close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

...СЕМЕЙНОГО УСТРОЙСТВА ДЕТЕЙ И ИХ ОТЛИЧИЯ;doc

код для вставкиСкачать
ПВИ
ИНФЕКЦИИ
Комплекты реагентов
для выявления
папилломавирусных инфекций
Папилломавирусные инфекции
Комплекты реагентов для выявления
папилломавирусных инфекций
Папилломавирусная инфекция (ПВИ) урогенитального тракта – наиболее часто встречающееся заболевание, передающееся половым путем. Возбудителем является вирус папилломы человека
(ВПЧ). Передача ВПЧ также возможна бытовым или вертикальным (от матери к плоду) путем.
Известно более 120 типов ВПЧ, подробно описано около 80, из них 34 поражают аногенитальную область. Вирус обладает тропностью к эпителиальным клеткам человека (наиболее чувствительна зона трансформации шейки матки), может вызывать пролиферацию тканей.
КОД ПО МКБ-10
В97.7 Папилломавирусы
А63.0 Аногенитальные (венерические) бородавки
D29.0 Доброкачественные неоплазии мужских половых органов
N87.0 Неоплазии шейки матки
Различают следующие генотипы ВПЧ:
• высокого онкогенного риска – 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68;
• низкого онкогенного риска – 6, 11, 42, 43, 44.
Генотипы ВПЧ с низкой степенью риска выявляются при развитии доброкачественных новообразований (кондиломы, бородавки и т. д.). У больных плоскоклеточной карциномой и аденокарциномой выявляются генотипы ВПЧ высокой степени риска.
Риск развития папилломавирусной инфекции увеличивают:
• низкая сексуальная культура населения;
• раннее начало половой жизни;
• частая смена и значительное число половых партнеров;
• патологии со стороны иммунной системы;
• беременность;
• длительное применение лекарственных препаратов (кортикостероидов, цитостатиков и т.д.);
• наличие сопутствующих инфекций, передаваемых половым путем;
• курение и злоупотребление алкоголем.
Следует отметить, что у 70 % молодых людей в возрасте от 15 до 25 лет ВПЧ элиминируется в
течение 18-24 месяцев, у пациентов после 35 лет ВПЧ персистирует более продолжительное время.
Скорость элиминации ВПЧ зависит от иммунореактивности клеток организма хозяина и значительно
снижается при инфицировании несколькими типами ВПЧ.
Обследованию на ВПЧ подлежат:
• сексуально активные пациенты (раннее начало половой жизни, частая смена партнеров,
значительное число половых партнеров);
• пациенты, имеющие клиническую симптоматику инфекционно-воспалительного процесса
урогенитального тракта;
• пациенты, имеющие клинические проявления ВПЧ;
• женщины, имеющие патологию шейки матки;
• пациенты, планирующие беременность.
Своевременная диагностика предраковых состояний шейки матки (ШМ) имеет важное значение для предотвращения злокачественных новообразований.
Методы обследования:
• клинико-визуальный метод;
• кольпоскопия;
• молекулярно-биологические методы (ПЦР, тест DIGENE);
• цитологическое исследование мазков, полученных из эндо- и экзоцервикса (мазки по
Папаниколау, РАР-тест);
• жидкостная цитология;
• гистологический метод.
Цитологическое исследование мазков, полученных из эндо- и экзоцервикса (мазки по
Папаниколау, РАР-тест) является скрининговым методом диагностики РШМ и имеет диагностическое значение при клинической и субклинических формах ПВИ. При латентной форме изменения
плоского эпителия не выявляются. Точность результатов данного метода диагностики зависит от
качества получения материала, техники приготовления образца, квалификации врача клинико-диагностической лаборатории и т.д. Чувствительность метода – 68–86 %, специфичность – 78–99 %.
Папилломавирусные инфекции
ВПЧ высокого онкогенного риска выявлен в 99,7 % случаев у пациенток с раком шейки матки
(РШМ). В России от РШМ ежегодно умирают более 6000 женщин. В возрастной группе от 15 до 40
лет в 15 % случаев РШМ является причиной смерти больных злокачественными опухолями.
Пациентки, инфицированные высокоонкогенными ВПЧ, входят в группу риска по возникновению осложнений течения беременности, родов, пороков развития плода и плаценты, осложнений
после малых гинекологических операций. ВПЧ широко распространен среди подростков и молодых
людей преимущественно до 25 лет.
Папилломавирусные инфекции
Самым распространенным молекулярно-биологическим методом исследования, рекомендованным для проведения скрининга на ВПЧ, является ПЦР в режиме реального времени. Данный метод
позволяет определить возбудителя с последующим его типированием, существенно сократить время,
необходимое для проведения анализа, и осуществить не только скрининг, но и количественное исследование вируса в клетках. Чувствительность метода составляет 88–100 %, специфичность – 68–97 %.
Необходимо помнить, что обнаружение ВПЧ высокого онкогенного риска при использовании
молекулярно-диагностических методов диагностики и отсутствие диагностических признаков ВПЧ
при использовании других методов исследования, позволяет отнести пациентку к группе высокого онкогенного риска и вызывает необходимость наблюдения в лечебно-профилактических
учреждениях.
Развитие молекулярной биологии и установление роли вирусов папилломы человека в развитии РШМ привели к тому, что ДНК-диагностика ВПЧ-инфекции рассматривается в настоящее
время как основа скрининга и профилактики этого тяжелого заболевания. Во многих странах накоплен положительный опыт применения различных методов определения ДНК ВПЧ в скрининговых
исследованиях.
На основании накопленных данных были сформулированы требования к молекулярно-биологическим методам обнаружения ДНК ВПЧ:
• не менее 10 высокоонкогенных типов (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58);
• высокая чувствительность – более 95 %;
• высокая специфичность;
• ВПЧ тест должен быть простым и быстрым в исполнении, недорогим, учет результатов
должен быть автоматизирован.
Диагностика ПВИ и выявление ВПЧ в рамках скрининга РШМ с использованием метода ПЦР
также могут включать определение вирусной нагрузки. Данное исследование может быть использовано для:
• определения тактики ведения пациента;
• динамического наблюдения;
• оценки эффективности лечения;
• прогноза течения заболевания.
Материал для исследования методом ПЦР:
• соскоб из цервикального канала, уретры, влагалища;
• соскоб с поверхности кожи и слизистых;
• соскоб с поверхности экзофитной кондиломы;
• предметное стекло с имеющимся материалом для цитологического исследования;
• ткани, полученные при биопсии.
Несомненными преимуществами использования ДНК-диагностики являются:
• генотипирование и количественная оценка папиллом;
• высокая аналитическая чувствительность;
• высокая аналитическая специфичность теста;
• высокая скорость проведения анализа.
Компания «ДНК-Технология» разработала комплекты реагентов для выявления папилломавирусных инфекций (табл. 1).
Вирус папилломы человека высокого
онкогенного риска HPV (16, 31, 35); (33,
52, 58); (18, 39, 45, 59)
Вирус папилломы человека высокого
онкогенного риска HPV (16, 31, 35)
Вирус папилломы человека высокого
онкогенного риска HPV (33, 52, 58)
Вирус папилломы человека высокого
онкогенного риска HPV (18, 39, 45, 59)
Вирус папилломы человека HPV
(16, 31, 33, 35, 35H, 58, 52, 67)
Вирус папилломы человека HPV
(18, 45, 39, 59)
Вирус папилломы человека HPV
(51, 26)
Вирус папилломы человека HPV
(6, 11)
HPV квант-4* (6, 11, 16, 18)
HPV квант-15* (16, 31, 33, 35, 52, 58, 6,
11, 18, 39, 45, 59, 51, 56, 68)
HPV квант-21* (6, 11, 44, 16, 18, 26, 31,
33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66,
68, 73, 82)
Вирус папилломы человека (ВПЧ)
(HPV11)
HPV Квант-4* (16, 18)
Вирус папилломы человека (ВПЧ)
(HPV6)
Вирус папилломы человека HPV (16, 18)
Наименование возбудителя
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
*
*
*
*
–
–
–
–
–
–
*
*
*
*
*
*
*
–
–
–
–
*
*
*
*
*
Формат детекции
Flash
Rt
–
*
Форез
–
*
–
*
*
*
–
–
–
–
–
–
–
–
–
qPCR
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
R1-P323-S3/9
R1-P323-23/9
R1-P324-S3/4
R1-P322-S3/9
R1-P322-23/9
R1-P317-S3/5
R1-P316-S3/4
R1-P315-S3/4
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
E1-P302-50/1
E1-P302-20/1
E1-P303-50/1
E1-P303-20/1
E1-P304-50/1
E1-P304-20/1
E1-P305-50/1
E1-P305-20/1
–
–
R1-P311-23/9
R1-P311-S3/9
R1-P312-23/9
R1-P312-S3/9
R1-P313-23/9
R1-P313-S3/9
–
–
R1-P310-23/9
R1-P310-S3/9
Каталожный номер
Flash
Rt
F1-P301-51/1 R1-P301-23/9
F1-P301-52/1 R1-P301-S3/9
F1-P301-21/1 R1-P301-24/9
–
–
E1-P301-50/1
E1-P301-20/1
Форез
R1-P324-S3/4
–
–
–
R1-P317-S3/5
R1-P316-S3/4
R1-P315-S3/4
–
–
–
–
–
–
–
–
–
qPCR
Папилломавирусные инфекции
–
2010/08811
–
2010/08811
2010/08811
2010/08811
–
–
–
–
–
–
–
–
2008/03845
ФСР
Таблица 1. Комплекты реагентов для выявления папилломавирусных инфекций производства компании «ДНК-Технология»
Папилломавирусные инфекции
Формат наборов:
Наборы раскапаны в пробирки:
• стрипованные (8 шт. по 0,2 мл); (для HPV КВАНТ – только стрипованные пробирки);
• единичные (0,5 мл или 0,2 мл).
Температура хранения: +2 – + 8 °С.
Срок годности:
• форез – 9 месяцев;
• FLASH – 9 месяцев;
• Rt – 9 месяцев (кроме HPV КВАНТ – 6 месяцев).
Рекомендуемые комплекты реагентов для выделения ДНК:
• ПРОБА-РАПИД;
• ПРОБА-НК;
• ПРОБА-ГС;
• ПРОБА-НК-ПЛЮС (для HPV КВАНТ);
• ПРОБА-ГС-ПЛЮС (для HPV КВАНТ).
Рекомендуемые дополнительные реагенты:
• реагенты для контроля качества ДНК (КВМ) предназначены для определения и приблизительной оценки количества геномной ДНК человека методом ПЦР в режиме реального
времени в биологическом материале человека;
• для HPV КВАНТ КВМ входит в состав набора.
Оборудование, необходимое для проведения анализа:
• для комплектов реагентов в формате FLASH – «Джин», «Джин-4» или аналоги;
• для комплектов реагентов в формате Rt:
– приборы серии ДТ производства ООО «НПО ДНК-Технология» (ДТлайт, ДТпрайм, ДТ96, ДТ-322);
– приборы IQ Cycler производства «Bio-Rad Laboratories».
Для проведения анализа с использованием стрипованных пробирок необходимо дополнительное оборудование: штатив и насадка на микроцентрифугу-вортекс для стрипованного пластика.
Рис.1. Приборы производства компании
«ДНК-Технология»
А. Детектор полимеразной цепной реакции флуоресцентный «Джин-4»
Б. Амплификатор детектирующий DTlite
В. Амплификатор детектирующий DTprime
Уникальные технические характеристики приборов позволяют существенно сократить общее
время проведения анализа. Значительная экономия времени исследования обеспечивает высокую
пропускную способность лаборатории.
Кроме того, программа позволяет выдавать результаты в удобной и наглядной форме для анализа полученных данных врачами-клиницистами (рис. 2).
Папилломавирусные инфекции
Приборы производства компании «ДНК-Технология» оснащены специально разработанным
русскоязычным программным обеспечением, поддерживающим автоматическую обработку данных и выдачу результатов исследования в удобной для интерпретации форме (рис. 1).
Папилломавирусные инфекции
А
Б
Номер
лунки
Идентификатор пробирки
A1
Образец 1 (HPV 16, 31, 35)
A2
A3
A4
A5
A6
A7
A8
А9
А10
А11
А12
В1
В2
В3
В4
В5
В6
В7
В8
В9
В10
В11
В12
С1
С2
С3
С4
С5
С6
С7
С8
С9
С10
С11
С12
D1
D2
D3
D4
D5
Образец 1 (HPV 18, 39, 45, 59)
Образец 1 (HPV 33, 52, 58)
Образец 2 (HPV 16, 31, 35)
Образец 2 (HPV 18, 39, 45, 59)
Образец 2 (HPV 33, 52, 58)
Образец 3 (HPV 16, 31, 35)
Образец 3 (HPV 18, 39, 45, 59)
Образец 3 (HPV 33, 52, 58)
Образец 4 (HPV 16, 31, 35)
Образец 4 (HPV 18, 39, 45, 59)
Образец 4 (HPV 33, 52, 58)
Образец 5 (HPV 16, 31, 35)
Образец 5 (HPV 18, 39, 45, 59)
Образец 5 (HPV 33, 52, 58)
Образец 6 (HPV 16, 31, 35)
Образец 6 (HPV 18, 39, 45, 59)
Образец 6 (HPV 33, 52, 58)
Образец 7 (HPV 16, 31, 35)
Образец 7 (HPV 18, 39, 45, 59)
Образец 7 (HPV 33, 52, 58)
Образец 8 (HPV 16, 31, 35)
Образец 8 (HPV 18, 39, 45, 59)
Образец 8 (HPV 33, 52, 58)
Образец 9 (HPV 16, 31, 35)
Образец 9 (HPV 18, 39, 45, 59)
Образец 9 (HPV 33, 52, 58)
Образец 10 (HPV 16, 31, 35)
Образец 10 (HPV 18, 39, 45, 59)
Образец 10 (HPV 33, 52, 58)
Образец 11 (HPV 16, 31, 35)
Образец 11 (HPV 18, 39, 45, 59)
Образец 11 (HPV 33, 52, 58)
Образец 12 (HPV 16, 31, 35)
Образец 12 (HPV 18, 39, 45, 59)
Образец 12 (HPV 33, 52, 58)
Образец 13 (HPV 16, 31, 35)
Образец 13 (HPV 18, 39, 45, 59)
Образец 13 (HPV 33, 52, 58)
Образец 14 (HPV 16, 31, 35)
Образец 14 (HPV 18, 39, 45, 59)
Cp, Fam
27,8
28,1
24,7
25,3
36,8
Cp, Hex
Результат
34,3
–
29,8
32,3
30,1
29,5
32,4
30,2
29,7
32,5
30,4
29,7
31,6
34,6
29,8
31,7
34,0
29,9
33,8
33,6
29,8
32,8
29,2
29,5
32,3
30,5
29,8
31,5
30,4
29,9
32,1
34,5
29,7
31,7
33,5
29,8
31,8
29,9
29,9
32,0
34,1
30,0
+
–
–
–
–
–
+
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
+
+
–
–
+
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
Папилломавирусные инфекции
Качественный анализ
Папилломавирусные инфекции
В
Название
исследования
№
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
HPV 31
HPV 35
HPV 16
HPV 52
HPV 33
HPV 68
HPV 45
HPV 82
HPV 51
HPV 6
HPV 44
HPV 11
HPV 18
HPV 39
HPV 58
HPV 66
HPV 26
HPV 53
HPV 59
HPV 56
HPV 73
КВМ
Результаты
Относительный,
(Х/КВМ)
Абсолютный,
Lg (копия/образец)
не выявлено
не выявлено
1,4
не выявлено
не выявлено
не выявлено
не выявлено
не выявлено
не выявлено
2,6
- 0,2
не выявлено
не выявлено
не выявлено
не выявлено
не выявлено
не выявлено
- 0,1
2,1
0,7
не выявлено
не выявлено
не выявлено
6,2
не выявлено
не выявлено
не выявлено
не выявлено
не выявлено
не выявлено
7,4
4,6
не выявлено
не выявлено
не выявлено
не выявлено
не выявлено
не выявлено
4,7
6,9
5,5
не выявлено
4,8
Качественный
Рис. 2. Результаты анализа ПЦР
А. Результаты анализа в формате FLASH (прибор «Джин-4»)
Б. Результаты качественного анализа в формате Rt (приборы серии ДТ)
В. Результаты количественного анализа в формате Rt (приборы серии ДТ)
Контакты офиса:
ООО «ДНК-Технология» Адрес: Москва, Варшавское шоссе, д. 125 Ж, корп. 6
Тел./факс: (495) 980-45-55 www.dna-technology.ru, [email protected]
Служба клиентской поддержки:
8 800 200-75-15 (звонок по России бесплатный), [email protected]
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа