close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

РУССКИЙ ЯЗЫК;pdf

код для вставкиСкачать
Набор MACS Annexin V (GMP). Инструмент, позволяющий улучшить качество
сперматозоидов, используемых для искусственного оплодотворения.
Вспомогательные репродуктивные технологии (или ART, Assisted Reproductive
Technology) – совокупность методов, позволяющих достичь беременности искусственным
или частично искусственным способом.
Экстракорпоральное оплодотворение (или IVF, In Vitro Fertilization). Ооциты
оплодотворяются сперматозоидами вне тела.
Процесс включает в себя следующие шаги:
• Гормональный контроль овуляции
• Извлечение яйцеклетки из яичника женщины
• Приготовление спермы (опционально – криоконсервирование)
• Оплодотворение ооцита сперматозоидом (традиционное ЭКО или ИКСИ)
ИКСИ (ICSI, Intra Cytoplasmic Sperm Injection) - интрацитоплазматическое введение
спермы, предпочитаемый метод в случаях мужского бесплодия.
Традиционное ЭКО. Большая яйцеклетка окружена множеством сперматозоидов.
ИКСИ. Пипетка (слева) удерживает ооцит (в центре). Сперматозоид вводится в
яйцеклетку через специальную тонкую иглу (справа). Яйцеклетка окружена
прозрачной оболочной - вителлиновым слоем (внеклеточное вещество,
покрывающее плазматическую мембрану яйцеклетки, обеспечивающее
видоспецифичность проникновения сперматозоида).
Качество спермы играет существенную роль для осуществления успешного
искусственного оплодотворения, особенно при ИКСИ.
Спермограмма – тест, позволяющий определить оплодотворяющую способность спермы
(оценивается качество и количество спермы).
Наиболее часто используемые параметры – концентрация, подвижность, скорость,
морфология.
Дополнительные параметры – фрагментация ДНК, оценка митохондриального
мембранного потенциала, апоптоз.
Технология подготовки спермы
• Центрифугирование в градиенте плотности (DGC, Density Gradient Centrifugation) –
выделение нормальных сперматозоидов, использование перколла (синтетическая
среда для фракционирования), например, Puresperm®
• Методика «swim-up». Селекция подвижных сперматозоидов (в среде, содержащей
синтетические заменители сыворотки). Метод может комбинироваться с
градиентным центрифугированием или применятся отдельно.
• Дзета-метод. Селекция основана на мембранном поверхностном заряде
сперматозоидов.
• Комбинация вышеперечисленных методов.
Но: ни один из этих методов не способен специфично удалить сперматозоиды,
претерпевающие апоптоз.
У большинства нормальных, жизнеспособных эукариотических клеток фосфатидилсерин
(PS, phosphatidylserine - фосфолипид) расположен на цитозольной (внутренней) стороне
плазматической мембраны. Перераспределение фосфатидилсерина с внутренней
поверхности липидного бислоя на наружную является ранним признаком апоптоза.
Фосфатидилсерин, попавший на поверхность, называется экстернализованным
фосфатидилсерином (externalized phosphatidylserine). Белок аннексин А5 (Annexin V)
обладает высокой аффинностью к фосфатидилсерину.
Микрочастицы, связанные с Annexin V (Annexin V MicroBeads), используются для
изоляции клеток с экстернализованным фосфатидилсерином.
«Хорошие» сперматозоиды: жизнеспособные; EPS-негативные (не связывают annexin V)
«Плохие» сперматозоиды: претерпевающие апоптоз или метрвые; EPS-позитивные
(связывают annexin V). Могут быть удалены путем деплеции.
Выводы:
•
•
•
Качество спермы является важным параметром, влияющим на успешный исход
искусственного оплодотворения
Претерпевающие апоптоз или мертвые сперматозоиды ухудшают качество спермы,
что может препятствовать осуществлению искусственного оплодотворения
Улучшение качества подготовки спермы, используемой для искусственного
оплодотворения, повышает шансы на успех искусственного оплодотворения
•
•
Существующие методы улучшения качества спермы, такие как центрифугирование
в градиенте плотности, не являются специфичными
Связанные с аннексином 5А микрочастицы (Annexin V MicroBeads), способные
связывать экстернализованный фосфатидилсерин (EPS), используются для
деплеции клеток, подверженных апоптозу, или мертвых клеток.
Информация для заказа набора MACS GMP Annexin V Kit: каталожный номер: 170-076126 (предназначен для проведения 5 сепараций).
Внимание! Для сепарации необходим магнитный модуль MiniMACS (каталожный номер
130-042-102).
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа