно-патогенных микроорганизмов;
Поэтому проведенное нами исследование воды открытых водоемов
вносит определенный вклад в разработку данной проблемы. Нами была также рассмотрена возможность применения методик микробиологического мониторинга воды в школьном курсе биологии 9 класса. Анализ действующих
школьных программ показал недостаточность использования возможностей
раздела «Общая биология» 9 класса в организации исследовательской деятельности учащихся.
Поэтому целью исследования было микробиологическое исследование
воды открытых водоемов г. Саров в период с 2013 по 2017 гг и использование методик анализа для разработки программы элективного курса «Микромир воды» в школьном курсе биологии 9 класса.
Объект исследования:
– показатели микробиологического исследования воды открытых водоемов г. Саров в летний период;
- анализ действующих учебных программ по биологии для основной
школы.
Предмет исследования – микробиологическое исследование воды открытых водоемов г. Саров и использование его в школьном курсе биологии 9
класса.
Задачи исследования:
1. Рассмотреть основные методы исследования воды открытых водоемов по
литературным источникам и нормативным документам.
2. Проанализировать микробиологические пробы воды некоторых водоемов
г. Саров в период с 2013 по 2017 гг.
3. Изучить заболеваемость населения г. Саров в период с 2013 по 2017 гг.
6
4. Разработать программу для элективного курса «Микромир воды» в школьном курсе биологии 9 класса.
Методы исследования применялись указанные в методиках, утвержденных Федеральным медико - биологическим агентством:
1. СанПиН 2.1.5.980-00 Водоотведение населенных мест. Санитарная
охрана водных объектов.
2. МУК 4.2.1884-04 Санитарно-микробиологический и санитарнопаразитологический анализ воды поверхностных водных объектов.
3. МУК 4.2.2218-07 Лабораторная диагностика холеры. Методические
указания.
Благодаря этим методам дается характеристика группе кишечной палочки (БГКП), колифагов, холерного вибриона; определение общих колиформных бактерий, патогенных бактерий семейства Enterobacteriaceae рода
Salmonella,; использовалась методика статистического анализа изменчивости
признака.
Теоретическая значимость состоит в том, что полученные данные позволяют уточнить имеющиеся в литературе представления об исследовании
микрофлоры окружающей среды, с точки зрения влияния ее на здоровье человека; расширить кругозор учащихся в знании строения клетки.
Практическая значимость заключается в том, что полученные данные
могут быть использованы в профилактических целях заболеваемости населения, усовершенствования мониторинга окружающей среды. Нами была также
рассмотрена возможность применения методик микробиологического мониторинга воды в школьном курсе биологии 9 класса. Анализ действующих
школьных программ показал недостаточность использования возможностей
раздела «Общая биология» 9 класса в организации исследовательской деятельности учащихся.
Работа содержит: введение, четыре главы, заключение, список литературы и приложения.
7
ГЛАВА 1.ХАРАКТЕРИСТИКА ОТКРЫТЫХ ВОДОЕМОВ г. САРОВ
В г. Саров Нижегородской области много достопримечательностей, в
их число входят местные памятники природы монастырские пруды, которые
исследовали специалисты Мордовского государственного природного заповедника им. П.Г. Смидовича.
1.1. Характеристика пруда Протяжкинский
П. Протяжкинсий был образован в XIX веке в результате установки
дамбы на реке Саровка монахами Саровского монастыря. Водоем служил
важным объектом хозяйствования. Свое название пруд получил от Протяжкинского ручья, здесь он впадает в реку Саровку. Этот городской водоем является самым большим и протяженным. На берегах водоема проводятся
спортивные соревнования и праздники, есть оборудованные песчаные пляжи,
база спорта [30].
Пруд обладает весьма высоким видовым разнообразием флоры и фауны. Флора представляет 51 вид водных и прибрежно-водных сосудистых растений. Для пруда характерно 7 видов рыб; основными являются окунь, плотва, щука и карась золотой. Зафиксировано 129 видов насекомых. Из амфибий
зарегистрированы прудовая и озерная лягушки, серые жабы. Из рептилий
отмечены веретеница ломкая, прыткая и живородящая ящерицы, гадюка и
уж. При орнитологических наблюдениях выявлено 59 видов птиц. Зафиксировано 7 видов млекопитающих.
Максимальная глубина котловины пруда 4,2 м, классической формы.
Мелководья с глубиной менее 1 м образовывают около 35% площади водоема. Толщина донных отложений составляет 5-50 см.
В котловине пруда объем воды равен 489 тыс. м3. Верхний слой воды
хорошо прогревается летом, его толщина 2 м. В нижних слоях температура
понижается через каждые полметра в среднем на 2°С. Следовательно, вся
толща воды пруда хорошо прогрета. Это происходит благодаря высокой прозрачности воды, которая достигает более 2 м.
Низкая электропроводность воды пруда — 35-36 мкСм/см, объясняется
тем, что питание водоѐма происходит в основном за счет атмосферных осадков, с верховых и переходных болот Мордовского заповедника, где исток
речки Саровка. PH водной среды в целом нейтрален от 6,8 до 7,4 [23].
8
1.2 Характеристика пруда Варлаамовский
П. Варлаамовсий был создан в 1867 году. Свое название он получил в
честь местного монаха Варлаама, который ездил в село Аксел, чтобы купить
хлеб для Саровского монастыря и проезжал мимо тех мест. В то время водоем использовался для накопления талых вод, их сброс приводил к повышению уровня воды в реке Сатис и обеспечивал сплав леса. На данный момент
монастырский пруд является государственным памятником природы регионального значения, статус присвоен в марте 1999 года [29].
По данным сотрудников Мордовского государственного природного
заповедника им. П.Г. Смидовича «пруд Варлаамовсий представлен в виде искусственного водоема, его форма вытянута и изогнута (с юго-востока на северо-запад). Длина пруда составляет 800 м, ширина – 300 м, длина береговой
линии достигает 1550 м. Площадь зеркала составила 10,6 га. Данный водоем
является проточным, его наполняет речка Сысов (Глинка), а также талые и
дождевые воды. Средняя глубина водоема 2 м. Береговые склоны отмечаются как пологие, местами возвышенные. Высота берега от 0 до 3 м. Заболоченность почвы составляет 2% от длины береговой линии. Болото здесь осоковое, низинное. Почвы супесчаные. Водоем находится в лесной зоне города,
по его берегам растут береза, ольха и ива. Песчаные пляжи составляют около
15% от протяженности берега» [43].
1.3 Характеристика водоема монастырское урочище Филипповка
По мнению Н.Ю. Киселевой монастырское урочище Филипповка представлена системой прудов. Она образовалась в результате перекрытия Филиппова ручья дамбой в XIX веке. На тот момент система прудов играла
важную хозяйственную роль для Саровского монастыря, ее использовали для
сплава леса. При сбросе накопленной воды в водоеме обеспечивался подъем
уровня воды в ручье и реке Саровке. Рядом с прудами располагались три поля. В данный момент на двух полях произрастают молодь дуба и сосны (10 –
15 лет), третье поле самовосстанавливается березой. Рядом с прудами располагалась Филиппова пустынка, она принадлежала Саровскому монастырю,
впервые о ней упоминали в монастырских документах в 1822 году. В настоящее время пруды занимают значительную роль в рекреационной жизни города, потому что их берега оборудованы песчаными пляжами. Монастырское
урочище Филипповка является памятником природы регионального значения. Система прудов состоит из трех искусственных проточных водоемов, их
форма вытянута с севера на юг. К ним прилегают восстановленные леса на
месте монастырских полей и пустынки Филипповой [30].
Первый (нижний) пруд имеет длину 450 м, максимальную ширину 80
м, длина береговой линии составляет 980 м, площадь зеркала 2,9 га, рН воды
водоема 6,7.
У второго пруда отмечена длина 600 м, максимальная ширина 200 м,
длина береговой линии 1400 м, площадь зеркала 9,1 га, рН воды водоема 6,2.
9
Третий пруд обладает длиной 300 м, максимальной шириной 200 м,
длина береговой линии насчитывает 980 м, площадь зеркала 5,6 га, рН воды
4,9.
Наполнение водоемов происходит из Филипповского ручья, а также
талыми и дождевыми водами. Средняя глубина 1,5м. Высота береговых
склонов до 3 м, они пологие, местами возвышенные. Заболоченность берега
составляет 5%. От длины береговой линии. Почвы здесь являются супесчаными. 30% от длины береговой линии заняты луговой растительностью. Болота отмечены как низинные и осоковые. Длина песчаных пляжей соответствует 15% от длины береговой линии [43].
1.4 Характеристика водоема пруд Балыковский
Балыковский пруд искусственно созданный водоем, образовался в результате постройки дамбы на пересыхающем ручье. Свое название водоем
получил благодаря дачному поселку, в котором расположен.
По данным сотрудников Мордовского государственного природного
заповедника имени П.Г. Смидовича пруд Балыковский находится в северной
части г. Саров. Площадь пруда примерно равна 9700 м2. Дно в основном
представлено в виде песчаных отложений, но местами есть глинистые грунты
[43].
Флору пруда составляют водоросли и высшие растения. Водоросли состоят в основном из фитопланктона и 38 видов динофитовых, зеленых, синезеленых, диатомовых, эвгленовых, и стрептофитовых водорослей.
Также в состав флоры пруда из высших растений входят только представители цветковых растений. Их насчитывается 95 видов из 76 родов и 34
семейств. Во время исследований из рептилий зарегистрирована чесночница,
прыткая ящерица, уж обыкновенный. Из амфибий отмечены остромордая лягушка и зеленая жаба. Из обитающих птиц: грач, коршун, соловей обыкновенный, белая трясогузка. Млекопитающие представлены грызунами и насекомоядными [23].
10
ГЛАВА 2. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ ВОДЫ ОТКРЫТЫХ ВОДОЕМОВ г. САРОВ
Пробы воды из водоемов отбирают специальными стерильными приборами – батометрами и переливают пробу воды в стерильные бутыли. Далее
бутыли закрывают пробкой, оборачивают стерильным колпачком из крафтбумаги и обвязывают бечевкой. Пробы маркируют [12, 15].
Пробы, поступающие в лабораторию, должны быть исследованы немедленно [1].
2.1. Основные группы микроорганизмов открытых водоемов г. Саров
Вода стала естественной средой обитания для разнообразных растений,
животных, микроорганизмов. Она может стать питательной средой для многих микроорганизмов, если в нее попадают определенные количества органических соединений, что способствует росту и размножению микробов [21,
23].
От многих факторов зависит состав микрофлоры воды водоема, от времени года, температуры, отдаленности водоемов от населенных пунктов.
Разнообразен видовой состав микрофлоры воды. Так основную массу представляют сапрофиты – гетеротрофы. Загрязненные водоемы могут служить
источником распространения многих болезней. Иногда в них обнаруживаются синегнойные палочки, гноеродные кокки, возбудители кишечных инфекций. Патогенные микроорганизмы выделяются больными людьми или бактерионосителями и больными животными. При обнаружении патогенных микробов в воде водоема необходимо провести ряд противоэпидемических мероприятий. «Санитарно – показательные» микроорганизмы являются представителями нормальной микрофлоры организма, но если они обнаружены в
воде водоема, то это свидетельствует о потенциальной опасности исследуемого объекта [13, 27].
Согласно СанПиН 2.1.4.599-96 к санитарно – показательным микроорганизмам относятся бактерии группы кишечной палочки (БГКП), точнее исследуются общие колиформные бактерии (ОКБ) и термотолерантные колиформные бактерии (ТКБ) и определяются колифаги [38, 41].
2.1.1. Характеристика бактерий группы кишечной палочки
(БГКП)
БГКП – это грамотрицательные бактерии, которые способны ферментировать лактозу или глюкозу при 37 °С в течение 24 – 48 часов и не обладают оксидазной активностью (в эту группу также входят сходные по свойствам бактерии родов Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella). При обнаружении
этих бактерий в воде можно говорить о фекальном загрязнении воды. Если
одновременно обнаружены в пробе воды БГКП и энтерококки, то это свиде11
тельствует о свежем фекальном загрязнении объекта. На старое фекальное
загрязнение указывает обнаружение в пробе Clostridium perfringens, а БГКП
отсутствует [9, 42].
Общие колиформные бактерии (ОКБ) – грамотрицательные палочки,
оксидазоотрицательные, не образуют спор, их рост возможен на дифференциальных лактозных средах, способны расщеплять лактозу до молочной кислоты и углекислого газа при температуре 37 ± 1 °С за 24 – 48 ч.
ОКБ – основной показатель, который нормируется при оценке качества
воды водоемов. ОКБ – является совокупным показателем степени фекального
загрязнения, который включает в себя такие показатели как, ТКБ (термотолерантные колиформные бактерии), Е. coli.
Термотолерантные колиформные бактерии (ТКБ) обладают идентичными признаками, что и ОКБ, кроме того, их отличительной способностью
является ферментация лактозы до кислоты и газа при температуре 44 ± 0,5 °С
в течение 24 ч.
ТКБ желательно определять одновременно в одном посеве с ОКБ, это
необходимо для доказательства фекального происхождения загрязнения. В
ходе анализа значение показателей ОКБ и ТКБ в воде водоемов, загрязненных сточными водами, примерно равные [17, 35, 37].
Свидетельством орально – капельного загрязнения водоемов является
обнаружение патогенных стафилококков, зеленящих и гемолитических
стрептококков в исследуемой пробе.
Выявление протея и термофилов в исследуемой пробе подтверждает
загрязнение разлагающимися отбросами [2, 10].
2.1.2. Характеристика колифагов
По данным МУК 4.2.1884-04 колифаги – относятся к бактериальным
вирусам, которые способны расщеплять кишечную палочку, при этом образуются зоны лизиса (бляшки) через 18 ± 2 ч при температуре 37 ± 1°С, которых хорошо заметны на питательном агаре.
Колифаги представляют собой нормируемый показатель. Этот показатель необходим для проведения текущего мониторинга качества воды поверхностных водоемов, служащих источником для питьевого и хозяйственно
– бытового водоснабжения [2, 22].
2.1.3. Характеристика холерного вибриона
Согласно данным МУК 4.2.2218-07 холера является острым инфекционным заболеванием с диарейным синдромом. Пути передачи заболевания:
фекально – оральный, пищевой, водный и контактно – бытовой. Данное заболевание относится к группе особо – опасных инфекций, необходимые меры борьбы с которыми проводятся согласно Международным медико – санитарным правилам (2005) [3, 32].
12
Холерный вибрион является возбудителем холеры. Он подразделяется
на несколько серологических групп, особо опасными являются О1 (классического и эльтор биоваров) и О139 серогрупп.
Токсигенные (ctx+) холерные вибрионы обеих серологических групп
способны вызывать заболевание холерой, распространение которой может
привести к эпидемии и пандемии. Нетоксигенные – (ctx-) – при общем источнике заражения единичные или групповые заболевания холерой.
Характеристика генома выделенных холерных вибрионов биологическими методами широко используется для эпидемиологического анализа и
оценки эпидемической значимости выделенных штаммов [3, 4].
2.2. Идентификация микроорганизмов
2.2.1. Определение ОКБ и ТКБ
Для идентификации ОКБ и ТКБ в воде открытых водоемов используют
бродильный метод. Для этого засевают исследуемую воду в лактозопептонную среду, из расчета разведений: 1 мл исследуемой воды на 10 мл среды,
далее 1 мл из первого разведения воды на 10 мл среды, 1 мл из второго разведения воды на 10 мл среды. Анализ термостатируется при температуре 37 ±
1°С в течение 18 ± 2 ч. После этого анализ пересевается с помощью бактериальной петли на чашки Петри со средой Эндо. Далее чашки с пересевом термостатируется при температуре 37 ± 1°С в течение 18 ± 2 ч, затем идентифицируются выявленные микроорганизмы [1, 2, 4].
2.2.2. Определение колифагов
Колифаги – бактериофаги, способные лизировать кишечную палочку
при температуре 37оС в течение 18 часов [11].
В стерильную емкость отливается 100 мл исследуемой воды, к этому
объему добавляется хлороформ, для ингибирования сопутствующей флоры,
из расчета 5 мл хлороформа на 50 мл исследуемой воды. Время отстаивания
жидкости – 15 минут при комнатной температуре. Затем надосадочная жидкость вносится стерильной пипеткой в чашки Петри по 20 мл.
В питательный агар, расплавленный и остуженный до температуры 44
± 1°С, добавляется смыв Е. coli K12F+ Str-r из расчета 1,0 мл смыва на каждые 100 мл агара, перемешивается.
25 мл смеси агара с кишечной палочкой вносится в чашки Петри с исследуемой водой, слегка приоткрывая крышки. Содержимое чашек осторожно перемешивается и оставляется при комнатной температуре до застывания.
Чашки с застывшим агаром помещаются дном вверх в термостат и инкубируются при температуре 37 ± 1°С в течение 18 ± 2 часов [2, 4].
13
2.2.3. Определение патогенных бактерий семейства
Enterobacteriaceae рода Salmonella
Исследуемая вода в объеме по 500 мл засевается в среды накопления: в
500мл селенитового бульона двойной концентрации и в 500 мл магниевой
среды. Посевы воды в средах накопления инкубируются при температуре 37
± 1°С в течение 18 – 20 ч. Далее производится высев бактериологической
петлей на две чашки с висмут-сульфитным агаром и SS агаром. Чашки с посевами инкубируются при температуре 37 ± 1°С в течение 18-20 ч [2, 4].
2.2.4. Определение холерного вибриона
Исследуемую воду из поверхностных водоемов отбирают в объеме 1 л
на одну пробу в две стерильные емкости по 500 мл, пробка должна быть
непромокаемой. В исследуемую пробу воды вносят раствор основного пептона 1%-й концентрации. Необходимо определить рН, при необходимости
подщелачивают 10%-м раствором едкого натрия до рН 8,4 +/- 0,1. Время инкубации в 1-й среде накопления – 8 – 10 ч при комнатной температуре. Производится перенос материала большой бактериальной петлей во вторую среду накопления и высев на чашки Петри с щелочным агаром, инкубируются в
термостате при температуре 37 ± 1 °С в течение 18ч.
Объем 2-й среды накопления – 10 мл; время инкубации в среде без теллурита калия – 6 ч. Также делается высев на чашки Петри с щелочным агаром, инкубируются в термостате при температуре 37 ± 1 °С в течение 18 ч [3,
4].
2.3. Приготовление питательных сред
Приготовление лактозопептонной среды
В 1 л дистиллированной воды добавляют 10 г пептона, 5 г лактозы, 5 г
натрия хлористого, растворяют при нагревании. После растворения компонентов необходимо добавить индикатор в количестве 2 мл 1,6 % спиртового
раствора бромтимолового синего. РН среды должен быть 7,4 – 7,6. Разливают
среду по 10 мл в пробирки.
Пробирки с готовой средой подвергают стерилизации при температуре
112 ± 2 °С в течение 12 мин [2, 4].
Приготовление среды Эндо
Среда готовится из сухого препарата промышленного производства по
инструкции на этикетке. [2, 4].
14
Приготовление питательного агара
Для установления колифагов прямым методом питательный агар готовят, увеличивая навеску сухого препарата в 2 раза от инструкции на этикетке.
Готовую среду разливают в емкости, их стерилизуют при температуре 120 ±
2 °С 20 мин [2, 4].
Подготовка тест-культуры Е. coli K12F+ Str-r
Производится посев культуры Е. coli K12F+ Str-r в пробирку со скошенным питательным агаром. Посев инкубируется в течение 18 ± 2 ч при
температуре 37 ± 1 °С, далее делается смыв бактерий со скошенного агара и
готовится взвесь Е. coli с концентрацией 109 бактериальных клеток в 1 мл [2,
4].
Приготовление селенитовой среды Лейфсона
Для приготовления селенитового бульона двойной концентрации необходимо увеличить навеску сухого препарата в два раза по инструкции на этикетке [2, 4].
Приготовление магниевой среды
Для приготовления среды из сухого препарата промышленного производства необходимо следовать инструкции на этикетке [2, 4].
Приготовление висмут-сульфит агара
Для приготовления среды из сухого препарата промышленного производства необходимо следовать инструкции на этикетке [2, 4].
Приготовление SS агара
Для приготовления среды из сухого препарата промышленного производства необходимо следовать инструкции на этикетке [2, 4].
Приготовление раствора основного пептона
В 1 л дистиллированной воды растворяют 100 г пептона, 50 г хлорида и
25 г карбоната натрия. Раствор кипятят до полного растворения пептона, его
необходимо постоянно помешивать, затем добавляют 10 г нитрат калия.
Устанавливают рН 8,5 +/- 0,1. Далее раствор необходимо профильтровать через миткалевый или бумажный фильтр. Приготовленную смесь разливают в
посуду и подвергают стерилизации в течение 20 мин. При температуре 120оС
[3, 4].
15
Приготовление раствора 1% пептонной воды
Для получения раствора 1%-й пептонной воды необходимо концентрированный раствор развести в 10 раз дистиллированной водой. После этого
установить рН 8,5 +/- 0,1. Готовый раствор разливают в пробирки или во
флаконы и стерилизуют 20 мин. При давлении 0,7 атм. [3, 4].
Приготовление щелочного мясопептонного агара
Для приготовления агара в 1 л мясной воды вносят 5 г хлорида натрия
и 10 г пептона основного. Полученную смесь перемешивают до полного растворения ингредиентов. Для установления рН 8,3 +/- 0,1 раствор подщелачивают 20%-м раствором едкого натра. Затем в раствор добавляют 20 г агар –
агара, тщательно перемешивают. Среду стерилизуют вначале текучим паром
в течение 30 – 40 мин., а затем при 1 атм. 20 мин. [3, 4].
2.4. Статистический анализ изменчивости признака
Для получения вариационного ряда среднемесячной температуры водоема находим ширину классов интервала, делением размаха варьирования
на число групп, намечаемых при построении вариационного ряда.
Λ = ( Xmax - Xmin ) / K
где λ — величина классового интервала; Xmax, Xmin — максимальная и
минимальная варианты температурного значения; K — число классов, на которое разбиваем вариацию температурного признака.
Λ = 24,5 – 6 / 5 = 3,7
Диапазон температур водоемов распределяем на пять периодов:
1 – от 0 о С до +9,7 о С,
2 – от +9,8 о С до +13,5 о С,
3 – от +13,6 о С до +16,9 о С,
4 – от +17,0 о С до +20,7 о С,
5 – от +20,8 о С до +24,5 о С.
По оси ОY располагаем частоту количества положительных проб воды
водоема. По оси ОX – диапазон температуры воды, оС.
Для оценки характера связи средней температуры водоемов в период с
мая 2011 г по август 2015 г и количества положительных проб были построены полигоны распределения признака по каждому водоему, которые в целом
соответствуют кривой нормального распределения [19]. Графики данных по
каждому водоему представлены на рисунках 36 – 40.
Вариационный ряд – это ряд изменчивости признака, который образован отдельными значениями вариант, расположенных в порядке увеличения или уменьшения количественного выражения признака.
Вариационная кривая – это графическое выражение модификационной изменчивости признака.
16
ГЛАВА 3. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВОДЫ
ОТКРЫТЫХ ВОДОЕМОВ г. САРОВ
Исследования проводились в течение пяти лет, с 2013 по 2017 гг. Анализу подверглись пять водоемов г. Саров: о. Протяжное, п. Филипповское 1 и
п. Филипповское 2, п. Боровое, п. Балыковский. Пробы воды отбирались с
интервалом один раз в десять дней на микробиологические показатели и
один раз в семь дней на наличие холерного вибриона в летний период (с мая
по июнь).
Анализ на микробиологические показатели проводился стандартным
методом по санитарным правилам СанПиН 2.1.5.980-00, МУК 4.2.1884-04,
2004 [1, 2, 4].
Анализ на наличие холерного вибриона проводился стандартным методом по методическим указаниям МУК 4.2.2218-07 [3, 4].
Результаты исследования представлены в приложениях 2 – 4, рисунках
1 – 56.
За весь период исследования Е. coli была обнаружена только в 2013 г
(26.05 и 07.06), в другие года она не была идентифицирована (прил. 2).
В период исследования холерный вибрион не был обнаружен (прил. 3).
3.1. Изучение микробиологических показателей открытых водоемов г. Саров
Нами был проведен анализ количества положительных микробиологических проб в зависимости от средней месячной температуры воды в летний
период по пяти открытым водоемам г. Саров (рис. 1 – 5).
Рис. 1. Зависимость положительных микробиологических проб от средней месячной
температуры воды в летний период в о. Протяжное в 2013 – 2017 гг.
Самая высокая температура (+18,7оС) и наибольшее количество проб
(6), не отвечающих нормативам, зафиксирована в 2015 г (рис. 1).
17
Рис. 2. Зависимость положительных микробиологических проб от средней месячной
температуры воды в летний период в п. Филипповское 1 в 2013 – 2017 гг.
Наиболее высокая температура зафиксирована в 2014 г (+17,3оС) и
2015 г (+18,9оС), а наибольшее количество проб (6), не отвечающим нормативам – в 2014 г (рис. 2).
Рис. 3. Зависимость положительных микробиологических проб от средней месячной
температуры воды в летний период в п. Филипповское 2 в 2013 – 2017 гг.
Наиболее высокая температура зафиксирована в 2014 г (+17,4оС) и в
2015 г (+18,7оС), а наибольшее количество проб, не отвечающим нормативам
– в 2014 г (6) и в 2015 г (5) (рис. 3).
18
Рис. 4. Зависимость положительных микробиологических проб от средней месячной
температуры воды в летний период в п. Боровое в 2013 – 2017 гг.
Наиболее высокая температура зафиксирована в 2014 г (+17,0оС) и в
2015 г (+19,7оС), а наибольшее количество проб, не отвечающим нормативам
– в 2014 г (10) и в 2015 г (7) (рис. 4).
Рис. 5. Зависимость положительных микробиологических проб от средней месячной
температуры воды в летний период в п. Балыковский в 2013 – 2017 гг.
Наиболее высокая температура зафиксирована в 2014 г (+17,5оС) и в
2015 г (+18,7оС), а наибольшее количество проб, не отвечающим нормативам
– в 2014 г (8) и в 2015 г (7) (рис. 5).
В ходе анализа взаимосвязи количества положительных микробиологических проб от среднемесячных летних температур воды выявлено, что во
всех водоемах наиболее эпидемиологической опасной она была, когда ее
температура достигала максимальных значений +15оС - +19,7оС. Это отмечалось в 2014, 2015 гг, когда было наиболее жаркое лето.
19
Стоит отметить, что каждый водоем имеет свою динамику роста микрофлоры, однако во всех пяти водных объектах наблюдалось максимальное
количество положительных микробиологических проб в июле – августе 2014
г и в августе 2015 г.
Для наиболее детального изучения динамики роста микрофлоры о.
Протяжное нами было рассмотрено соотношение средней температуры водоема и количества проб, несоответствующих нормативам по летним месяцам
каждого года (2013 – 2017 гг) (рис. 6 – 10).
Рис. 6. Соотношение средней температуры водоема и количество проб не отвечающих нормативам в о. Протяжное в 2013 г.
Максимальная температура озера отмечена в июле (+21оС), количество
проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в июне (1)
(рис. 6).
Рис. 7. Соотношение средней температуры водоема и количество проб не отвечающих нормативам в о. Протяжное в 2014 г.
Максимальная температура озера отмечена в июле (+20,3оС), количество проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в июле
(3) (рис. 7).
20
Рис. 8. Соотношение средней температуры водоема и количество проб не отвечающих нормативам в о. Протяжное в 2015 г.
Максимальная температура озера отмечена в июне (+23оС), количество
проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в августе (3)
(рис. 8).
Рис. 9. Соотношение средней температуры водоема и количество проб не отвечающих нормативам в о. Протяжное в 2016 г.
Максимальная температура озера отмечена в июле (+19,3оС), количество проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в июне
(3) (рис. 9).
21
Рис. 10. Соотношение средней температуры водоема и количество проб не отвечающих нормативам в о. Протяжное в 2017 г.
Максимальная температура озера отмечена в мае (+15,5оС) и июне
(+23оС), количество проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в мае (2) (рис. 10).
В ходе анализа представленных диаграмм (рис. 6 – 10) было выявлено,
что при температуре от +19оС и более зафиксировано 4 пробы, не отвечающие нормативам. В диапазоне от +18,9оС до +15оС зафиксировано 9 проб, не
отвечающих нормативам. При температуре менее +15оС микроорганизмов
обнаружено не было. Следовательно, наиболее оптимальной температурой
воды для развития микроорганизмов является интервал от +15оС до +19оС.
Для наиболее детального изучения динамики роста микрофлоры п. Филипповское 1 нами было рассмотрено соотношение средней температуры водоема и количества проб, несоответствующих нормативам по летним месяцам каждого года (2013 – 2017 гг) (рис. 11 – 15).
Рис. 11. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Филипповское 1 в 2013 г.
22
Максимальная температура озера отмечена в июле (+21,3оС), количество проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в июне,
июле, августе (1) (рис. 11).
Рис. 12. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Филипповское 1 в 2014 г.
Максимальная температура озера отмечена в июле (+20,5оС), количество проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в августе (3) (рис. 12).
Рис. 13. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Филипповское 1 в 2015 г.
Максимальная температура озера отмечена в мае (+23оС), количество
проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в августе (2)
(рис. 13).
23
Рис. 14. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Филипповское 1 в 2016 г.
Максимальная температура озера отмечена в июле (+19,3оС), количество проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в июне
(2) (рис. 14).
Рис. 15. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Филипповское 1 в 2017 г.
Максимальная температура озера отмечена в июне (+24,5оС), количество проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано во всех
месяцах (1) (рис. 15).
В ходе анализа представленных диаграмм (рис. 11 – 15) было выявлено, что при температуре от +19оС и более зафиксировано 4 пробы, не отвечающие нормативам. В диапазоне от +18,9оС до +15оС зафиксировано 11 проб,
не отвечающих нормативам. При температуре менее +15оС зафиксировано 5
проб, не отвечающих нормативам. Следовательно, наиболее оптимальной
24
температурой воды для развития микроорганизмов является интервал от
+15оС до +19оС.
Для наиболее детального изучения динамики роста микрофлоры п. Филипповское 2 нами было рассмотрено соотношение средней температуры водоема и количества проб, несоответствующих нормативам по летним месяцам каждого года (2013-2017 гг) (рис. 16 – 20).
Рис. 16. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Филипповское 2 в 2013 г.
Максимальная температура озера отмечена в июле (+21,3оС), количество проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в июне
и июле (1) (рис. 16).
Рис. 17. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Филипповское 2 в 2014 г.
Максимальная температура озера отмечена в июле (+20,5оС), количество проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в июле
(3) (рис. 17).
25
Рис. 18. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Филипповское 2 в 2015 г.
Максимальная температура озера отмечена в мае (+23оС), июне
(+21,6оС), количество проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в июне (2) и в августе (2) (рис. 18).
Рис. 19. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Филипповское 2 в 2016 г.
Максимальная температура озера отмечена в июле (+19оС), количество
проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в июне (1) и
в августе (1) (рис. 19).
26
Рис. 20. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Филипповское 2 в 2017 г.
Максимальная температура озера отмечена в июне (+24оС), количество
проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в августе (2)
(рис. 20).
В ходе анализа представленных диаграмм (рис. 16 – 20) было выявлено, что при температуре от +19оС и более зафиксировано 7 пробы, не отвечающие нормативам. В диапазоне от +18,9оС до +15оС зафиксировано 9 проб,
не отвечающих нормативам. При температуре менее +15оС зафиксировано 5
проб, не отвечающих нормативам. Следовательно, наиболее оптимальной
температурой воды, для развития микроорганизмов является интервал от
+15оС до +19оС.
Для наиболее детального изучения динамики роста микрофлоры п. Боровое нами было рассмотрено соотношение средней температуры водоема и
количества проб, несоответствующих нормативам по летним месяцам каждого года (2013-2017гг) (рис. 21 – 25).
Рис. 21. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Боровое в 2013 г.
27
Максимальная температура озера отмечена в июле (+20,3оС), количество проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в июне
(2) (рис. 21).
Рис. 22. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Боровое в 2014 г.
Максимальная температура озера отмечена в июле (+20оС), количество
проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в июле (3),
августе (3) (рис. 22).
Рис. 23. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Боровое в 2015 г.
Максимальная температура озера отмечена в мае (+24оС), количество
проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в августе (3)
(рис. 23).
28
Рис. 24. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Боровое в 2016 г.
Максимальная температура озера отмечена в июле (+19оС), количество
проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в июне (1)
(рис. 24).
Рис. 25. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Боровое в 2017 г.
Максимальная температура озера отмечена в июне (+25оС), количество
проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в мае (2)
(рис. 25).
В ходе анализа представленных диаграмм (рис. 21 – 25) было выявлено, что при температуре от +19оС и более зафиксировано 8 проб, не отвечающих нормативам. В диапазоне от +18,9оС до +15оС зафиксировано 12 проб,
не отвечающих нормативам. При температуре менее +15оС зафиксировано 7
29
проб, не отвечающих нормативам. Следовательно, наиболее оптимальной
температурой воды для развития микроорганизмов является интервал от
+15оС до +19оС.
Для наиболее детального изучения динамики роста микрофлоры п. Балыковский нами было рассмотрено соотношение средней температуры водоема и количества проб, несоответствующих нормативам по летним месяцам
каждого года (2013 – 2017 гг) (рис. 26 – 30).
Рис. 26. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Балыковское в 2013 г.
Максимальная температура озера отмечена в июле (+21оС), количество
проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в июне (3),
июле (3) (рис. 26).
Рис. 27. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Балыковское в 2014 г.
30
Максимальная температура озера отмечена в июле (+20,5оС), количество проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в июле
(3), августе (3) (рис. 27).
Рис. 28. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Балыковское в 2015 г.
Максимальная температура озера отмечена в мае (+22оС) и июле
(+22оС), количество проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в июле (3), августе (3) (рис. 28).
Рис. 29. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Балыковское в 2016 г.
Максимальная температура озера отмечена в июле (+19,6оС), количество проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в июне
(1), июле (1) (рис. 29).
31
Рис. 30. Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Балыковское в 2017 г.
Максимальная температура озера отмечена в июне (+24,5 о), количество
проб воды, не соответствующих нормативам, зарегистрировано в мае (2), августе (2) (рис. 30).
За исследовательский период с мая 2013 г по август 2017 г общее количество положительных проб составило в о. Протяжное – 17, п. Филипповский
1 – 20, п. Филипповский 2 – 21, п. Боровое – 24, п. Балыковский – 31.
В ходе анализа представленных диаграмм (рис. 25 – 30) было выявлено, что при температуре от +19оС и более зафиксировано 8 пробы, не отвечающие нормативам. В диапазоне от +18,9оС до +15оС зафиксировано 14 проб,
не отвечающих нормативам. При температуре менее +15оС зафиксировано 9
проб, не отвечающих нормативам. Следовательно, наиболее оптимальной
температурой воды, для развития микроорганизмов является интервал от
+15оС до +19оС.
В своем исследовании мы проследили по летним месяцам (с июня по
август) рост бактериальной флоры в открытых водоемах г. Саров. Результаты
представлены на рисунках 31 – 35.
32
Рис. 31. Количество проб, не соответствующих нормативным показателям, в о. Протяжное с 2013 г по 2017 г.
Максимальное количество проб (3), не отвечающих нормативам, зафиксировано в июле 2014 г, в августе 2015 г и в июне 2016 г. (рис. 31).
Рис. 32. Количество проб, не соответствующих нормативным показателям, в п. Филипповское 1 с 2013 г по 2017 г.
Максимальное количество проб, не отвечающих нормативам, зафиксировано в августе 2014 г (3), августе 2015 г (2), июне 2016 г (2), (рис. 32).
33
Рис. 33. Количество проб, не соответствующих нормативным показателям, в п. Филипповское 2 с 2013 г по 2017 г.
Максимальное количество проб, не отвечающих нормативам, зафиксировано в июле 2014 г (2), августе 2014 г (3), июне 2015 г(2), августе 2015 г
(2), августе 2017 г (2), (рис. 33).
Рис. 34. Количество проб, не соответствующих нормативным показателям, в п. Боровое с 2013 г по 2017 г.
Максимальное количество проб, не отвечающих нормативам, зафиксировано в июле 2014 г (3), августе 2014 г (3), августе 2015 г (3), (рис. 34).
34
Рис. 35. Количество проб, не соответствующих нормативным показателям, в п. Балыковский с 2013 г по 2017 г.
Максимальное количество проб, не отвечающих нормативам, зафиксировано в июне 2013 г (3), июле 2013 г (3), июле 2014 г (3), августе 2014 г (3),
июле 2015 г (3), августе 2015 г (3), (рис. 35).
Наибольшее количество микробиологических проб, не соответствующих нормативным документам, за исследовательский период (2013 – 2017 гг)
отмечены в п. Боровое и п. Балыковский. Так как эти пруды находятся в жилой части города и испытывают максимальную антропогенную нагрузку. О.
Протяжное, п. Филипповское 1 и 2 находятся в лесопарковой зоне и являются
менее посещаемыми населением объектами, кроме того они являются проточными водоемами и питаются родниковыми источниками. Поэтому самоочищение этих водоемов происходит быстрее и эффективнее.
Сводные диаграммы соотношения средней месячной температуры водоема и количество проб, несоответствующих нормативам, по всем годам
(2013 – 2017) представлены в приложениях 5 – 9.
Для оценки характера связи средней температуры водоемов в период с
мая 2013 г по август 2017 г и количества положительных проб были построены полигоны распределения признака по каждому водоему, которые в целом
соответствуют кривой нормального распределения [19]. Диапазон температур водоемов был распределен на пять периодов:
1 – от 0 о С до +9,7 о С,
2 – от +9,8 о С до +13,5 о С,
3 – от +13,6 о С до +16,9 о С,
4 – от +17,0 о С до +20,7 о С,
5 – от +20,8 о С до +24,5 о С.
35
Графики данных по каждому водоему представлены на рисунках 36 –
40.
8
Кол-во положительных проб
7
6
5
4
3
2
1
0
0
1
2
3
4
5
6
Диапазон температуры водоема, ºС
Рис. 36. Полигон распределения количества положительных проб в зависимости от
среднемесячной температуры в о. Протяжное с мая 2013 г по август 2017 г.
Оценивая график распределения положительных микробиологических
проб, взятых из о. Протяжное, от средней месячной температуры в исследуемый период, выявлено что самая высокая температура зафиксирована в июне
2015 г (+23оС) и в июне 2017 г (+23оС), а максимальное количество проб, не
отвечающих нормативам – в июле 2014г (3), в августе 2015(3)г и в июне
2016г (3).
14
Кол-во положительных проб
12
10
8
6
4
2
0
0
1
2
3
4
5
6
Диапазон температуры воды, ºС
Рис. 37. Полигон распределения количества положительных проб в зависимости от
среднемесячной температуры в п. Филипповский 1 с мая 2013 г по август 2017 г.
Оценивая график распределения положительных микробиологических
проб, взятых из п. Филипповское 1, от средней месячной температуры в ис36
следуемый период, выявлено что самая высокая температура (+24,5оС) зафиксирована в июне 2017 г (+24,5оС), а максимальное количество проб, не
отвечающих нормативам – в августе 2014 г (3).
10
Кол-во положительных проб
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
0
1
2
3
4
5
6
Диапазон температуры воды, ºС
Рис. 38. Полигон распределения количества положительных проб в зависимости от
среднемесячной температуры в п. Филипповский 2 с мая 2013 г по август 2017 г.
Оценивая график распределения положительных микробиологических
проб, взятых из п. Филипповское 2, от средней месячной температуры в исследуемый период, выявлено что самая высокая температура зафиксирована
в июне 2017 г (+24оС), а максимальное количество проб, не отвечающих
нормативам – в июле 2014 г (3).
12
Кол-во положительных проб
10
8
6
4
2
0
0
1
2
3
4
5
6
-2
Диапазон температуры воды, ºС
Рис. 39. Полигон распределения количества положительных проб в зависимости от
среднемесячной температуры в п. Боровое с мая 2013 г по август 2017 г.
Оценивая график распределения положительных микробиологических
проб, взятых из п. Боровое, от средней месячной температуры в исследуемый
период, выявлено что самая высокая температура зафиксирована в июне 2017
37
г (+25оС), а максимальное количество проб, не отвечающих нормативам – в
июле (3) и августе (3) 2014 г, в августе 2015 г (3).
16
Кол-во положительных проб
14
12
10
8
6
4
2
0
0
1
2
3
4
5
6
Диапазон температуры воды, ºС
Рис. 40. Полигон распределения количества положительных проб в зависимости от
среднемесячной температуры в п. Балыковский с мая 2013 г по август 2017 г.
Оценивая график распределения положительных микробиологических
проб, взятых из п. Балыковский, от средней месячной температуры в исследуемый период, выявлено что самая высокая температура зафиксирована в
июне 2017 г (+24,5оС), а максимальное количество проб, не отвечающих
нормативам – в июне (3) и июле (3) 2013 г, в июле (3) и августе (3) 2014 г, в
июле (3) и августе (3) 2015 г.
38
3.2. Изучение инфекционной заболеваемости населения г. Саров
Для изучения связи инфекционных заболеваний населения г. Саров с
загрязненностью микрофлорой водоемов, находящихся на его территории,
было проанализировано количество заболевших разными видами инфекций с
количеством положительных микробиологических проб и среднемесячной
температурой по летним месяцам в период с 2013 по 2017 гг. Полученные
данные представлены на рисунках 41 – 46, приложение 4.
Рис. 41. Зависимость инфекционной заболеваемости населения г. Саров от положительных микробиологических проб воды и среднемесячной температуры воды в
июне – августе 2013 г.
Максимальная заболеваемость населения (78) и максимальное количество проб воды водоемов, не соответствующих нормативам, (8) были отмечены в июне, высокая температура (+21оС) – в июле (рис. 41).
39
Рис. 42. Зависимость инфекционной заболеваемости населения г. Саров от положительных микробиологических проб воды и среднемесячной температуры воды в
июне – августе 2014 г.
Максимальная заболеваемость населения (58) и максимальное количество проб воды водоемов, не соответствующих нормативам, (12) и высокая
температура воды (+20,5оС) зафиксированы в июле (рис. 42).
Рис. 43. Зависимость инфекционной заболеваемости населения г. Саров от положительных микробиологических проб воды и среднемесячной температуры воды в
июне – августе 2015 г.
40
Максимальная заболеваемость населения (51) и максимальное количество проб воды водоемов, не соответствующих нормативам, (13) была отмечена в августе, а высокая температура воды (+22оС) – в июне (рис. 43).
Рис. 44. Зависимость инфекционной заболеваемости населения г. Саров от положительных микробиологических проб воды и среднемесячной температуры воды в
июне – августе 2016 г.
Максимальная заболеваемость населения (62) и максимальное количество проб воды водоемов, не соответствующих нормативам, (8) была отмечена в июне, а высокая температура воды (+20оС) – в июле (рис. 44).
Рис.45. Зависимость инфекционной заболеваемости населения г. Саров от положительных микробиологических проб воды и среднемесячной температуры воды в
июне – августе 2017 г.
41
Максимальная заболеваемость населения (51) была отмечена в августе,
а максимальное количество проб воды водоемов, не соответствующих нормативам, (7) и высокая температура воды (+23оС) в июне (рис. 45).
Усредненные показатели количества положительных проб, средней
температуры водоемов и количество заболевших человек в период с 2013 г
по 2017 г показаны на рисунке 46.
Рис. 46. Зависимость инфекционной заболеваемости населения г. Саров от положительных микробиологических проб воды и среднемесячной температуры воды в период с 2013 г по 2017 г.
В ходе анализа данных по летним месяцам каждого года определенной
взаимосвязи между числом заболевших, средней месячной температурой воды и количеством положительных микробиологических проб выявлено не
было. Однако, при сравнении усредненных данных по годам (рис. 46) прослеживается закономерность, что наиболее неблагоприятными, в эпидемиологическом отношении, являются 2013 г – 61,6 заболевших и 2014 г – 53,3
заболевших, наибольшее количество положительных микробиологических
проб зафиксировано в 2014 г – 9,3, а самая высокая средняя температура воды +17,8оС – в 2014 г.
Лето 2014 г было наиболее жарким. В этот период отмечается максимальное количество положительных микробиологических проб, что способствовало росту патогенной микрофлоры водоема, а это косвенно могло спровоцировать рост инфекционной заболеваемости населения г. Саров.
Для анализа заболеваемости разными типами инфекций населения г.
Саров в летние месяцы, мы разбили их на следующие группы: ОКИ (острые
42
кишечные инфекции) установленной этиологии, ОКИ неустановленной этиологии, энтеровирусные инфекции, вирусные гепатиты (рис. 47 – 51).
Рис. 47. Соотношение разных типов инфекционных заболеваний в июне – августе
2013 г.
ОКИ установленной этиологии максимальное количество (36) зафиксировано в июне; ОКИ неустановленной этиологии (42) – в июне; энтеровирусные инфекции (1) – в июне; вирусные гепатиты (2) – в июне и в августе
(рис. 47).
Рис. 48. Соотношение разных типов инфекционных заболеваний в июне – августе
2014 г.
ОКИ установленной этиологии максимальное количество (27) зафиксировано в июне; ОКИ неустановленной этиологии (37) – в июле; энтеровирусные инфекции (3) – в июне; вирусные гепатиты (3) – в июне (рис. 48).
43
Рис. 49. Соотношение разных типов инфекционных заболеваний в июне – августе
2015 г.
ОКИ установленной этиологии максимальное количество (30) зафиксировано в июне; ОКИ неустановленной этиологии (28) – в августе; энтеровирусные инфекции (10) – в июле; вирусные гепатиты (2) – в июле (рис. 49).
ОКИ ус тановленной этиологии
ОКИ неустановленной этиологии
Энтеровирусные инфекции
Вирус ные гепатиты
40
35
37
30
25
25
23
20
18
17
15
19
10
5
0
1
0
0
0
2
0
VI/2016
VII/2016
VIII/2016
Рис. 50. Соотношение разных типов инфекционных заболеваний в июне – августе
2016 г.
ОКИ установленной этиологии максимальное количество (37) зафиксировано в июне; ОКИ неустановленной этиологии (25) – в июне; энтеровирусные инфекции – отсутствуют; вирусные гепатиты (2) – в августе (рис. 50).
44
Рис. 51. Соотношение разных типов инфекционных заболеваний в июне – августе
2017 г.
ОКИ установленной этиологии максимальное количество (17) зафиксировано в августе; ОКИ неустановленной этиологии (34) – в августе; энтеровирусные инфекции (2) – в июне и августе; вирусные гепатиты (2) – в августе (рис. 51).
В ходе проведенного исследования было выявлено, что доминирующими инфекциями были ОКИ установленной и неустановленной этиологии.
Максимальное количество заболевших отмечается в 2013 и 2014 г.
К ОКИ установленной этиологии относятся:
1) бактериальные возбудители, из них:
а) кишечная палочка (эшерихии);
б) кампилобактерии;
в) иерсинии;
2) вирусные возбудители, из них:
а) ротавирусы;
б) вирусы Норволк;
Энтеровирусные инфекции включают заболевание энтеровирусным
менингитом.
Заболевания вызванные вирусными гепатитами подразделялись только
на виды А, В, С.
Анализ заболеваемости населения г. Саров, вызванной бактериальными и вирусными возбудителями представлен на рисунке 52.
45
50
45
44
47
45
40
40
40
35
32
30
25
32
26
24
20
15
13
10
5
0
2013
2014
2015
Бактериальные возбудители
2016
2017
Вирусные возбудители
Рис. 52. Соотношение количества заболевших человек бактериальными и вирусными инфекциями в период 2013 – 2017 гг.
Максимальное количество выявленных бактериальных возбудителей
отмечено в 2013 г (44) и 2014 г (45), а вирусных возбудителей (47) – в 2013г
(рис. 52).
Анализ заболеваемости населения г. Саров, вызванной ОКИ установленной этиологии в период с 2013 г по 2017 г представлен на рисунке 53.
Рис. 53. Соотношение выявленных ОКИ установленной этиологии по месяцам и годам.
Максимальное количество ОКИ установленной этиологии (37) отмечено в июне 2013 г и 2016 г (рис. 53).
46
Анализ заболеваемости населения г. Саров, вызванной ОКИ неустановленной этиологии в период с 2013 г по 2017 г представлен на рисунке 54.
Рис. 54. Соотношение выявленных ОКИ установленной этиологии по месяцам и годам.
Максимальное количество ОКИ неустановленной этиологии (42) отмечено в июне 2013г (рис. 54).
Анализ заболеваемости населения г. Саров, вызванной энтеровирусными инфекциями в период с 2013 г по 2017 г представлен на рисунке 55.
10
10
9
8
7
6
5
4
4
3
3
2
1
2
1
0
0
1
0
0
0
2013
2014
Июнь
2015
Июль
0
0
2016
0
2
0
2017
Авгус т
Рис. 55. Соотношение выявленных энтеровирусных инфекций по месяцам и годам.
47
Максимальное количество энтеровирусных инфекций (10) отмечено в
июле 2015 г (рис. 55).
Анализ заболеваемости населения г. Саров, вызванной вирусными гепатитами в период с 2013 г по 2017 г представлен на рисунке 56.
3
3
2,5
2
2
2
2
2
1,5
1
1
1
1
0,5
0
0
2013
0
0
2014
Июнь
2015
Июль
0
2016
0
0
0
2017
Авгус т
Рис. 56. Соотношение выявленных вирусных гепатитов по месяцам и годам.
Максимальное количество вирусных гепатитов (3) отмечено в июне
2014 г (рис. 56).
48
ГЛАВА 4. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТОДИК МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ВОДЫ ОТКРЫТЫХ ВОДОЕМОВ В ШКОЛЬНОМ КУРСЕ БИОЛОГИИ 9 КЛАССА
4.1. Возможности школьного курса биологии 9 класса в использовании
методик для определения бактериальных показателей
C целью выявления возможностей школьного курса биологии 9 класса,
в организации микробиологических исследований водной среды мы провели
анализ действующих учебных программ по биологии для основной школы
[16, 17, 22], методической литературы [14, 19, 26, 27], учебников [4, 5, 11, 21,
24]. Полученные результаты представлены в таблице 1.
Таблица 1
Возможности школьного курса биологии 9 класса в организации микробиологических исследований водоемов.
№ Программа
Тема
Микробиологическое исследование
1
1 А.А. Плешакова и Н.И. Сонина «Общая
биология»;
2
Раздел 2. Структурная организация живых организмов.
Глава 11. Строение и функции клеток
25. Прокариотическая клетка.
26. Эукариотическая клетка. Цитоплазма.
27. Эукариотическая клетка. Ядро.
Раздел 5. Взаимоотношения организма и среды.
Основы экологии.
55. Последствия хозяйственной деятельности человека для окружающей среды.
56. Охрана природы и основы рационального природопользования.
Глава 2. Основы учения о клетке.
4. Цитология.
7. Строение клетки.
Глава 9. Основы экологии.
60. Рациональное использование природы и ее
охрана.
3
2 И.Н.Пономаре
вой «Основы
общей биологии»
3 В.В.Пасечника
«Введение в
общую биологию и экологию»
Строение бактериальной клетки.
Микрофлора воды.
Знакомство с методикой исследования воды открытых
водоемов.
Строение бактериальной клетки.
Микрофлора воды.
Знакомство с методикой исследования воды открытых
водоемов.
Раздел 1 Уровни организации живой природы.
Строение бактериГлава 2 Клеточный уровень.
альной клетки.
2.7. Различия в строении клеток эукариот и прока- Микрофлора воды.
риот.
Знакомство с метоРаздел 3 Основы экологии.
дикой исследоваГлава 9 Организм и среда.
ния воды открытых
9.1. Экологические факторы. Условия среды.
водоемов.
Глава 10 Биосфера и человек.
10.2. Антропогенное воздействие на биосферу.
10.3. Основы рационального природопользования.
Полученные результаты свидетельствуют о крайне малых возможностях раздела «Общая биология» 9 класса в организации исследований. Вме49
сте с тем, полученный нами материал открывает широкие возможности использования микробиологических исследований со школьниками в разделе
«Общая биология» во внеурочное время. Это побудило нас к разработке программы элективного курса «Микромир воды», о чем пойдет речь в параграфе
4.2 нашего исследования.
4.2. Разработка программы элективного курса «Микромир воды»
Нами была разработана программа элективного курса «Микромир воды», который проводится как самостоятельный курс. Он рассчитан на учащихся 9 классов.
Цель курса: изучить строение, особенности жизнедеятельности микроорганизмов водоемов.
Задачи курса:
1. Расширить знания учащихся о микроорганизмах, обитающих в воде
и их роль в водном биоценозе.
2. Сформировать у учащихся понимание роли микроорганизмов в сохранении здоровья человека.
3. Сформировать у учащихся умения вести наблюдения за микроорганизмами в лабораторных условиях, умения анализировать и обобщать полученные данные.
4. Продолжить работу по охране природы родного края.
Методы обучения: объяснение, демонстрация наглядного материала,
выполнение лабораторных работ, исследование природного материала.
Теоретические идеи курса:
- экологизация школьного курса биологии;
- формирование экологической культуры учащихся;
- применение теоретических знаний на практике;
- территориальный способ исследования экологических ниш;
- развивающий и воспитательный курс образования.
Ключевые понятия:
«стерилизация»; «асептические условия»; «автоклавирование»; «элективные среды»; «индикаторные среды»; «висячая капля»; «раздавленная капля»; «мазок»; «фиксация»; «иммерсионное масло»; «кокки»; «микрококки»;
«диплококки»; «тетракокки»; «сарцины»; «стафилококки»; «стрептококки»;
«бациллы»; «бактерии»; «вибрионы»; «спириллы»; «спирохеты»; «нитевидные микроорганизмы»; «ветвистые микроорганизмы»; «муреин»; «грамположительные бактерии»; «грамотрицательные бактерии»; «полисапробная
зона»; «мезосапробная зона»; «олигосапробная зона»; «микробное число»;
«коли-титр»; «коли-индекс».
Содержание занятий курса (16 ч)
1.
Общая часть. Правила работы при выполнении микробиологического практикума (5 ч).
Структурная организация лабораторного кабинета, его оборудование и
материал.
50
Методы стерилизации: обжиг, кипячение, стерилизация сухим жаром,
автоклавирование, облучение, химические средства.
Приготовление питательных сред: элективные и индикаторные среды.
По физическому состоянию среды бывают: жидкие, плотные, сыпучие.
Правила работы с микроскопом.
Метод «раздавленной капли». Специфика его применения.
Метод «висячей капли». Специфика его применения.
Этапы приготовления мазка: приготовление мазка, высушивание, фиксация, окраска препарата.
Правила работы с иммерсионным объективом.
Методика приготовления микробиологического препарата, его окраска.
Техника безопасности при работе с микробиологическим препаратом.
Демонстрация оборудования рабочего места, плакатов с изображением лабораторного оборудования, сред в разном физическом состоянии.
Практические работы:
1. Приготовление для стерилизации чашек Петри и пипеток.
2. Приготовление настоев гороха и сена.
3. Приготовление препаратов. Рассматривание микроорганизмов при малом
увеличении методом «раздавленной капли».
4. Приготовление микропрепарата. Рассматривание микроорганизмов при
малом увеличении методом «висячей капли».
5. Приготовление мазка настоя, рассмотрение и зарисовка.
2. Строение бактериальной клетки (5 ч).
Основные формы микроорганизмов.
Методика приготовления мазка, ознакомление с микрофлорой ротовой
полости.
Навыки определения и идентификации микроорганизмов.
Строение клеточной стенки бактерий.
Методика окрашивания мазков препарата, техника безопасности при
работе с красителями.
Дифференцировка клеток микроорганизмов.
Демонстрация временных препаратов, таблиц, рисунков изучаемых
микроорганизмов.
Практические работы:
1. Приготовление мазка зубного налета, окрашивание его метиленовым синим, рассматривание основных групп бактерий, определение и зарисовка.
2. Ознакомление с микрофлорой ротовой полости.
3. Ознакомление с методами дифференциальной окраски мазков.
4. Изготовление мазков сенного и горохового настоев. Окрашивание по Граму.
3. Микрофлора воды. Знакомство с методикой исследования воды открытых водоемов (6 ч).
Особенности микрофлоры воды, факторы, влияющие на рост и развитие микрофлоры.
Дифференцировка водоема на зоны.
51
Методика посева бактерий воды стерильными инструментами.
Бактериальная дифференциальная диагностика водоема.
Идентификация колоний микроорганизмов, подсчет бактерий в 1мл
воды.
Демонстрация временных препаратов, таблиц, рисунков изучаемых
микроорганизмов.
Практические работы:
1. Посев бактерий воды.
2. Описание колоний по схеме, приготовление мазков, определение формы,
зарисовка.
3. Подсчет числа бактерий в 1л воды. Вывод о степени загрязненности воды.
Тематический план представлен в таблице 2.
Таблица 2
Тематический план
Название темы
1
Общая часть. Правила работы при выполнении микробиологического практикума (5 ч)
1. Знакомство с условиями работы в микробиологической лаборатории. Методы
стерилизации. Приготовление питательных сред
2. Изучение микробов в живом и фиксированном состоянии
Строение бактериальной клетки (5 ч)
1. Изучение основных форм микроорганизмов.
2. Окраска по Граму. Строение клеточной
стенки бактерий
Микрофлора воды. Знакомство с методикой исследования воды открытых
водоемов (6 ч)
1. Микрофлора воды
2. Методика исследования воды открытых
водоемов
Количество часов
Теоретические Практические
занятия
занятия
2
3
2
1
1
1
2
1
1
1
1
2
1
2
Ожидаемые результаты обучения
По итогам проведения элективного курса учащиеся должны знать по
теме «Общая часть. Правила работы при выполнении микробиологического
практикума» устройство микробиологической лаборатории, методы стерили52
зации, правила работы с микробиологическим материалом, виды питательных сред, правила работы с микроскопом, метод «раздавленной капли», метод «висячей капли», этапы приготовления мазка, правила работы с иммерсионным объективом, методику приготовления микробиологического препарата, его окраска; уметь подготавливать посуду к стерилизации, готовить
настои из гороха или сена, приготовить мазок настоя, окрасить его и рассмотреть, зарисовать.
После прохождения темы «Строение бактериальной клетки» учащиеся
должны знать основные формы микроорганизмов, методику приготовления
мазка, навыки определения и идентификации микроорганизмов, строение
клеточной стенки бактерий, методику окрашивания мазков препарата, технику безопасности при работе с красителями, дифференцировку клеток микроорганизмов; уметь готовить мазок зубного налета, окрашивать его метиленовым синим и по Граму, определять основные группы бактерий.
По окончании изучения темы «Микрофлора воды. Знакомство с методикой исследования воды открытых водоемов» учащиеся должны знать особенности микрофлоры воды, факторы, влияющие на рост и развитие микрофлоры, дифференцировку водоема на зоны, методику посева бактерий воды
стерильными инструментами, бактериальную дифференциальную диагностику водоема; уметь идентифицировать колонии микроорганизмов, подсчитывать количество бактерий в 1мл воды, производить посев бактерий воды,
описывать колонии микроорганизмов, определять форму микроорганизмов,
давать характеристику экологическому состоянию водоема в зависимости от
обнаружения микроорганизмов.
Список литературы
Для учителя
1. Блинова Н.П. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии/ Н.П. Блинова. — М.: Медицина ,1988.— 208с.
2. Гусев М.В. Микробиология: учебник/ М.В.Гусев. — М.: Академия,
2003. — 464с.
3. Копылова Г.Е. Санитарная микробиология: учебно-методическое пособие/ Г.Е.Копылова, Г.А.Кравченко. – Н. Новгород: ННГУ, 2014. – 42с.
4. Прозоркина Н.В. Основы микробиологии, вирусологии и иммунологии: учебное пособие/ Н.В.Прозоркина, П.А.Рубашкина. — Ростов н/Д.: Феникс, 2002. - 416с.
5. Саруханова Л.Е. Санитарно-микробиологическое исследование объектов внешней среды (почвы, воды, воздуха): учебно-методическое пособие/
Л.Е.Саруханова, Е.Г.Волина. – М.: РУДН, 2010. – 17с.
Для учащихся
1. Блинова Н.П. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии/ Н.П. Блинова. — М.: Медицина ,1988.— 208с.
2. Копылова Г.Е. Санитарная микробиология: учебно-методическое пособие/ Г.Е.Копылова, Г.А.Кравченко. – Н. Новгород: ННГУ, 2014. – 42с.
53
3. Саруханова Л.Е. Санитарно-микробиологическое исследование объектов внешней среды (почвы, воды, воздуха): учебно-методическое пособие/
Л.Е.Саруханова, Е.Г.Волина. – М.: РУДН, 2010. – 17с.
Для данного курса нами были разработаны методические рекомендации к занятиям с использованием различных методик. Не имея возможности
раскрыть в содержании работы все разработанные нами методические рекомендации к занятиям элективного курса, приведем в тексте работы только
три из них [44].
54
ТЕМА 1. Общая часть. Правила работы с микробиологическим материалом
ЗАНЯТИЕ 1. Знакомство с условиями работы в микробиологической лаборатории. Методы стерилизации. Приготовление питательных сред
Цель занятия: познакомить учащихся с устройством микробиологической лаборатории, оборудованием, методами стерилизации, способами приготовления питательных сред.
Задачи занятия:
1. Сформировать знания о технике безопасности, методах стерилизации, способах приготовления питательных сред;
2. Научить учащихся готовить питательные среды;
3. Воспитать у учащихся внимательность при приготовлении питательных сред, заботу о сохранении собственного здоровья;
Материалы и оборудование: горох; сено; газеты; пипетка; вата; чашка Петри; колба на 250 мл; водяная баня; игла для препарирования.
Ключевые термины и понятия:
бактериологическая лаборатория; стерилизация; асептические условия; автоклавирование; элективные среды; индикаторные среды.
Содержание работы:
1. Знакомство с особенностями и правилами работы в микробиологической
лаборатории.
2. Знакомство с методами стерилизации посуды, питательных сред, аппаратурой, применяемой для этой цели.
3. Приготовление для стерилизации чашки Петри и пипетки.
4. Приготовление настоев гороха и сена.
Ход работы:
Бактериологическая лаборатория – учреждение, выполняющее различные микробиологические исследования. В бактериологической лаборатории
проводят анализы с различными целями: диагностические, профилактические. Материалом для исследований служат объекты внешней среды (вода,
воздух, почва), пищевые продукты и т.д.
Помещение лаборатории должно быть изолированным и иметь лабораторную комнату, бокс с предбоксником, моечную, комнату для приготовления сред, автоклавную.
Лабораторная комната, служащая для проведения бактериологических исследований, должна быть просторной, хорошо освещенной, стены
должны быть покрыты материалом, стойким для проведения влажной уборки
и дезинфекции. В лаборатории должен быть водопровод. Из приборов необходимы: термостат, холодильник, микроскопы, лупы и т.д.
Бокс с предбоксником – изолированные помещения, для проведения
исследований в асептических условиях. До и после работы пустой бокс дезинфицируют с помощью облучения бактерицидными лампами.
Комната для приготовления сред – помещение, где готовят, разливают
и стерилизуют питательные среды. Здесь же хранят стерильную посуду.
55
Моечная – комната, специально оборудованная для подготовки посуды
к стерилизации.
Автоклавная – комната, где находятся аппараты для стерилизации: автоклав, сушильные шкафы, печь Пастера.
Оборудование рабочего места – столы
имеют подводку электроэнергии к каждому рабочему месту. Поверхность столов покрывают
пластиком или линолеумом, что облегчает дезинфекцию. На столе должно быть следующее
оборудование: осветительный прибор, микроскоп, набор красителей, бактериологические
петли и иглы (рис. 1), шпатели, пипетки, предметные и покровные стѐкла, стеклянный мостик, кристаллизатор, промывалка с водой, вата,
фланелевая тряпочка, маркер по стеклу, иммерсионное масло, фильтровальная бумага, спиртовка, спички.
Рис. 1. Бактериологическая петля (1)
и бактериологическая игла (2)
Правила работы с микробиологическим материалом:
1) Работать следует в халате.
2) Не разрешается выносить живые культуры бактерий.
3) Не разрешается: есть, пить в лаборатории.
4) После окончания работы материал обеззараживается под контролем преподавателя.
5) На столе не должно быть лишних предметов, дезинфицируют поверхность
стола.
6) Предметы и одежду, на которую случайно попала капля исследуемого материала, немедленно обрабатывают дезинфицирующим раствором (0,5% раствор абсолюцид - дикват).
7) По окончании работы руки моют с мылом [8, 25].
Методы стерилизации
Стерилизация (обеспложивание) – полное освобождение от микроорганизмов и их спор в питательных средах, посуде, инструментах.
Для создания асептических условий, т.е. условий, препятствующих попаданию микробов извне, используют различные методы стерилизации. Рассмотрим некоторые из них:
1)
Стерилизация обжиганием в пламени горелки. Открытый огонь
применяется для стерилизации металлических игл, петлей, шпателей, стеклянных палочек – предметы проводят несколько раз через пламя горелки.
2)
Кипячение. Таким способом стерилизуют резиновые трубки и металлические предметы в особых приборах – стерилизаторах, кипящая вода
при этом подщелачивается. Рекомендуют кипятить в 2% растворе карбоната
натрия в течение 10 минут.
56
3)
Стерилизация сухим жаром. Используют для стерилизации стеклянной посуды. При этом пробирки, колбы закрывают ватными пробками и
заворачивают в оберточную бумагу и вынимают только перед работой. Пипетки перед стерилизацией с концов закрывают ватой. Затем их обертывают
длинными полосками бумаги шириной 3,5 - 4см. Бумагу наматывают по спирали, начиная с конца пипетки. Концы обертки заклеивают. Чашки Петри заворачивают в крафт - бумагу. Подготовленную посуду загружают в сушильный шкаф (рис. 2), в котором она проходит стерилизацию при температуре
160-1700С в течение 2 ч. Повышения температуры выше 1750С допускать не
следует, т.к. при этом ватные пробки темнеют, а бумага становится ломкой.
При таком способе стерилизации погибают споры микроорганизмов и вегетативные клетки. Нельзя открывать шкаф до тех пор, пока температура не
снизится до 800С, т.к. может нарушиться стерильность материала и треснуть
сильно нагретое стекло при перепаде температур. Хранится стерильная посуда в закрытом, защищѐнном от пыли месте. Вскрывают упаковку непосредственно перед использованием.
Рис. 2. Сушильный шкаф: 1 – корпус; 2 – подставка; 3 – стерилизационная камера;
4 – съѐмные полки; 5 – дверца; 6 – отверстие для термометра и вентиляционный колпачок; 7 – сигнальная лампа; 8 – выключатель нагревателя; 9 – рукоятка терморегулятора со шкалой
4)
Стерилизация паром под давлением. Автоклавирование. Это
наиболее универсальный и надежный метод стерилизации инструментов, питательных сред, посуды, халатов. Автоклав – металлический котел с массивной, герметически закрывающейся крышкой, снабженный манометром,
предохранительным клапаном, трубкой для выпускания пара и краном для
выпускания воды (рис. 3). Полная стерилизация питательных сред при 1200С
и давлении 1 атм. обеспечивается нагреванием в течение 20 мин. Температура и длительность автоклавирования зависят от состава питательной среды.
57
Рис. 3. Схема автоклава: 1 – стерилизационная камера; 2 – кран для выхода воздуха;
3 – манометр; 4 – предохранительный клапан; 5 – водопаровая камера; 6 – воронка для
заполнения автоклава водой; 7 – отверстие для поступления пара; 8 – крышка автоклава; 9 – подставка для размещения стерилизуемых материалов
5)
Облучение. Применяют УФЛ, γ-лучи, рентгеновские лучи.
Наибольшее значение имеют УФЛ. В спектре УФ-ламп преобладает излучение в области 260 нм, поглощаемое нуклеиновыми кислотами и вызывающее
гибель всех бактерий. УФ-облучение применяется для стерилизации помещений.
6)
Химические средства. При стерилизации пищевых продуктов,
лекарственных препаратов, приборов оправдало себя применение оксида
этилена, который убивает споры и вегетативные клетки, но действует только
при содержании 5-15% воды [14].
Приготовление питательных сред
Для выращивания микроорганизмов необходимы питательные среды,
поэтому в микробиологических лабораториях их готовят.
Среды должны реализовывать ряд функций накопление, выделение и
сохранение микроорганизмов, а также выращивание культур с целью исследования их обмена веществ. Среда должна включать все компоненты, необходимые для жизнедеятельности клетки.
По назначению различают элективные и индикаторные среды.
Элективные среды предназначены для развития одного вида или группы микроорганизмов и менее пригодны или не пригодны для развития других.
Индикаторные среды необходимы для быстрой идентификации одних
видов микроорганизмов от других. Состав сред подбирается для чѐткого выявления наиболее характерных свойств определѐнного вида.
58
По физическому состоянию среды делятся на жидкие, плотные и сыпучие.
Жидкие среды используют для того, чтобы накопить биомассу или
продукты обмена, сохранить микроорганизмы.
Плотные среды применяют для выделения чистых культур (получение
изолированных колоний), для хранения, количественного учѐта микроорганизмов. Плотность среде придают применение желатина, агар-агара, силикагеля.
Сыпучие среды употребляют в промышленной микробиологии, их пропитывают питательным раствором. К ним относятся: отруби, кварцевый песок, разваренное пшено.
Приготовление настоя гороха – в колбу на 1/3 насыпать гороха, залить водой до половины колбы, закрыть пробкой и поставить в термостат при температуре 270С.
Приготовление настоя сена – в колбу нарезать сена, залить водой, прокипятить в течение 15 минут, поместить в термостат. Подписать карандашом по
стеклу [8].
Контрольные вопросы:
1. Что такое стерилизация?
2. Какие методы стерилизации вы используете в быту?
3. Какая максимальная температура допустима в сушильном шкафу?
4. Какой метод стерилизации самый надежный?
ЗАНЯТИЕ 2. Изучение микробов в живом и фиксированном состоянии
Цель занятия: научить учащихся пользоваться микроскопом, готовить
микропрепараты.
Задачи занятия:
1. Сформировать умения работы с микроскопом;
2. Научить учащихся методикам приготовления микробиологического препарата, его окраски;
3. Продолжить работу по формированию установок на сохранение
здоровья путем соблюдения техники безопасности при работе с микробиологическим препаратом.
Материалы и оборудование: стекло с углублением, вазелин, покровные стекла, предметные стекла, красители, настой сена, микроскоп.
Ключевые термины и понятия:
висячая капля; раздавленная капля; мазок; фиксация; иммерсия; иммерсионное масло; иммерсионный объектив.
Содержание работы:
1. Знакомство с методом «раздавленной капли».
2. Знакомство с методом «висячей капли».
59
3. Знакомство с методикой приготовления мазков.
4. Знакомство с правилами работы с микроскопом.
Ход работы:
Существует 2 метода для изучения микробов в живом состоянии: метод
раздавленной капли и метод висячей капли.
Метод раздавленной капли – На предметное стекло бактериальной петлей наносят каплю жидкости. Покровное стекло ставят на ребро у края капли
и постепенно опускают на нее. Капля должна быть небольшой, чтобы жидкость не выступала за края покровного стекла. Излишки жидкости удаляют
фильтровальной бумагой.
Метод висячей капли – применяют, чтобы наблюдать за размножением
микроорганизмов, образованием и прорастанием спор. Для этой цели используют специальное предметное стекло с лункой посередине. Края лунки нужно смазать вазелином. Далее каплю бактериальной взвеси наносят на покровное стекло и переворачивают его так, чтобы капля висела. Покровное
стекло помещают на углубление предметного стекла, стремясь расположить
каплю в центре, чтобы она не касалась стенок углубления. Капля оказывается
в замкнутом пространстве и создается влажная камера. В такой камере бактерии длительное время остаются живыми, и препарат может быть использован в течение длительного времени (рис. 4).
Рис. 4. Приготовление препарата «висячая капля»
Бактерии удобно рассматривать на окрашенных фиксированных препаратах (мазках), которые имеют ряд преимуществ перед прижизненными:
1) высокую контрастность;
2) возможность дифференцированного выявления клеточных структур;
3) безопасность работы;
4) длительность сохранения препарата[7, 8].
Этапы приготовление мазка
I. Приготовление мазка. Перед работой поверхность предметного стекла натирают сухим мылом, которое удаляют сухой тканью. На обезжиренное
стекло наносят каплю водопроводной воды, микробиологической петлей
60
вносят в нее небольшое количество исследуемого материала. Смесь размазывают петлей на площади 2-3 см2 тонким слоем.
II. Высушивание мазка. Мазок необходимо высушить на воздухе при
комнатной температуре. Если мазок сушится медленно, то его можно досушить слегка нагрев в струе теплого воздуха. Для этого предметное стекло
держат высоко над пламенем горелки мазком вверх, не перегревая его.
III. Фиксация преследует несколько целей:
1) прикрепление клеток к стеклу и предохранение препарата от смывания;
2) мазок становится более восприимчивым к краске;
3) безопасное дальнейшее обращение с мазком.
Фиксируют препарат термической обработкой – трижды проносят через горячую часть пламени горелки, держа предметное стекло мазком вверх.
IV. Окраска препарата может быть простой и сложной. Фиксированный препарат кладут на «мостик», лежащий на стенках кристаллизатора и заливают красителем, следя за тем, чтобы раствор красителя не подсыхал. Через 1-3 минуты промывают препарат водой до обесцвечивания смывных вод.
Затем препарат высушивают, осторожно промокая фильтровальной бумагой,
но лучше оставить на воздухе. Правильно окрашенный препарат - поле зрения остается бесцветным, только клетки микроорганизмов остаются окрашенными.
Суть сложных методов окраски заключается в последовательном
окрашивании двумя или несколькими красителями.
Окрашенный фиксированный мазок удобно рассматривать с иммерсией
[18].
Правила работы с иммерсионным объективом
1) На сухой фиксированный окрашенный препарат наносят каплю иммерсионного масла.
2) Устанавливают объектив 90х и, глядя сбоку, осторожно опускают макровинтом тубус микроскопа до погружения объектива в масло.
3) Наблюдая в окуляр, макровинтом медленно поднимают тубус и фокусируют объект.
4) По окончании микроскопирования поднимают тубус, снимают препарат, протирают фронтальную линзу объектива [7].
Контрольные вопросы:
1. В чем сущность метода «раздавленной капли»?
2. В чем заключается метод «висячей капли»?
3. Назовите этапы приготовления мазка.
4. Какие цели преследует фиксация?
5. Что такое простая и сложная окраска препарата?
6. Как выглядит правильно окрашенный препарат?
ТЕМА 2. Строение бактериальной клетки
ЗАНЯТИЕ 3. Изучение основных форм микроорганизмов
Цель занятия: ознакомление учащихся с основными формами микроорганизмов.
Задачи занятия:
61
1. Сформировать знания учащихся об основных формах микроорганизмов;
2. Познакомить учащихся с методикой приготовления мазка,
3. Сформировать у учащихся умения приготовления микропрепарата микрофлоры ротовой полости;
4. Развить у учащихся умения работы с микроскопом и определения, и идентификации микроорганизмов.
Материалы и оборудование: микроскоп, красители, спички, спиртовки.
Ключевые термины и понятия:
кокки; микрококки; диплококки; тетракокки; сарцины; стафилококки; стрептококки; бациллы; бактерии; вибрионы; спириллы; спирохеты; нитевидные
микроорганизмы; ветвистые микроорганизмы.
Содержание работы:
1. Приготовление мазка зубного налета.
2. Знакомство с микрофлорой ротовой полости.
Ход работы:
Мир микробов весьма многочислен и разнообразен. Морфологически
бактерии различают по форме, величине, взаимному расположению клеток,
по наличию или отсутствию жгутиков и капсул, по способности клеток к
спорообразованию и т.д. Морфологические признаки учитываются при определении систематического положения микроорганизмов.
По форме бактерии бывают: шаровидные, палочковидные, извитые,
ветвистые, нитевидные.
I. Шаровидные бактерии (кокки). Не всегда имеют правильную
круглую форму – они могут быть несколько вытянуты или сплющены. В зависимости от расположения клеток после деления кокки подразделяются на 6
групп:
Микрококки (от греч. «микрос» - малый) – их клетки делятся в одной
плоскости и сразу после деления обособляются, располагаясь одиночно.
Диплококки (от греч. «диплое» - двойной) – делятся в одной плоскости,
после деления располагаются попарно.
Тетракокки (от греч. «тетра» - четыре) – возникают при делении клеток в 2-х взаимно перпендикулярных плоскостях, клетки образуют группы по
4 особи.
Сарцины (от греч. «сарцио» - связываю) – формируются при делении
клеток в 3-х взаимно перпендикулярных плоскостях, при этом образуются
пакеты из 8-16 и более клеток.
Стафилококки (от греч. «стафиле» - виноградная гроздь) – представлены скоплениями клеток, напоминающими виноградные грозди. Деление клеток идет в нескольких плоскостях.
Стрептококки (от греч. «стрептос» - цепочка) – образуются при делении клеток в одной плоскости. Клетки соединены в цепочки.
II. Палочковидные бактерии. Это самая многочисленная и разнообразная группа бактерий. Палочковидные бактерии различаются по величине
62
клеток, их расположению, очертанию концов клетки, по наличию или отсутствию жгутиков.
Палочковидные бактерии, которые способны в неблагоприятных условиях формировать споры, называют бациллами. Большинство палочковидных микроорганизмов – формы неспорообразующие, они называются бактерии.
Большое значение для описания бактерий имеют особенности их расположения и формы. Если бактерии располагаются попарно, их называют –
диплобактерии, если палочки образуют споры и располагаются в виде цепочек, их называют – стрептобациллы. Если бациллы располагаются одиночно,
то это – микробациллы.
III. Извитые бактерии. В зависимости от формы клетки и количества
витков их делят на 3 типа клеток:
Вибрионы представлены короткими изогнутыми палочками в виде запятой.
Спириллы – формы бактерий, имеющие от одного до нескольких завитков.
Спирохеты представлены тонкими длинными клетками штопорообразной формы с большим числом мелких завитков. Число витков спирали является одним из систематических признаков при определении вида. Спирохеты
занимают промежуточное положение между бактериями и простейшими.
IV. Нитевидные микроорганизмы – вытянутые образования, обитатели воды и почвы (серобактерии, железобактерии, фототрофные цианобактерии).
V. Ветвистые микроорганизмы – представлены сильно ветвящимися
формами, похожими на мицелий гриба. Это наиболее высокоорганизованные
формы бактерий (актиномицеты, микобактерии, стебельковые бактерии) [25].
Для детального изучения морфологических групп бактерий готовят
мазки из зубного налета в капле воды. Особенно удачные препараты получаются из налета на кариесных зубах (рис. 5). На препаратах выделяются следующие микроорганизмы:
Leptothrix buccalis
Streptococcus
Diplococcus
Bact. Acidophilum
Spirochaeta buccalis
Spirochaeta dentium
Actinomicetes
Spirochaeta macrodenta
Spirochaeta microdenta [18]
Рис. 5. Микрофлора зубного налета
Контрольные вопросы:
1. На какие подгруппы подразделяются шаровидные бактерии?
63
2. Что такое бациллы?
3. Как называется микроорганизм, имеющий вид запятой?
4. Какие микроорганизмы занимают промежуточное положение между
бактериями и простейшими?
5. Какие микроорганизмы являются типичными обитателями воды и почвы?
6. Какие микроорганизмы являются наиболее высокоорганизованными?
ЗАНЯТИЕ 4. Окраска по Граму. Строение клеточной стенки бактерий
Цель занятия: изучить строение клеточной стенки бактерий.
Задачи занятия:
1. Сформировать у учащихся знания о строении клеточной стенки бактерий;
2. Научить учащихся методикам окрашивания мазков препарата, технике безопасности при работе с красителями;
3. Научить учащихся дифференцировать клетки микроорганизмов.
Материалы и оборудование: раствор Люголя; генцианвиолетовые
бумажки; сенной и гороховый настой; 96% спирт; чашки Петри; агар; красители; спиртовки; микроскопы.
Ключевые термины и понятия:
муреин; грамположительные бактерии; грамотрицательные бактерии.
Содержание работы:
1. Знакомство с методами дифференциальной окраски мазков.
2. Приготовление мазков сенного и горохового настоев с окраской по Граму.
Ход работы:
Клеточная стенка у бактерий тонкая и эластичная, как кожаная покрышка футбольного мяча. Упругость клеточной стенке создается за счет
плотного прилегания к ней изнутри протопласта.
Опорный скелет бактериальной стенки состоит из однородного полимера – пептидогликана муреина.
Одним из наиболее часто применяемых методов дифференциальной
окраски является окраска по Граму. Датский ученый Х. Грам в 1884г. Предложил метод дифференциации микробных клеток, основанный на различии в
химическом составе клеточных оболочек. В зависимости от окраски по этому
методу все бактерии делятся на 2 группы – грамположительные и грамотрицательные (рис. 6).
64
Рис. 6. Схематическое строение клеточной стенки грамположительных (А) и грамотрицательных (Б) бактерий: 1 – цитоплазматическая мембрана; 2 – муреин;
3 – периплазматическое пространство; 4 – наружная мембрана; 5 - нуклеоид
Клеточная стенка грамположительных бактерий плотно прилегает к
цитоплазматической мембране, ее толщина составляет 20-80 нм, муреин в
ней достигает до 90% ее сухой массы.
Клеточная стенка грамотрицательных бактерий является многослойной, толщина ее 14-17 нм, муреин составляет от 1 до 10% ее сухой массы.
При окрашивании фиксированных мазков грамположительные бактерии раствором фиолетового красителя и закреплении его раствором йода в
цитоплазме образуют стойкое соединение красителя с йодом и при последующей обработке мазков спиртом или ацетоном не обесцвечиваются, сохраняя
фиолетовую окраску. Грамотрицательные бактерии не образуют стойкого соединения красителя с йодом в цитоплазме, полностью обесцвечиваются
спиртом или ацетоном, эти мазки нужно дополнительно окрасить [8, 18].
Методика окраски по Граму
1) На высушенный и фиксированный мазок кладут бумажку, пропитанную
генцианвиолетом и смоченную водой. Бумажку держат на мазке 1-2 минуты.
2) Бумажку снимают и обрабатывают мазок 2 минуты раствором Люголя.
3) Раствор Люголя сливают и наливают 96% спирт на 30 секунд.
4) Мазок промывают водой и в течение 1-2 минут обрабатывают фуксином.
5) Мазок промывают водой, высушивают фильтровальной бумагой или на
воздухе, помещают на столик микроскопа и рассматривают.
Бактерии, красящиеся по Грамму положительно, будут темнофиолетовыми, а красящиеся отрицательно – красными [14, 25].
Контрольные вопросы:
1. На чем основывается метод сложной окраски по Граму?
2.На какие группы делятся все микроорганизмы в зависимости от окраски
по Граму?
3.Что представляет собой муреин в химическом плане?
4.В чем отличие в строении клеточной стенки грам + и грам – бактерий?
5.Какие функции выполняет клеточная стенка бактерий?
65
ТЕМА 3. Микрофлора воды. Знакомство с методикой исследования воды открытых водоемов
ЗАНЯТИЕ 5. Микрофлора воды
Цель занятия: изучение особенностей микрофлоры воды.
Задачи занятия:
1. Закрепить знания у учащихся об особенностях микрофлоры воды,
факторах влияющих на нее;
2. Сформировать у учащихся знания о дифференцировки водоема на
зоны;
3. Познакомить учащихся с методикой посева бактерий воды стерильными инструментами.
Материалы и оборудование: пробирки с пробками; пипетки; чашки
Петри; питательный агар.
Ключевые термины и понятия:
полисапробная зона; мезосапробная зона; олигосапробная зона.
Содержание работы:
1. Сделать посев бактерий воды.
Ход работы:
Вода является средой, пригодной не только для сохранения, но и размножения многих микроорганизмов, при этом, чем чище вода, тем скуднее ее
микрофлора.
В воде встречаются самые разнообразные микроорганизмы. Главная
масса их – сапрофиты, но обнаруживаются и болезнетворные бактерии, попадающие с отбросами человека и животных. Обычными обитателями воды
являются водные микроорганизмы. Среди них имеются споровые микробы,
флюоресцирующие, пигментные, серо- и железобактерии, грибы, иногда
дрожжи. Среди факторов, вредно действующих на развитие микроорганизмов в воде, следует указать:
1) солнечный свет, задерживающий развитие микроорганизмов на глубине даже 2м;
2) течение воды, происходящие в ней окислительные процессы, осаждение взвешенных в воде веществ, приводят к уменьшению числа микроорганизмов;
3) биологические факторы – бактериофаг, продукты жизнедеятельности микробов-антагонистов, поедание микробов простейшими и мелкими
животными – обуславливают значительное уменьшение микробного населения водоемов.
Для экологической характеристики водоемов введены понятия трех зон
сапробности:
1) Полисапробная зона – зона сильнейшего загрязнения, где резко выражены гнилостные процессы анаэробного типа. Число бактерий в ней
доходит до 1 млн. в 1 мл.
2) Мезосапробная зона – зона, где происходит распад белков и углеводов
с преобладанием аэробного окисления. Она подразделяется на 2 подзо66
ны α и β. Вода α-зоны содержит от 100 тыс. до 1 млн. бактерий в 1 мл.
Вода β-зоны содержит от 1 тыс. до 100 тыс. бактерий в 1 мл.
3) Олигосапробная зона – содержит небольшое количество органических
веществ и мало бактерий – от 10 до 1000 в 1 мл. Здесь преобладают
процессы окисления.
Посев бактерий воды – в стерильную чашку Петри выливают агар,
чашку закрывают, дают застыть пластинке. Стерильной пипеткой берут 0.2
мл воды, выливают на агар, разравнивают по поверхности. Чашку закрывают,
помещают в термостат при температуре равной 25 – 27 0С, положив ее вверх
дном [14, 18].
Контрольные вопросы:
1. Какие организмы встречаются в воде?
2. Является ли вода благоприятной средой для роста и развития микроорганизмов?
3. В какой части водоема скапливается большое количество микроорганизмов?
4. Назовите факторы, вредно действующие на развитие микроорганизмов в
воде?
5. Охарактеризуйте полисапробную зону?
6. На какие подзоны делится мезосапробная зона?
7. Какие процессы преобладают в олигосапробной зоне?
ЗАНЯТИЕ 6. Методика исследования воды открытых водоемов
Цель занятия: знакомство с методиками исследования воды открытых
водоемов.
Задачи занятия:
1. Сформировать у учащихся знания о бактериальной дифференциальной диагностике водоема;
2. Научить учащихся идентификации колоний микроорганизмов, подсчету бактерий в 1мл воды;
3. Продолжить работу по формированию бережного отношения к собственному здоровью.
Материалы и оборудование: микроскопы; красители; предметные
стѐкла; пробирки с пробками; чашки Петри; питательный агар.
Ключевые термины и понятия:
микробное число; коли-титр; коли-индекс.
Содержание работы:
1. Знакомство со схемами описания колоний.
2. Приготовление мазков представителей колоний.
3. Подсчет числа бактерий в 1мл воды.
67
Идентификация микроорганизмов
Рис. 7. Форма колоний: 1 – круглая; 2 – круглая с фестончатым краем; 3 – круглая с валиком по краю; 4 и 5 – ризоидные; 6 – с ризоидным краем; 7 – амѐбовидная; 8 – нитевидная;
9 – складчатая; 10 – неправильная; 11 – концентрическая; 12 – сложная
Рис. 8. Край колонии: 1 – гладкий; 2 – волнистый; 3 – зубчатый; 4 – лопастной;
5 – неправильный; 6 – реснитчатый; 7 – нитчатый; 8 – ворсинчатый; 9 – ветвистый
68
Рис. 9. Профиль колонии: 1 – изогнутый; 2 – кратерообразный; 3 – бугристый;
4 – врастающий в агар; 5 - плоский; 6 – выпуклый; 7 – каплевидный; 8 – конусовидный
Рис. 10. Структура колонии: 1 – однородная; 2 – мелкозернистая; 3 – крупнозернистая;
4 – струйчатая; 5 - волокнистая
Ход работы:
Для анализа питьевой воды основной целью является выявление
Escherichia coli. Остановимся подробнее на анализе E.coli , который является
простым примером микробиологической дифференциальной диагностики.
E.coli – этот микроб обитает в кишечнике человека, он совершенно безвредный, нахождение его в питьевой воде само по себе неопасно. Человек может
быть носителем патогенных бактерий, которые развиваются в его кишечнике.
Вместе с E.coli эти бактерии могут выделяться с калом и попадая в питьевую
воду, загрязнять ее. Для выделения всех патогенных бактерий пользуются
одним методом, под названием общий индикатор загрязнения. Таким образом, E.coli и служит индикатором. Если его обнаружили в пробе воды, это
означает, что в воде находится содержимое кишечника и кишечные бактерии,
среди которых могут быть патогенные формы. Необходимо срочное принятие эпидемиологических мер. Нормативные показатели питьевой воды - общее число бактериальных клеток в 1мл менее 100; а в 100 мл воды не должно
быть ни одной клетки E.coli.
В среды для хорошего роста E.coli добавляют обогащение в виде пептона, глюкозы или галактозы. Лактозу могут расщеплять немногие бактерии
с помощью фермента β-галактозидазы. Этот фермент способны синтезировать бактерии группы кишечной палочки и молочнокислые бактерии, тогда
как у многих бактерий почвы и воды он отсутствует. Поэтому лактозу добавляют в среды, чтобы подавить рост ненужной флоры и стимулировать рост
необходимых бактерий.
69
Бактерия Enterobacter aerogenes очень сходна по строению с E.coli (оба
вида относятся к одному семейству «группе кишечной палочки»). Средой
обитания этой бактерии является почва; в процессе жизнедеятельности она
образует много газообразных продуктов. Различия ее с E.coli состоят в немногих биохимических признаках [18].
На присутствие газообразующих бактерий указывает появление газа во
время инкубирования пробы, посеянной в раствор с лактозой и пептоном в
бродильных трубках Эйнхорна. Если в одну трубку высеять Escherichia coli, а
в другую - Enterobacter aerogenes, то после термостатирования при 370С 24ч
видны различия в выделении газообразных продуктов. E.aerogenes образовывает, примерно, в два раза больше газа, чем E.coli.
Некоторые молочнокислые бактерии способны расщеплять лактозу с
образованием газообразных веществ, поэтому присутствие их в пробе может
значительно исказить результаты анализа. Следовательно, для дальнейшей
дифференцировки бактерий необходимо использовать дополнительные методы. Например, на агар с эозином и метиленовым синим высеять эту культуру, то для колонии E.coli характерно окрашевание в тѐмно-синий цвет с
металлическим отливом; бактерии Enterobacter образуют слизистые колонии
розового цвета, без металлического блеска.
Микробиологическая оценка воды дается на основании определения:
1) микробного числа;
2) коли-титра;
3) коли-индекса;
4) наличия патогенных микроорганизмов.
Микробное число – общее количество микробов в 1 мл воды.
Коли-титр – наименьший объем воды в мл, содержащий 1 кишечную палочку.
Коли-индекс – количество бактерий группы кишечной палочки в 1л воды
Чтобы подсчитать количество бактерий в 1л воды составляют пропорцию (при условии, что в чашке Петри выросло 15 колоний).
0.2мл => 15
1000мл => X X = (15۰1000)/0.2 = 75000
Данные оформляют в виде таблицы:
Таблица 3
Источник воды
[7, 8, 18]
Количественный учѐт микрофлоры воды
Объем воды
Количество микроорганизмов в 1л воды
70
Контрольные вопросы:
1. Какая бактерия является общим индикатором загрязнения водоема?
2. Какой необходимый ингредиент должен присутствовать в средах для роста
бактерий E.coli?
3. Что такое микробное число?
4. Что такое коли-титр?
5. Что такое коли-индекс?
71
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Здоровье человека всегда будет актуальной темой в современном мире.
Для гигиенической оценки взаимоотношений человека с окружающей средой
необходимо изучать микрофлору среды и те микробиологические процессы,
которые в ней происходят.
Методы исследования воды открытых водоемов представлены в санитарных правилах и нормах СанПиН 2.1.5.980-00, методических указаниях
МУК 4.2.1884-04, МУК 4.2.2218-07 Минздрава России. Они дают четкие указания для проведения анализов и мониторинга окружающей среды, с целью
оценки ее состояния и благополучия для населения.
Вода для патогенных микроорганизмов не является благоприятной
средой для роста и размножения. Тем не менее, некоторые из них способны
сохранять жизнедеятельность долгое время, оставаясь также патогенными, и
при определенных условиях стать возбудителями инфекционных заболеваний. Холерный вибрион может не только выжить, но и размножаться в теплой воде, так как в ней много органических веществ. Для многих инфекционных заболеваний характерен водный путь передачи, например гепатиты А
и Е, сальмонеллез, брюшной тиф, холера, бактериальная дизентерия, полиомиелит, лептоспироз, и многие другие. Поэтому микробиологический мониторинг воды водоемов в черте города это залог здоровья населения.
В г. Саров популярные места купания для населения также являются
памятниками природы, со своим уникальным биоценозом, к которому нужно
бережно относиться.
В результате проведенного исследования были сделаны следующие
выводы:
1. Водоемы, находящиеся в шаговой доступности для населения (п. Боровое и п. Балыковский), являются неблагоприятными в эпидемиологическом отношении: в них обнаружено наибольшее количество микроорганизмов, в том числе Е. coli (2013 г).
2. В период исследования холерный вибрион обнаружен не был.
3. Выявлено, что во всех водоемах наиболее оптимальной для развития
патогенной микрофлоры является диапазон температур от +15о С до +19о С.
4. Не выявлена зависимость уровня инфекционной заболеваемости
населения от количества положительных микробиологических проб исследуемой воды и от температуры водоема.
5. Наиболее распространенными инфекционными заболеваниями в г.
Саров в период 2013 – 2017 гг являются инфекции ОКИ установленной этиологии: кишечная палочка; кампилобактерии; иерсинии; ротавирусы; вирусы
Норволк. Максимальное количество заболевших отмечается в 2013 и 2014 г.
6. На основе методик исследования воды открытых водоемов была разработана программа элективного курса «Микромир воды» в школьном курсе
биологии 9 класса для учащихся общеобразовательных школ.
В школьном курсе биологии недостаточно полно представлена одна из
крупнейших систематических групп – надцарство Прокариоты. В програм72
мах разных авторов всего лишь в 1 – 2 параграфах уделяется внимание только строению бактериальной клетки. Особенности жизнедеятельности и разнообразие микроорганизмов, их роль в разных биоценозах и для человека
остаются необоснованно за рамками школьной программы.
На наш взгляд, именно элективный курс «Микромир воды» способен
заинтересовать учеников биологией, расширить их научный кругозор, привить бережное отношение к окружающей среде и своему здоровью.
73
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. СанПиН 2.1.5.980-00 Водоотведение населенных мест. Санитарная охрана
водных объектов. - М.: Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава
России, 2000.
2. МУК 4.2.1884-04 Санитарно-микробиологический и санитарнопаразитологический анализ воды поверхностных водных объектов. - М.: Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004.
3. МУК 4.2.2218-07 Лабораторная диагностика холеры. Методические указания. - М.: Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России, 2007.
4. Бесплатная библиотека стандартов и нормативов: [Электронный ресурс].
URL: http://www.docload.ru/. (Дата обращения: 12.03.2016).
5. Биология: Общие закономерности. 9 класс: учебник / С.Г.Мамонтов,
В.Б.Захаров, И.Б.Агафонова, Н.И.Сонин. – М.: Дрофа, 2009. – 288с.
6. Биология. Введение в общую биологию и экологию. 9 класс. Учебник для
общеобразовательных учреждений / А.А.Каменский, Е.А.Криксунов,
В.В.Пасечник. - М.: Дрофа, 2013. – 304с.
7. Блинова Н.П. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии /
Н.П. Блинова. — М.: Медицина ,1988.— 208с.
8. Большаков А.М. Руководство к лабораторным занятиям по общей гигиене /
А.М.Большаков. — 2-е изд., перераб. и доп. — М.: Медицина, 2004. — 272с.
9. Большаков А.М. Общая гигиена / А.М.Большаков, И.М.Новикова. — М.:
Медицина, 2002. — 384с.
10. Воробьев А.А. Медицинская и санитарная микробиология: учебное пособие / А.А.Воробьев. — М.: Академия, 2003. — 464с.
11. Гусев М.В. Микробиология: учебник / М.В.Гусев. — М.: Академия, 2003.
— 464с.
12. Задачи санитарной микробиологии: [Электронный ресурс]. URL:
http://www.kemsma.ru/do/microbiology/lekcia.pdf.
(Дата
обращения:
11.03.2016).
13. Зверев В.В. Микробиология: учебник / В.В.Зверев, М.Н.Бойченко. – М.:
ЭОТАР – Медиа, 2014. – 480с.
14. Ившина И.Б. Большой практикум Микробиология: учебное пособие /
И.Б.Ившина. – М.: Проспект науки, 2014. – 112с.
15. Камышева К.С. Микробиология, основы эпидемиологии и методы микробиологических исследований: учебное пособие / К.С.Камышева. – Ростов
н/Д.: Феникс, 2014. – 346с.
16. Козлова Т.А. Биология. 9 класс: Рабочая тетрадь для учащихся общеобразовательных учреждений / Т.А.Козлова, В.С.Кучменко. - М.: Вентана - Граф,
2008. – 112с.
17. Копылова Г.Е. Санитарная микробиология: учебно-методическое пособие
/ Г.Е.Копылова, Г.А.Кравченко. – Н. Новгород: ННГУ, 2014. – 42с.
18. Лабораторный практикум - Санитарная микробиология. Микрофлора воздуха,
воды
и
почвы:
[Электронный
ресурс].
URL:
http://www.studmed.ru/view/laboratornyy-praktikum-sanitarnaya-mikrobiologiya74
mikroflora-vozduha-vody-i-pochvy_4c66fd75a8e.html.
(Дата
обращения:
11.03.2016).
19. Лакин Г.Ф. Биометрия: учебное пособие / Г.Ф.Лакин. – 4-е изд., перераб.
и доп. — М.: Выш. школа, 1990. – 352с.
20. Ловкова Т.А. Биология. Общие закономерности. 9 класс. Методическое
пособие к учебнику С.Г.Мамонтова, В.Б.Захарова, Н.И.Сонина «Биология.
Общие закономерности. 9 класс» / Т.А.Ловкова, Н.И.Сонин. – М.: Дрофа,
2002. – 122с.
21. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. Том 1. / Под
ред. В.В. Зверева, М.Н. Бойченко: [Электронный ресурс]. URL:
http://www.studmedlib.ru/book/ISBN9785970429143.html
22. Микробиология: учебник / А.В.Воробьев, А.С.Быков, Е.П.Пашков,
А.М.Рыбакова. — 2-е изд., перераб. и доп. — М.: Медицина, 2003. — 336с.
23. «Мордовский природный заповедник им. П.Г.Смидовича»: [Электронный
ресурс]. URL: http://zapovednik-mordovia.ru. (Дата обращения: 11.03.2016).
24. Морзунова И.Б. Биология. 5-11 классы. Программы для общеобразовательных учреждений к учебникам Н. И. Сонина / И.Б.Морзунова. - М.: Дрофа, 2011. – 256c.
25. Нетрусов А.И. Микробиология 10 – 11 класс: практикум / А.И.Нетрусов,
И.Б.Котова. – М.: Бином. Лаборатория знаний, 2015. – 112с.
26. Основы медицинской и санитарной микробиологии: учебное пособие для
студентов. Киров: [Электронный ресурс]. URL: http://studall.org/all81469.html. (Дата обращения: 11.03.2016).
27. Основы микробиологии, вирусологии и иммунологии: [Электронный ресурс].
URL:
http://bib.social/mikrobiologiya_1049/osnovyi-mikrobiologiivirusologii.html. (Дата обращения: 11.03.2016).
28. Пальдяева Г.М. Биология. 5-11 классы. Программа для общеобразоват.
учрежд. К комплекту учебников, созданных под руководством
В.В.Пасечника / Г.М.Пальдяева. - М.: Дрофа, 2011. - 96с.
29. Памятники природы Сарова. Об особо охраняемых природных территориях ЗАТО г. Саров / Н.Ю.Киселев, В.Н.Лыков, Н.В.Морохин и др. – Саров:
Альфа, 1999. – 40с.
30. Памятники природы Сарова: [Электронный ресурс]. URL:
dront.ru›files/publications/NK_1999_6.pdf. (Дата обращения: 12.03.2016).
31. Пасечник В.В. Биология. Введение в общую биологию и экологию. 9
класс. Тематическое и поурочное планирование к учебнику А.А.Каменского,
Е.А.Криксунова, В.В.Пасечника «Введение в общую биологию и экологию».
Пособие для учителя / В.В.Пасечник. – М.: Дрофа, 2004. – 128с.
32. Поздеев О.К. Медицинская микробиология / О.К.Поздеев. – М.: Геотар мед, 2001. – 778с.
33. Пономарева И.Н. Общая биология. 9 класс: Ученик для общеобразовательных учреждений / И.Н.Пономарева, О.А.Корнилова, Н.М.Чернова. - М.:
Вентана - Граф, 2013. – 240с.
75
34 Природоведение. Биология. Экология: 5-11 классы: Программы / Т.С. Сухова, В.И. Строганов, И.Н. Пономарѐва и др.– М.: Вентана - Граф, 2009. - 83с.
35. Прозоркина Н.В. Основы микробиологии, вирусологии и иммунологии:
учебное пособие / Н.В.Прозоркина, П.А.Рубашкина. — Ростов н/Д.: Феникс,
2012. - 416с.
36. Рабочая тетрадь для учащихся к учебнику В.Б.Захарова, Н.И.Сонина
«Биология. Общие закономерности. 9 класс». / А.Ю.Цибулевский,
В.Б.Захаров, Н.И.Сонин. - М.: Дрофа, 2003. – 144с.
37. Рубина Е.А. Микробиология, физиология питания, санитария: учебное
пособие / Е.А.Рубина, В.Ф. Малыгина. – М.: Форум, 2013. – 240с.
38. Саруханова Л.Е. Санитарно-микробиологическое исследование объектов
внешней среды (почвы, воды, воздуха): учебно-методическое пособие /
Л.Е.Саруханова, Е.Г.Волина. – М.: РУДН, 2010. – 17с.
39. Семенцова В.Н. Сетевое планирование. Биология. 5-11 классы: Метод.
пособие / В.Н.Семенцева. – СПб.: Паритет, 2001. – 96с.
40. Семенцова В.Н. Биология. Общие закономерности. 9 класс. Технологические карты уроков: Метод. пособие / В.Н.Семенцева. – СПб.: Паритет, 2002. –
192с.
41. Смирнова А.И. Основы медицинской и санитарной микробиологии: учебное пособие / А.И.Смирнова, Е.П.Колеватых, Н.С.Дюпина. - Киров: Кировская государственная медицинская академия, 2005. - 101с.
42. Стожаров А.Н. Медицинская экология: учебное пособие / А.Н.Стожаров.
- Минск: Выш. школа, 2007. — 368с.
43. ФГБУ Мордовский государственный природный заповедник имени П.Г.
Смидовича. – Саранск, 2014.
44. Экологические исследования: Сборник программ кружков, факультативных курсов, практикумов по экологии / Под общей редакцией А.В.Мариной.
– Арзамас: АГПИ, 2000. – 90с.
76
Приложение 1
Водные объекты г. Саров
о. Протяжное
п. Филипповские
п. Балыковский
п.Боровое
77
Приложение 2
Микробиологические и температурные показатели водоемов г. Саров в
период с 2013 по 2017 гг.
Дата отбоНазвание водоема
t окр.ср / t
Санитарно – микробиологичера проб воводы водоские показатели
ОКБ и ТКБ
E. coli
Возб-ли
ды
ема
киш. инф-й
2013 г
26.05
07.06
16.06
28.06
07.07
18.07
28.07
03.08
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
+10/+6
+10/+7
+10/+7
+10/+8
+10/+6
+14/+8
+14/+9
+14/+9
+14/+10
+14/+8
+22/+15
+22/+17
+22/+17
+22/+16
+22/+15
+27/+21
+27/+22
+27/+21
+27/+23
+27/+21
+27/+20
+27/+21
+27/+22
+27/+22
+27/+21
+24/+19
+24/+18
+24/+18
+24/+17
+24/+18
+32/+23
+32/+25
+32/+24
+32/+22
+32/+23
+21/+15
+21/+15
+21/+16
+21/+14
+21/+15
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
78
Продолжение приложения 2
16.08.
24.08
2014 г
11.05
23.05
06.06
13.06
25.06
04.07
16.07
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
+29/+20
+29/+21
+29/+21
+29/+19
+29/+20
+17/+11
+17/+10
+17/+10
+17/+9
+17/+11
+21/+16
+21/+15
+21/+15
+21/+14
+21/+16
+20/+13
+20/+14
+20/+14
+20/+14
+20/+13
+24/+17
+24/+18
+24/+17
+24/+16
+24/+17
+29/+20
+29/+20
+29/+20
+29/+21
+29/+20
+23/+16
+23/+15
+23/+16
+23/+14
+23/+16
+28/+21
+28/+22
+28/+22
+28/+20
+28/+21
+26/+20
+26/+21
+26/+20
+26/+22
+26/+20
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
79
Продолжение приложения 2
25.07
31.07
06.08
13.08
22.08
30.08
2015 г
14.05
05.06
17.06
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
+23/+18
+23/+17
+23/+18
+23/+16
+23/+18
+27/+22
+27/+22
+27/+22
+27/+22
+27/+23
+29/+23
+29/+24
+29/+24
+29/+22
+29/+23
+27/+23
+27/+24
+27/+23
+27/+24
+27/+24
+12/+9
+12/+7
+12/+7
+12/+9
+12/+8
+13/+9
+13/+7
+13/+8
+13/+9
+13/+8
+29/+22
+29/+23
+29/+23
+29/+24
+29/+22
+22/+17
+22/+16
+22/+16
+22/+17
+22/+17
+32/+26
+32/+26
+32/+26
+32/+26
+32/+26
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
80
Продолжение приложения 2
24.06
04.07
15.07
24.07
05.08
12.08
26.08
2016 г
29.05
04.06
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
+28/+23
+28/+24
+28/+23
+28/+24
+28/+23
+29/+21
+29/+22
+29/+22
+29/+23
+29/+21
+25/+19
+25/+20
+25/+19
+25/+21
+25/+19
+18/+12
+18/+13
+18/+13
+18/+14
+18/+12
+22/+18
+22/+16
+22/+16
+22/+18
+22/+17
+31/+19
+31/+20
+31/+20
+31/+18
+31/+19
+14/+10
+14/+10
+14/+10
+14/+12
+14/+11
+22/+16
+22/+15
+22/+14
+22/+16
+22/+16
+30/+20
+30/+22
+30/+22
+30/+23
+30/+24
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
81
Продолжение приложения 2
16.06
24.06
01.07
14.07
21.07
06.08
18.08
25.08
2017 г
13.05
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
+13/+10
+13/+9
+13/+10
+13/+11
+13/+10
+14/+10
+14/+10
+14/+11
+14/+10
+14/+9
+26/+20
+26/+21
+26/+20
+26/+22
+26/+20
+30/+21
+30/+21
+30/+22
+30/+24
+30/+22
+22/+17
+22/+16
+22/+15
+22/+17
+22/+17
+29/+22
+29/+23
+29/+23
+29/+24
+29/+22
+19/+15
+19/+14
+19/+13
+19/+15
+19/+16
+17/+13
+17/+11
+17/+12
+17/+13
+17/+12
+17/+11
+17/+10
+17/+11
+17/+12
+17/+13
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
82
Продолжение приложения 2
27.05
15.06
24.06
06.07
13.07
20.07
03.08
11.08
24.08
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
+29/+20
+29/+22
+29/+22
+29/+23
+29/+21
+31/+25
+31/+25
+31/+25
+31/+26
+31/+26
+28/+23
+28/+24
+28/+23
+28/+24
+28/+23
+18/+12
+18/+12
+18/+12
+18/+13
+18/+13
+21/+15
+21/+15
+21/+15
+21/+15
+21/+15
+18/+13
+18/+12
+18/+12
+18/+13
+18/+14
+23/+14
+23/+15
+23/+15
+23/+16
+23/+15
+27/+13
+27/+13
+27/+13
+27/+13
+27/+13
+18/+9
+18/+9
+18/+9
+18/+9
+18/+9
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
83
Приложение 3
Данные исследования воды открытых водоемов на наличие холерного
вибриона
Дата исследова- Название водоема
t окр.среды/ t Результат
ния
водоема
анализа
2013 г
07.07
18.07
28.07
03.08
16.08
24.08
2014 г
04.07
11.07
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
+27/+19
+27/+19
+27/+19
+27/+19
+27/+19
+24/+17
+24/+18
+24/+18
+24/+17
+24/+17
+32/+24
+32/+25
+32/+25
+32/+25
+32/+24
+21/+16
+21/+16
+21/+16
+21/+15
+21/+16
+29/+22
+29/+21
+29/+22
+29/+21
+29/+21
+17/+12
+17/+11
+17/+11
+17/+12
+17/+12
+28/+22
+28/+19
+28/+20
+28/+21
+28/+20
+32/+24
+32/+24
+32/+24
+32/+23
+32/+24
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
84
Продолжение приложения 3
18.07
25.07
31.07
06.08
13.08
20.08
27.08
2015 г
01.07
09.07
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
+22/+16
+22/+15
+22/+15
+22/+15
+22/+16
+23/+16
+23/+14
+23/+15
+23/+14
+23/+16
+27/+19
+27/+19
+27/+19
+27/+20
+27/+19
+29/+22
+29/+23
+29/+22
+29/+22
+29/+23
+27/+20
+27/+21
+27/+21
+27/+20
+27/+19
+21/+16
+21/+16
+21/+16
+21/+15
+21/+16
+20/+15
+20/+15
+20/+14
+20/+15
+20/+15
+26/+20
+26/+20
+26/+19
+26/+19
+26/+20
+23/+15
+23/+15
+23/+14
+23/+15
+23/+16
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
85
Продолжение приложения 3
23.07
30.07
06.08
14.08
19.08
27.08
2016 г
09.07
15.07
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
+15/+10
+15/+11
+15/+10
+15/+11
+15/+12
+21/+14
+21/+14
+21/+13
+21/+15
+21/+14
+27/+22
+27/+22
+27/+21
+27/+22
+27/+20
+32/+23
+32/+24
+32/+23
+32/+24
+32/+25
+23/+16
+23/+15
+23/+14
+23/+16
+23/+15
+18/+11
+18/+10
+18/+09
+18/+10
+18/+11
+26/+18
+26/+19
+26/+18
+26/+18
+26/+17
+34/+23
+34/+25
+34/+24
+34/+23
+34/+25
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
86
Продолжение приложения 3
22.07
28.07
05.08
12.08
19.08
26.08
2017 г
07.07
14.07
22.07
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
+24/+16
+24/+15
+24/+15
+24/+16
+24/+15
+24/+17
+24/+16
+24/+15
+24/+17
+24/+17
+27/+22
+27/+21
+27/+20
+27/+21
+27/+21
+29/+21
+29/+22
+29/+22
+29/+21
+29/+20
+24/+18
+24/+18
+24/+17
+24/+18
+24/+16
+20/+13
+20/+14
+20/+13
+20/+15
+20/+13
+17/+10
+17/+11
+17/+12
+17/+11
+17/+12
+17/+11
+17/+10
+17/+11
+17/+12
+17/+11
+22/+13
+22/+14
+22/+15
+22/+13
+22/+15
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
87
Продолжение приложения 3
05.08
12.08
25.08
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
Озеро «Протяжное»
Пруд «Филипповское»1
Пруд «Филипповское»2
Пруд «Боровое»
Пруд «Балыковский»
+22/+13
+22/+15
+22/+15
+22/+14
+22/+15
+24/+17
+24/+16
+24/+15
+24/+16
+24/+15
+23/+13
+23/+15
+23/+15
+23/+14
+23/+15
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
Не обнаружено
88
Приложение 4
Заболеваемость населения г. Саров в период с 2013 по 2017 гг.
2013 г
2014 г
2015 г
2016 г
показатели
VII
VIII
общ
36 27
28
18 15
2
11
VI
I. ОКИ, вызванные установленными бактериальными,
вирусными возбудителями.
Всего
1) бактериальные возбудители
а) из них кишечной палочкой
(эшерихии)
б) кампилобактериями
в) иерсиниями
2) вирусные
а)ротавирусы
б)вирусом Норволк
II. ОКИ, неустановленными
инфекционными возбудителями
III. энтеровирусные инфекции
а) менингит энтеровирусный
IV. вирусные гепатиты
а) А
б) В
в) С
3
VI
VII
VIII
общ
VI
общ
23
66 37 18 17
72
12
14
1
40 23 11
4 3
40
5
5
2
VIII
91
27 21 21 69 30 13
44
21 11 13 45 20
3
6
общ
2017 г
VII
I
VII
VI
VII
6
2
VI
VIII
общ
16
17
45
4
4
2
13
4
13
13
1
32
32
34
69
2
4
VII
3
17
17
47
44
6
6
7
7
9
9
26 14
26 14
11
11
32
32
7
7
1
12
12
29
94
30 37 24 91 20 17
28
65 25 23 19
67
17
18
1
1
3
1
2
1
1
4
3
2
3
3
18 12
15 12
3
42 23
2
2
10
10
8
8
1
4
1
1
1
1
24 10
24 10
2
4
3
1
4
10
14
1
2
2
3
2
1
1
7
7
2
1
1
2
1
3
2
1
1
89
Приложение 5
Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в о. Протяжное в
период с мая 2013 г по август 2017 г.
90
Приложение 6
Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Филипповское 1
в период с мая 2013 г по август 2017 г.
91
Приложение 7
Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Филипповское 2
в период с мая 2013 г по август 2017 г.
92
Приложение 8
Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Боровое в период с мая 2013 г по август 2017 г.
93
Приложение 9
Соотношение средней температуры водоема и количество проб, не отвечающих нормативам, в п. Балыковский в
период с мая 2013 г по август 2017 г.
94
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа